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Cell Co-culture Patterning Using Aqueous Two-phase Systems

Cell patterning  technologies that are fast, easy to use and affordable will be required for the  future development of high throughput cell assays, ...

University of Michigan 

Patterning of multiple proteins and enzymes onto biocompatible surfaces can provide multiple signals to control cell attachment and growth. Acrylamide-based hydrogels were photo-polymerized in the presence of streptavidin-acrylamide, resulting in planar gel surfaces functionalized with the streptavidin protein. This surface was capable of binding biotin-labeled biomolecules. The proteins fibronectin and laminin, the enzyme alkaline phosphatase, and the photo-protein R-phycoerythrin were patterned using soft lithographic techniques. Polydimethylsiloxane stamps were used to transfer biotinylated proteins onto streptavidin-conjugated hydrogel surfaces. Stamped biomolecules were spatially resolved to feature sizes of 10 mum. Fluorescence measurements were used to assess protein transfer and enzyme functionality on modified surfaces. Our results demonstrate that hydrogel surfaces can be patterned with multiple proteins and enzymes, with retention of biological and catalytic activity. These surfaces are biocompatible and provide cues for cell attachment and growth. (c) 2006 Wiley Periodicals, Inc. J Biomed Mater Res 2007.

Functionalized hydrogel surfaces for the patterning of multiple biomolecules.

&#x591A;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x9176;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x56FE;&#x6848;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x591A;&#x4E2A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x9644;&#x4EF6;&#x548C;&#x589E;&#x957F;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4E19;&#x70EF;&#x9170;&#x80FA;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x662F;&#x5B58;&#x5728;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5E73;&#x9762;&#x51DD;&#x80F6;&#x8868;&#x9762;&#x5B98;&#x80FD;&#x4E0E;&#x94FE;&#x9709;&#x4EB2;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x94FE;&#x9709;&#x4EB2;&#x548C;-&#x4E19;&#x70EF;&#x9170;&#x80FA;&#x805A;&#x5408;&#x7684;&#x7167;&#x7247;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8868;&#x9762;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x7D20;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5C42;&#x7C98;&#x8FDE;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x9176;&#x78B1;&#x6027;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x548C;&#x7167;&#x7247;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; R-&#x85FB;&#x7EA2;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x56FE;&#x6848;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F6F;&#x5149;&#x523B;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x805A;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x7845;&#x6C27;&#x70F7;&#x90AE;&#x7968;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x5171;&#x8F6D;&#x94FE;&#x9709;&#x4EB2;&#x548C;&#x7684;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x52A0;&#x76D6;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x5219;&#x5728;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4E0A;&#x89E3;&#x51B3;&#x5230;&#x529F;&#x80FD;&#x5C3A;&#x5BF8; 10 &#x5988;&#x5988;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x91CF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4FEE;&#x6539;&#x66F2;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8F6C;&#x79FB;&#x548C;&#x9176;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x8868;&#x9762;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E;&#x591A;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x9176;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x4FDD;&#x7559;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x56FE;&#x6848;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x9762;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x9644;&#x4EF6;&#x548C;&#x589E;&#x957F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x63D0;&#x793A;&#x3002;&#xFF08;c&#xFF09; 2006 &#x5E74; Wiley &#x671F;&#x520A;&#xFF0C;Inc.J &#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x6BCD;&#x6821; Res 2007&#x3002;

&#x7528;&#x4E8E;&#x591A;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x529F;&#x80FD;&#x5316;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x8868;&#x9762;&#x3002;

Structuration de plusieurs prot&eacute;ines et enzymes sur les surfaces biocompatibles peut fournir des signaux multiples pour contr&ocirc;ler la croissance et la fixation des cellules. Ax&eacute;e sur l&#39;acrylamide hydrogels sont polym&eacute;ris&eacute;s en photo en pr&eacute;sence de streptavidine-acrylamide, ayant pour r&eacute;sultat des surfaces planes gel fonctionnalis&eacute;s avec la prot&eacute;ine streptavidine. Cette surface a &eacute;t&eacute; capable de se lier de biomol&eacute;cules biotine-&eacute;tiquet&eacute;s. La prot&eacute;ines de la fibronectine et laminine, l&#39;enzyme phosphatase alcaline et la photo-prot&eacute;ine R-phyco&eacute;rythrine ont &eacute;t&eacute; model&eacute;s en utilisant des techniques lithographiques douces. Polydim&eacute;thylsiloxane timbres ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour transf&eacute;rer des prot&eacute;ines biotinyl&eacute;es sur surfaces en hydrogel conjugu&eacute; streptavidine. Estampill&eacute;e biomol&eacute;cules &eacute;taient spatialement r&eacute;solues aux tailles de fonctionnalit&eacute; de maman 10. Mesures de fluorescence ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;s pour &eacute;valuer les fonctionnalit&eacute;s de transfert et enzyme prot&eacute;ique sur surfaces modifi&eacute;es. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent que des surfaces hydrogel peuvent &ecirc;tre model&eacute;s avec plusieurs prot&eacute;ines et enzymes, avec maintien de l&#39;activit&eacute; biologique et catalytique. Ces surfaces sont biocompatibles et offrent des rep&egrave;res pour la croissance et la fixation des cellules. (c) 2006 Wiley p&eacute;riodiques, Inc. J Biomed Mater Res 2007.

