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Fabrication of Nano-engineered Transparent Conducting Oxides by Pulsed Laser Deposition

Nanosecond Pulsed  Laser Deposition (PLD) in the presence of a background gas allows the deposition  of metal oxides with tunable morphology, structure, ...

Politecnico di Milano

&#x6211;&#x4EEC;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x91D1;&#x94F6; micropatterned &#x6A21;&#x677F;&#x5265;&#x5149;&#x8863;&#x670D;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x62A5;&#x544A;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x7B14;&#x65B9;&#x6CD5; dip (DPN) &#x7684; DNA &#x9635;&#x5217;&#x4E0A;&#x3002;DNA &#x9635;&#x5217;&#x5DF2;&#x7528;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; &#xFF08;AFM&#xFF09; &#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5141;&#x8BB8; multi-instrument &#x548C; multitechnique &#x7684;&#x5730;&#x65B9;&#x68C0;&#x6D4B;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x6807;&#x51C6;&#x5149;&#x5B66;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x4E0E;&#x626B;&#x63CF;&#x96A7;&#x9053;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; (STM) &#x663E;&#x793A;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x6A21;&#x677F;&#x5265;&#x5149;&#x8863;&#x670D;&#x886C;&#x5E95;&#x4F7F;&#x4FBF;&#x4E8E;&#x68C0;&#x7D22;&#x7684; DPN &#x5B98;&#x80FD;&#x533A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x975E;&#x76DF;&#x65B9;&#x5757; &#xFF08;&#x5927;&#x7EA6; 5-10 &#x7C97;&#x7CD9;&#x5EA6;&#xFF09; &#x5E73;&#x6ED1;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x5141;&#x8BB8; AFM/STM &#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x65E0;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x76EE;&#x6807; DNA &#x4E0E;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x9635;&#x5217;&#x6742;&#x4EA4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x91D1;&#x94F6;&#x57FA;&#x677F;&#xFF0C;&#x5E26;&#x56FE;&#x6848;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x68C0;&#x7D22;&#x80FD;&#x529B;&#x7ED3;&#x5408;&#x6A21;&#x677F;&#x7684;&#x5E73;&#x6574;&#x5EA6;&#x5265;&#x79BB;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x4E3A; DPN &#x7EB3;&#x7C73;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x548C; DNA &#x7EB3;&#x7C73;&#x9635;&#x5217;&#x57FA;&#x4E8E;&#x626B;&#x63CF;&#x63A2;&#x9488;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x6807;&#x7B7E;&#x514D;&#x8D39;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x91D1;&#x94F6;&#x6A21;&#x677F;&#x5265;&#x5149;&#x626B;&#x63CF;&#x63A2;&#x9488;&#x8C03;&#x67E5;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684; dip &#x7B14;&#x65B9;&#x6CD5; DNA &#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;

We report on DNA arrays produced by dip pen nanolithography (DPN) on a novel Au-Ag micropatterned template stripped surface. DNA arrays have been investigated by atomic force microscopy (AFM) and scanning tunneling microscopy (STM) showing that the patterned template stripped substrate enables easy retrieval of the DPN-functionalized zone with a standard optical microscope permitting multi-instrument and multitechnique local detection and analysis. Moreover the smooth surface of the Au squares ( approximately 5-10 A roughness) allows AFM/STM to be sensitive to the hybridization of the oligonucleotide array with label-free target DNA. Our Au-Ag substrates, combining the retrieving capabilities of the patterned surface with the smoothness of the template stripped technique, are candidates for the investigation of DPN nanostructures and for the development of label-free detection methods for DNA nanoarrays based on the use of scanning probes.

Au-Ag template stripped pattern for scanning probe investigations of DNA arrays produced by dip pen nanolithography.

Nous pr&eacute;sentons les tableaux d&#39;ADN produites par dip pen nanolithographie (DPN) sur une surface de mod&egrave;le d&eacute;pouill&eacute; de micromotifs Au-Ag roman. Tableaux d&#39;ADN ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;es par microscopie &agrave; force atomique (AFM) et microscopie effet tunnel (STM) montrant que le mod&egrave;le &agrave; motifs d&eacute;pouill&eacute;s substrat permet de retrouver facilement la zone NDP fonctionnalis&eacute;s avec un microscope optique standard permettant l&#39;analyse et la d&eacute;tection locale multi-instruments et maintenance multitechnique. Plus la surface lisse des places Au (environ 5-10 rugosit&eacute;) permet d&#39;AFM/STM est sensible &agrave; l&#39;hybridation de l&#39;oligonucl&eacute;otide avec l&#39;ADN cible exempte d&#39;&eacute;tiquette. Nos substrats Au-Ag, combinant les fonctionnalit&eacute;s de r&eacute;cup&eacute;ration de la surface &agrave; motifs avec la finesse du mod&egrave;le d&eacute;pouill&eacute; technique, sont candidats pour l&#39;&eacute;tude des nanostructures de NDP et pour le d&eacute;veloppement de m&eacute;thodes de d&eacute;tection exempte d&#39;&eacute;tiquette de NANOMATRICES d&#39;ADN bas&eacute; sur l&#39;utilisation de sondes de balayage.

Mod&egrave;le au-Ag d&eacute;pouill&eacute; de mod&egrave;le pour l&#39;analyse des enqu&ecirc;tes de la sonde de matrices d&#39;ADN produites par dip pen nanolithographie.

Wir berichten &uuml;ber DNA-Arrays von Dip Stift Nanolithographie (DPN) produziert auf einer neuartigen Au-Ag Micropatterned Vorlage entfernt Oberfl&auml;che. DNA-Arrays haben durch Rasterkraftmikroskopie (AFM) untersucht worden und scanning tunneling Mikroskopie (STM) zeigen, dass die gemusterte Vorlage Substrat entfernt erm&ouml;glicht einfachen Abruf der DPN-funktionalisierten Zone mit einer Norm optisches Mikroskop erlaubt Eidsvoll und multitechnique lokalen Erkennung und Analyse. Au&szlig;erdem erlaubt die glatte Oberfl&auml;che der Au Quadrate (ca. 5-10 Rauheit) AFM/STM empfindlich auf die Hybridisierung der Oligonukleotid-Arrays mit Etikett-freie Ziel DNA sein. Unsere Au-Ag-Substrate, die Abrufen von Funktionen der gemusterten Oberfl&auml;che mit der Gl&auml;tte der Vorlage kombiniert Technik entfernt, sind Kandidaten f&uuml;r die Untersuchung von DPN Nanostrukturen und f&uuml;r die Entwicklung der Etikett-freie Nachweismethoden f&uuml;r DNA-Nanoarrays basiert auf der Verwendung von Messsonden.

Au-Ag-Vorlage entfernt Muster f&uuml;r das Scannen von Sonde Untersuchungen von DNA-Arrays von Dip Stift Nanolithographie produziert.

Segnaliamo su matrici di DNA prodotti da dip pen nanolitografia (DPN) su una superficie di modello spogliato micropatterned Au-Ag romanzo. Matrici di DNA sono state indagate da microscopia a forza atomica (AFM) e scanning tunneling microscopy (STM), mostrando che il modello poligonale spogliato substrato consente facile recupero della zona di DPN-funzionalizzati con un microscopio ottico standard permettendo analisi e rilevamento locale valleyist e multitechnique. Inoltre la superficie liscia delle piazze Au (circa 5-10 rugosit&agrave;) permette di AFM/STM sensibili per l&#39;ibridazione della matrice del oligonucleotide con DNA dell&#39;obiettivo privo di etichetta. Nostri substrati di Au-Ag, che combina le funzionalit&agrave; di recuperare della superficie modellata con la morbidezza del modello spogliato tecnica, sono i candidati per l&#39;indagine di DPN nanostrutture e per lo sviluppo di metodi di rilevamento privo di etichetta per nanoarrays DNA basata sull&#39;uso di sonde di scansione.

Modello au-Ag spogliato motivo per la scansione di sonda indagini di matrici di DNA prodotti da dip pen nanolitografia.

&#x30C7;&#x30A3;&#x30C3;&#x30D7; &#x30CA;&#x30CE;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC; (DPN) &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B; DNA &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x91D1;-&#x9280;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CE;&#x30BF;&#x30AF;&#x30B7;&#x30B9;&#x524A;&#x9664;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x9762;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; (AFM) &#x306B;&#x3088;&#x308B; DNA &#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3001;&#x8D70;&#x67FB;&#x578B;&#x30C8;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; (STM) &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x5265;&#x596A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059; DPN &#x5B98;&#x80FD;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x691C;&#x7D22;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1; &#x30FB; &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A5;&#x30EB;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068; multitechnique &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x3068;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;&#x5149;&#x5B66;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x3002;&#x307E;&#x305F; Au &#x6B63;&#x65B9;&#x5F62; (&#x7D04; 5-10 &#x306E;&#x7C97;&#x3055;) &#x306E;&#x6ED1;&#x3089;&#x304B;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;/STM &#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x7121;&#x6599;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; DNA &#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306E;&#x4EA4;&#x914D;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x306E;&#x53D6;&#x5F97;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x6ED1;&#x3089;&#x304B;&#x3055;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x91D1;-&#x9280;&#x57FA;&#x677F;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x5265;&#x596A;&#x3001;DPN &#x30CA;&#x30CE;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8D70;&#x67FB;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; DNA nanoarrays &#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB;&#x691C;&#x51FA;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x8005;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x91D1;-&#x9280;&#x30C6;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x8ABF;&#x67FB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30C3;&#x30D7; &#x30CA;&#x30CE;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B; DNA &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306E;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3; &#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC18C;&#xC124; Au-Ag micropatterned &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF; &#xC81C;&#xAC70; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; DNA &#xBC30;&#xC5F4; &#xB525; &#xD39C; &#xB098;&#xB178;&#xB9AC; (DPN)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. DNA &#xBC30;&#xC5F4;&#xC740; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5B4; &#xACE0; &#xD130;&#xB110;&#xB9C1; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (STM) &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C; &#xAE30;&#xD310; &#xC81C;&#xAC70; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0; &#xC2A4;&#xCE94; DPN functionalized &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC26C;&#xC6B4; &#xAC80;&#xC0C9; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xACE0; multitechnique &#xB85C;&#xCEEC; &#xAC80;&#xC0C9; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD45C;&#xC900; &#xAD11;&#xD559; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C;. &#xB610;&#xD55C; Au &#xC0AC;&#xAC01;&#xD615; (&#xC57D; 5-10 &#xAC70;&#xCE60;&#xAE30;)&#xC758; &#xB9E4;&#xB044;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xD45C;&#xBA74;&#xC744; AFM/STM &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC5C6;&#xB294; &#xB300;&#xC0C1; DNA&#xC640; oligonucleotide array&#xC758; &#xAD50; &#xC7A1;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD328;&#xD134;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xD45C;&#xBA74; &#xAC80;&#xC0C9; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC11C;&#xC2DD; &#xD30C;&#xC77C;&#xC758; &#xBD80;&#xB4DC;&#xB7EC;&#xC6C0;&#xC744; &#xD568;&#xAED8; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; Au-Ag &#xAE30;&#xD310; &#xAE30;&#xC220; &#xBC15;&#xD0C8;, &#xD6C4;&#xBCF4; DPN nanostructures &#xC870;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xAC00;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; DNA nanoarrays&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC5C6;&#xB294; &#xD0D0;&#xC9C0; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;.

Au-Ag &#xD15C;&#xD50C;&#xB9BF;&#xC744; &#xBC15;&#xD0C8; &#xB525; &#xD39C; &#xB098;&#xB178;&#xB9AC; &#xC81C;&#xC791;&#xD55C; DNA &#xBC30;&#xC5F4;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC870;&#xC0AC; &#xC2A4;&#xCE94; &#xD328;&#xD134;.

Divulgamos sobre arreglos de ADN producidos por inmersi&oacute;n pluma Nanolitograf&iacute;a (DPN) sobre una superficie de plantilla despojado de micropatterned au-AG novela. Matrices de ADN han sido investigadas por microscop&iacute;a de fuerza at&oacute;mica (AFM) y microscop&iacute;a t&uacute;nel (STM) mostrando que la plantilla patr&oacute;n hab&iacute;a despojado sustrato permite la f&aacute;cil recuperaci&oacute;n de la zona de DPN-funcionalizados con un microscopio &oacute;ptico est&aacute;ndar, permitiendo el an&aacute;lisis y la detecci&oacute;n local Multi-instrumento y multitechnique. Por otra parte, la superficie lisa de las plazas de Au (aproximadamente 5-10 rugosidad) permite AFM/STM ser sensible a la hibridaci&oacute;n de la matriz de oligonucle&oacute;tidos con etiqueta libre de ADN diana. Nuestros sustratos au-AG, combina las capacidades de recuperaci&oacute;n de la superficie modelada con la suavidad de la plantilla t&eacute;cnica de despojado, son candidatos para la investigaci&oacute;n de nanoestructuras DPN y para el desarrollo de m&eacute;todos de detecci&oacute;n libre de etiqueta para nanoarrays de ADN basada en el uso de sensores de escaneo.

Plantilla de au-AG despojado patr&oacute;n para el escaneo de las investigaciones de la sonda de DNA arrays producidos por inmersi&oacute;n pluma Nanolitograf&iacute;a.

&#x86CB;&#x767D;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x63A7;&#x5236;&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x548C;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6311;&#x6218;&#x4E4B;&#x4E00;&#x5C31;&#x662F;&#x4ECE;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269; substoichiometric &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x80BD;&#x7684;&#x6D53;&#x7F29;&#x3002;&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x949B; &#xFF08;TiO2&#xFF09;-&#x73B0;&#x5728;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5E94;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7684;&#x8272;&#x8C31;&#x5206;&#x79BB;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x6548;&#x7387;&#x548C;&#x7075;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x65B0;&#x578B;&#x7684; TiO2 &#x6D82;&#x5C42;&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;&#x7535;&#x79BB;&#x677F;&#x662F;&#x63D0;&#x51FA;&#x548C;&#x4ECE;&#x590D;&#x6742;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x65B0;&#x9896;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x8109;&#x51B2;&#x7684;&#x6FC0;&#x5149;&#x6C89;&#x79EF; (PLD) &#x6C89;&#x79EF;&#x7684;&#x7EB3;&#x7C73; TiO2 &#x819C;&#x5728;&#x4E0D;&#x9508;&#x94A2;&#x677F;&#x4E0A;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528; alpha-&#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &beta;-&#x916A;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x975E;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6458;&#x8981;&#xFF0C;&#x6210;&#x529F;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#x662F;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x88C5;&#x7F6E;&#x79F0;&#x4E3A; T &#x578B;&#x94A2;&#x677F;&#xFF0C;&#x5373;&#x4F7F;&#x5728;&#x4F4E; fmol &#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#xFF0C;&#x5728;&#x51E0;&#x5206;&#x949F;&#x5185;&#x4F7F;&#x6837;&#x54C1;&#x51C6;&#x5907;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;

&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x949B;&#x6D82;&#x5C42;&#x8FDB;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x76EE;&#x6807;&#x65F6;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#x677F;&#x3002;

Protein phosphorylation controls many cellular processes and activities. One of the major challenges in the proteomic study of phosphorylation is the enrichment of substoichiometric phosphorylated peptides from complex mixtures. Titanium dioxide (TiO2)-based chromatography is now widely applied to isolate phosphopeptides because of its efficiency and flexibility. In this study, a novel TiO2 coated matrix assisted laser desorption ionization plate is presented and tested for the purification of phosphopeptides from complex mixtures. The novel feature of this approach is the deposition of a nanostructured TiO2 film on stainless steel plates by pulsed laser deposition (PLD). By using tryptic digests of alpha-casein, beta-casein, and other nonphosphorylated proteins, the successful enrichment of phosphopeptides was possible with this novel device, called T-plate, even when working in the low fmol range, making the sample ready for mass spectrometric analysis in few minutes.

Titanium dioxide coated MALDI plate for on target analysis of phosphopeptides.

La phosphorylation des prot&eacute;ines contr&ocirc;le de nombreuses activit&eacute;s et processus cellulaires. Un des d&eacute;fis majeurs dans l&#39;&eacute;tude prot&eacute;omique de la phosphorylation est l&#39;enrichissement des sous-stoechiom&eacute;triques peptides phosphoryl&eacute;s de m&eacute;langes complexes. Dioxyde de titane (TiO2)-chromatographie de base est maintenant largement appliqu&eacute;e pour isoler des phosphopeptides en raison de son efficacit&eacute; et sa flexibilit&eacute;. Dans cette &eacute;tude, une roman TiO2 enduit matrice assist&eacute;e par laser desorption ionisation plaque est pr&eacute;sent&eacute;e et mis &agrave; l&#39;essai pour la purification des phosphopeptides des m&eacute;langes complexes. La nouveaut&eacute; de cette approche est le d&eacute;p&ocirc;t d&#39;une nanostructure film TiO2 sur plaques d&#39;acier inoxydable de d&eacute;p&ocirc;t par laser puls&eacute; (PLD). En utilisant la digestion trypsique de cas&eacute;ine alpha, b&ecirc;ta-cas&eacute;ine et autres prot&eacute;ines phosphoryl&eacute;s, l&#39;enrichissement r&eacute;ussie des phosphopeptides &eacute;tait possible avec cet appareil novateur, appel&eacute; T-plaque, m&ecirc;me lorsque vous travaillez dans la gamme basse fmol, pr&eacute;parant l&#39;&eacute;chantillon pour l&#39;analyse par spectrom&eacute;trie de masse en quelques minutes.

Dioxyde de titane recouvert de plaque MALDI pour analyse de la cible des phosphopeptides.

Proteinphosphorylierung steuert viele zellul&auml;re Prozesse und Aktivit&auml;ten. Eine der gro&szlig;en Herausforderungen in der Proteomic-Studie der Phosphorylierung ist die Anreicherung von unterst&ouml;chiometrisches phosphorylierten Peptide aus komplexen Mischungen. Titandioxid (TiO2)-basierte Chromatographie wird jetzt weit zugetroffen auf um Phosphopeptides wegen seiner Effizienz und Flexibilit&auml;t zu isolieren. In dieser Studie ist eine neuartige TiO2 beschichtet Matrix assisted Laser Desorption Ionisation Platte dargestellt und zur Reinigung von Phosphopeptides von den komplizierten Mischungen getestet. Das neuartige an diesem Ansatz ist die Ablagerung von einer nanostrukturierten TiO2-Film auf Edelstahlplatten durch gepulste Laser Deposition (PLD). Mithilfe von tryptic &Uuml;bersichten von Alpha-Kasein, Beta-Kasein und anderen nonphosphorylated Proteinen war die erfolgreiche Bereicherung des Phosphopeptides mit diesem neuartigen Ger&auml;t, T-Platte, genannt, sogar bei der Arbeit im Bereich niedriger Fmol, machen die Probe f&uuml;r massenspektrometrischen Analyse bereit, in wenigen Minuten m&ouml;glich.

Titandioxid beschichtete MALDI-Platte f&uuml;r eine Analyse der Phosphopeptides.

Fosforilazione della proteina controlla molte attivit&agrave; e processi cellulari. Una delle sfide pi&ugrave; importanti nello studio della fosforilazione proteomic &egrave; l&#39;arricchimento dei peptidi substechiometrica fosforilate da miscele complesse. Biossido di titanio (TiO2)-basato cromatografia &egrave; ora ampiamente applicata per isolare fosfopeptidi a causa della sua efficienza e flessibilit&agrave;. In questo studio, una romanzo TiO2 rivestito matrix assistita laser desorption ionizzazione piastra &egrave; presentata e testata per la purificazione delle fosfopeptidi da miscele complesse. Il romanzo di questo approccio &egrave; la deposizione di un film di TiO2 su piastre in acciaio inox nanostrutturati di deposizione laser pulsato (PLD). Utilizzando triptico digest di altre proteine nonphosphorylated alfa-caseina e beta-caseina, l&#39;arricchimento delle fosfopeptidi successo era possibile con questo nuovo dispositivo, denominato T-plate, anche quando si lavora nella gamma bassa fmol, rendendo il campione pronto per l&#39;analisi di spettrometria di massa in pochi minuti.

Biossido di titanio rivestito piastra MALDI per analisi del target di fosfopeptidi.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3068;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8AB2;&#x984C;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x5F53;&#x91CF;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30BF;&#x30F3; &#xFF08;TiO2&#xFF09;-&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x4ECA;&#x5E83;&#x304F;&#x305D;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x3068;&#x67D4;&#x8EDF;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5206;&#x96E2;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x65B0;&#x898F;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; TiO2 &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x63D0;&#x793A;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x6DF7;&#x5408;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x8ABF;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x6D44;&#x5316;&#x7528;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306F;&#x3001;&#x30CA;&#x30CE;&#x69CB;&#x9020; TiO2 &#x819C;&#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30B9;&#x677F;&#x306E;&#x84B8;&#x7740;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9; &#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x5806;&#x7A4D;&#x6CD5; (PLD) &#x3067;&#x3059;&#x3002;&Alpha;-&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;-&#x30AB;&#x30BC;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x4ED6; nonphosphorylated &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3; &#x30C0;&#x30A4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E; T &#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3082;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x6570;&#x5206;&#x3067;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3001;fmol &#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x4F5C;&#x696D;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x53EF;&#x80FD;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;

&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30BF;&#x30F3; &#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E; MALDI &#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x88AB;&#x8986;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC640; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; proteomic &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xACFC;&#xC81C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; substoichiometric phosphorylated &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xB18D;&#xCD95;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC0B0;&#xD654; &#xD2F0;&#xD0C0;&#xB284; (TiO2)-&#xAE30;&#xBC18;&#xC758; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xC774;&#xC81C; &#xB110;&#xB9AC; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xACFC; &#xC720;&#xC5F0;&#xC131; phosphopeptides &#xACA9;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC801;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC18C;&#xC124; TiO2 &#xCF54;&#xD305; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD0C8; &#xCC29; &#xC774;&#xC628;&#xD654; &#xC811;&#xC2DC; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD63C;&#xD569;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; phosphopeptides&#xC758; &#xC815;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC18C;&#xC124;&#xC774; &#xC811;&#xADFC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC740; &#xD384;&#xC2A4; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xC99D; &#xCC29; (PLD)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D; &#xCC29; nanostructured TiO2 &#xD544;&#xB984; &#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xB808;&#xC2A4; &#xC2A4;&#xD2F8; &#xC811;&#xC2DC;&#xC5D0;&#xC758;. &#xC54C;&#xD30C; &#xCE74; &#xC138; &#xC778;, &#xBCA0;&#xD0C0;-&#xCE74; &#xC138; &#xC778;, &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; nonphosphorylated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; tryptic &#xB2E4;&#xC774;&#xC81C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; phosphopeptides&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xB18D;&#xCD95; &#xBA87; &#xBD84; &#xC548;&#xC5D0; &#xC0D8;&#xD50C; &#xB300;&#xB7C9; spectrometric &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC900;&#xBE44;&#xAC00; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; fmol &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC791;&#xC5C5; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; T-&#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB77C;&#xB294;&#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC774;&#xC0B0;&#xD654; &#xD2F0;&#xD0C0;&#xB284; &#xCF54;&#xD305; MALDI &#xC811;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; phosphopeptides&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0;.

Fosforilaci&oacute;n de la prote&iacute;na controla muchos procesos celulares y actividades. Uno de los mayores retos en el estudio prote&oacute;mico de la fosforilaci&oacute;n es el enriquecimiento de los p&eacute;ptidos substoichiometric fosforiladas de mezclas complejas. Di&oacute;xido de titanio (TiO2)-cromatograf&iacute;a basada ahora se aplica extensamente para aislar fosfotoproteida debido a su eficiencia y flexibilidad. En este estudio, una novela TiO2 recubiertos matriz asistida por l&aacute;ser desorci&oacute;n ionizaci&oacute;n placa es presentada y probada para la purificaci&oacute;n de fosfotoproteida de mezclas complejas. La caracter&iacute;stica novedosa de este enfoque es la deposici&oacute;n de una pel&iacute;cula de TiO2 en placas de acero inoxidable de nanoestructurados por l&aacute;ser pulsado (PLD). Mediante el uso de res&uacute;menes peptona de case&iacute;na alfa, beta-case&iacute;na y otras prote&iacute;nas nonphosphorylated, el enriquecimiento exitoso de fosfotoproteida era posible con este nuevo dispositivo, llamado T-placa, incluso cuando se trabaja en la gama baja fmol, preparaci&oacute;n la muestra para an&aacute;lisis de espectrometr&iacute;a de masa en pocos minutos.

Di&oacute;xido de titanio hab&iacute;a recubierto de placa MALDI para el an&aacute;lisis objetivo de fosfotoproteida.

&#x6539;&#x5EFA;&#x4E2D;&#x86CB;&#x767D;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x8BB8;&#x591A;&#x7684;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x540E;&#x4FEE;&#x9970; &#xFF08;&#x5929;&#x8F66;&#xFF09;-&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x672C;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x5F88;&#x591A;&#x75BE;&#x75C5;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x764C;&#x75C7;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x4EB2;&#x548C;&#x5C42;&#x6790;&#x548C;&#x7535;&#x55B7;&#x96FE;&#x7535;&#x79BB; (ESI) &#x6216;&#x57FA;&#x8D28;&#x8F85;&#x52A9;&#x6FC0;&#x5149;&#x89E3;&#x5438;/&#x8FDB;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x9610;&#x660E;&#x6210;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x4E00;&#x7EA7;&#x548C;&#x5E2E;&#x52A9;&#x89E3;&#x51B3;&#x4E0E;&#x6709;&#x5173;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x56F0;&#x96BE;&#x3002;&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x949B;&#x8272;&#x8C31;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D53;&#x7F29;&#x6837;&#x54C1;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x548C;&#x6700;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x949B;&#x5177;&#x6709;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x7684;&#x78F7;&#x9178;&#x80BD;&#x548C;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x534F;&#x8BAE;&#x8FDB;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31;&#x677F;&#x8986;&#x76D6;&#x7740;&#x4E8C;&#x6C27;&#x5316;&#x949B;&#x7EB3;&#x7C73;&#x8584;&#x819C;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x80BD;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x548C;&#x9AD8;&#x6548;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5F00;&#x53D1;&#x8BBE;&#x5907;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;

TiO&#x2082; &#x7EB3;&#x7C73;&#x7ED3;&#x6784;&#x8584;&#x819C;&#x8FDB;&#x884C;&#x8D28;&#x8C31;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Alterations in protein phosphorylation, a posttranslational modification (PTM) that regulates many -processes in living cells, is a fundamental mechanism of many diseases, including cancer. Phosphoproteomics, with the combined use of affinity chromatography and electrospray ionization (ESI) or matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) mass spectrometry, is shedding light into phosphorylation signaling pathways at the proteome level and helps to solve difficulties related to sample complexity and phosphopeptide enrichment. One of the most frequent and efficient methods used to enrich samples for the phosphorylated components is titanium dioxide chromatography. Titanium dioxide has a high affinity for phosphopeptides and can also be selective in specific experimental conditions. Here, we describe a protocol for the use of a MALDI plate covered with titanium dioxide nanostructured film, a device developed for a rapid and efficient study of phosphorylated peptides.

Nanostructured TiOâ‚‚ thin films for phosphoproteomics studies with MALDI mass spectrometry.

Alt&eacute;rations de la phosphorylation des prot&eacute;ines, une modification post-traductionnelle (PTM) qui r&eacute;gule beaucoup-processus dans les cellules vivantes, est un m&eacute;canisme fondamental de nombreuses maladies, y compris le cancer. Phosphoprot&eacute;omique, avec l&#39;utilisation combin&eacute;e de la chromatographie d&#39;affinit&eacute; et ionisation par &eacute;lectrospray (ESI) ou spectrom&eacute;trie de masse (MALDI) de d&eacute;sorption-ionisation laser assist&eacute;e par matrice, fait la lumi&egrave;re sur la phosphorylation au niveau du prot&eacute;ome, les voies de signalisation et aide &agrave; r&eacute;soudre les difficult&eacute;s li&eacute;es &agrave; l&#39;enrichissement de l&#39;&eacute;chantillon complexit&eacute; et phosphopeptide. Une des m&eacute;thodes plus fr&eacute;quentes et plus efficaces utilis&eacute;s pour enrichir les &eacute;chantillons pour les composants phosphoryl&eacute;es est la chromatographie de dioxyde de titane. Dioxyde de titane a une forte affinit&eacute; pour phosphopeptides et peut &eacute;galement &ecirc;tre s&eacute;lectif dans des conditions exp&eacute;rimentales sp&eacute;cifiques. Nous d&eacute;crivons ici un protocole pour l&#39;utilisation d&#39;une plaque MALDI recouverte de dioxyde de titane nanostructur&eacute; film, un appareil mis au point une &eacute;tude rapide et efficace des peptides phosphoryl&eacute;s.

Nanostructured TiO&#x2082; minces pour les &eacute;tudes de phosphoprot&eacute;omique avec la spectrom&eacute;trie de masse MALDI.

&Auml;nderungen im Proteinphosphorylierung, eine posttranslationale Modifikation (PTM), das viele reguliert-Prozesse in lebenden Zellen, ist ein grundlegender Mechanismus von vielen Krankheiten, einschlie&szlig;lich Krebs. Phosphoproteomics, mit dem kombinierten Einsatz von Affinit&auml;tschromatographie und Elektrospray-Ionisation (ESI) oder Matrix-unterst&uuml;tzte Laser-Desorption/Ionisation (MALDI)-Massenspektrometrie, ist Licht in Phosphorylierung Signalisierung Optionen auf das Proteom-Ebene und hilft, um Schwierigkeiten mit Bezug zum Beispiel Komplexit&auml;t und Phosphopeptide Bereicherung zu l&ouml;sen. Eine der h&auml;ufigsten und effizienten Methoden eingesetzt, um Proben f&uuml;r die phosphorylierten Komponenten anzureichern ist Titandioxid-Chromatographie. Titandioxid kann hat eine hohe Affinit&auml;t zu Phosphopeptides und auch selektiv in bestimmten experimentellen Bedingungen. Hier beschreiben wir, ein Protokoll f&uuml;r die Verwendung einer MALDI-Platte bedeckt mit Titandioxid Nanostructured Film, ein Ger&auml;t f&uuml;r eine schnelle und effiziente Studie von phosphorylierten Peptiden entwickelt.

Nanostructured TiO&#x2082; D&uuml;nnschichten f&uuml;r Phosphoproteomics Studien mit MALDI-Massenspektrometrie.

Alterazioni nella fosforilazione della proteina, una modificazione post traduzionale (PTM) che regola molti-processi in cellule viventi, &egrave; un meccanismo fondamentale di molte malattie, tra cui il cancro. Phosphoproteomics, con l&#39;uso combinato di cromatografia di affinit&agrave; e ionizzazione elettrospray (ESI) o spettrometria laser assistito da matrice (MALDI) di desorbimento/ionizzazione, &egrave; spargimento luce nella fosforilazione segnalazione percorsi a livello di proteoma e aiuta a risolvere le difficolt&agrave; relative all&#39;arricchimento di complessit&agrave; e fosfopeptide campione. Uno dei metodi pi&ugrave; efficienti e frequenti utilizzati per arricchire i campioni per i componenti fosforilati &egrave; cromatografia di biossido di titanio. Biossido di titanio ha un&#39;elevata affinit&agrave; per fosfopeptidi e pu&ograve; anche essere selettivo in specifiche condizioni sperimentali. Qui, descriviamo un protocollo per l&#39;uso di una piastra MALDI rivestita con pellicola di biossido di titanio nanostrutturato, un dispositivo sviluppato per un rapido ed efficiente studio di peptidi fosforilati.

Nanostructured TiO&#x2082; film sottili per studi phosphoproteomics con spettrometria di massa MALDI.

&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x71D0;&#x9178;&#x5316;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x7FFB;&#x8A33;&#x5F8C;&#x4FEE;&#x98FE; (PTM)-&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x764C;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x6839;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3002;&#x30C1;&#x30BF;&#x30CB;&#x30A2;&#x3092;&#x4F75;&#x7528;&#x306E;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB; &#x30C6;&#x30A3;&#x30FC; &#x30FB; &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x3068;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316; &#xFF08;ESI&#xFF09; &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x652F;&#x63F4;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8131;&#x96E2;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5316; (MALDI) &#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x5149;&#x3092;&#x6D41;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x3068;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x306E;&#x30A6;&#x30E9;&#x30F3;&#x6FC3;&#x7E2E;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30BF;&#x30F3; &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8; &#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3092;&#x8C4A;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x983B;&#x7E41;&#x306B;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30BF;&#x30F3;&#x306F;&#x9AD8;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x9078;&#x629E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x9178;&#x5316;&#x30C1;&#x30BF;&#x30F3; &#x30CA;&#x30CE;&#x69CB;&#x9020;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x304B;&#x3064;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x7814;&#x7A76;&#x958B;&#x767A;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9; MALDI &#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30CA;&#x30CE;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B; TiO&#x2082; &#x8584;&#x819C;&#x306E; MALDI &#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C1;&#x30BF;&#x30CB;&#x30A2;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;, posttranslational &#xC218;&#xC815; (PTM) &#xB9CE;&#xC740; &#xADDC;&#xC81C; &#xBCC0;&#xACBD;-&#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC554; &#xB4F1; &#xB9CE;&#xC740; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE5C;&#xD654;&#xC131; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xBC0F; &#xBD84;&#xBB34; &#xC774;&#xC628;&#xD654; (ESI) &#xB610;&#xB294; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xBCF4;&#xC870; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xD0C8; &#xCC29;/&#xC774;&#xC628;&#xD654; (MALDI) &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC758; &#xACB0;&#xD569;&#xB41C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xACFC; Phosphoproteomics &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xBE5B;&#xC744; &#xD758;&#xB9AC; &#xACE0; &#xC0D8;&#xD50C; &#xBCF5;&#xC7A1;&#xC131;&#xACFC; phosphopeptide &#xB18D;&#xCD95; &#xAD00;&#xB828; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774;. Phosphorylated &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC744; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xBE48;&#xBC88; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xC774;&#xC0B0;&#xD654; &#xD2F0;&#xD0C0;&#xB284; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC0B0;&#xD654; &#xD2F0;&#xD0C0;&#xB284; phosphopeptides&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC0B0;&#xD654; &#xD2F0;&#xD0C0;&#xB284; nanostructured &#xC601;&#xD654;, phosphorylated &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xD559;&#xC2B5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xC7A5;&#xCE58; &#xB36E;&#xC5EC; MALDI &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nanostructured TiO&#x2082; &#xBC15;&#xB9C9;&#xACFC; MALDI &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; phosphoproteomics &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;.

Alteraciones en la fosforilaci&oacute;n de la prote&iacute;na, una modificaci&oacute;n postraduccional (PTM) que regula muchos-procesos en las c&eacute;lulas vivas, es un mecanismo fundamental de muchas enfermedades, incluyendo c&aacute;ncer. Fosfoprote&oacute;mico, con el uso combinado de cromatograf&iacute;a de afinidad e ionizaci&oacute;n por electrospray (ESI) o espectrometr&iacute;a de masas (MALDI) de desorci&oacute;n/ionizaci&oacute;n l&aacute;ser asistida por matriz, est&aacute; arrojando luz en rutas a nivel proteoma de se&ntilde;alizaci&oacute;n de fosforilaci&oacute;n y ayuda a resolver dificultades relacionadas con el enriquecimiento de complejidad y fosfop&eacute;ptidos de muestra. Uno de los m&eacute;todos m&aacute;s frecuentes y eficientes para enriquecer las muestras para los componentes fosforiladas es cromatograf&iacute;a de di&oacute;xido de titanio. Di&oacute;xido de titanio tiene una alta afinidad para fosfotoproteida y tambi&eacute;n puede ser selectivo en condiciones experimentales espec&iacute;ficas. Aqu&iacute;, describimos un protocolo para el uso de una placa MALDI cubierto con di&oacute;xido de titanio nanoestructurado pel&iacute;cula, un dispositivo desarrollado para un estudio r&aacute;pido y eficaz de p&eacute;ptidos fosforilados.

Article	Year
Au-Ag template stripped pattern for scanning probe investigations of DNA arrays produced by dip pen nanolithography. Langmuir : the ACS journal of surfaces and colloids\| PubMed ID: 18950214	2008
Titanium dioxide coated MALDI plate for on target analysis of phosphopeptides. Journal of proteome research\| PubMed ID: 19714878	2009
Nanostructured TiOâ‚‚ thin films for phosphoproteomics studies with MALDI mass spectrometry. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)\| PubMed ID: 21948414	2011

Carlo S. Casari

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