Surfaces fonctionnalis&eacute;es hydrogel pour la structuration des biomol&eacute;cules multiples.

Patterning di pi&ugrave; proteine ed enzimi sulle superfici biocompatibili in grado di fornire molteplici segnali per controllare la crescita e l&#39;attaccamento di cellule. Idrogel a base di acrilammide sono stati foto-polimerizzato in presenza di streptavidina-acrilammide, risultante in superfici planari gel funzionalizzate con le proteine streptavidina. Questa superficie &egrave; stato in grado di legare biomolecole marcato con biotina. Le fibronectina della proteine e laminina, la fosfatasi alcalina enzima e il foto-proteina R-Ficoeritrina furono modellate utilizzando tecniche litografiche morbidi. Polidimetilsilossano francobolli sono stati utilizzati per trasferire le proteine biotinilate sulle superfici di idrogel streptavidina coniugata. Biomolecole timbrati erano spazialmente risolti a dimensioni caratteristica di mamma 10. Le misure di fluorescenza sono state utilizzate per valutare la funzionalit&agrave; di trasferimento e l&#39;enzima proteina su superfici modificate. I nostri risultati dimostrano che le superfici idrogel possono essere modellate con pi&ugrave; proteine ed enzimi, con ritenzione di biologico e di attivit&agrave; catalitica. Queste superfici sono biocompatibili e forniscono spunti per la crescita e l&#39;attaccamento di cellule. (c) 2006 periodici Wiley, Inc. J Biomed Mater Res 2007.

Superfici funzionalizzate idrogel per la modellatura delle biomolecole pi&ugrave;.

&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9175;&#x7D20;&#x3092;&#x751F;&#x4F53;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x30FB;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x304C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x5199;&#x771F;&#x91CD;&#x5408;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30A2;&#x30D3;&#x30B8;&#x30F3;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30DF;&#x30C9; &#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30A2;&#x30D3;&#x30B8;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B98;&#x80FD;&#x57FA;&#x5316;&#x5E73;&#x9762;&#x30B2;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;.&#x3053;&#x306E;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x306F;&#x30D3;&#x30AA;&#x30C1;&#x30F3;&#x6A19;&#x8B58;&#x5316;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B; &#xFF0E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30F3;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5199;&#x771F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; R &#x30D5;&#x30A3;&#x30B3;&#x30A8; &#x30EA;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3; &#x30BD;&#x30D5;&#x30C8; &#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B8;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B7;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B5;&#x30F3;&#x5207;&#x624B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30D7;&#x30C8;&#x30A2;&#x30D3;&#x30B8;&#x30F3;&#x5171;&#x5F79;&#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D7;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA; 10 &#x6BCD;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;.&#x86CD;&#x5149;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x8868;&#x9762;&#x4FEE;&#x98FE;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x9001;&#x3068;&#x9175;&#x7D20;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3084;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x89E6;&#x5A92;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x4FDD;&#x6301;&#x3068;&#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30B9;&#x306F;&#x751F;&#x4F53;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x4ED8;&#x7740;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;(c) 2006&#x5E74;&#x30EF;&#x30A4;&#x30EA;&#x30FC;&#x5B9A;&#x671F;&#x520A;&#x884C;&#x7269;&#x3001;&#x682A;&#x5F0F;&#x4F1A;&#x793E; J Biomed &#x6BCD;&#x6821;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6; 2007&#x5E74;&#x3002;

&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; &#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x5B98;&#x80FD;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;

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&#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xC758; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC131;&#xB41C; &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94; &#xD45C;&#xBA74;.

Patrones de varias prote&iacute;nas y enzimas en superficies biocompatibles pueden proporcionar m&uacute;ltiples se&ntilde;ales para controlar el crecimiento y el accesorio de la c&eacute;lula. Los hidrogeles de acrilamida fueron foto polimerizado en presencia de estreptavidina-acrilamida, resultando en superficies planas gel funcionalizados con la prote&iacute;na de estreptavidina. Esta superficie era capaz de atar biomol&eacute;culas marcados con biotina. La fibronectina de prote&iacute;nas y laminina, la fosfatasa alcalina de la enzima y la prote&iacute;na foto R-ficoeritrina fueron estampados suaves t&eacute;cnicas litogr&aacute;ficas. Polidimetilsiloxano sellos fueron utilizados para transferir prote&iacute;nas de biotinilado en las superficies de hidrogel conjugado estreptavidina. Biomol&eacute;culas estampado estaban espacial decididos a tama&ntilde;os de la caracter&iacute;stica de mam&aacute; 10. Las mediciones de fluorescencia se utilizaron para evaluar la funcionalidad de transferencia y enzima de prote&iacute;na en las superficies modificadas. Nuestros resultados demuestran que las superficies de hidrogel pueden ser estampadas con m&uacute;ltiples prote&iacute;nas y enzimas, con retenci&oacute;n de la actividad biol&oacute;gica y catal&iacute;tica. Estas superficies son biocompatibles y proporcionan claves para el crecimiento y el accesorio de la c&eacute;lula. (c) 2006 Wiley peri&oacute;dicos, Inc. J Biomed Mater Res 2007.

Superficies de hidrogel funcionalizados para el patr&oacute;n de biomol&eacute;culas m&uacute;ltiples.

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Biochemical surface modification has been used to direct cell attachment and growth on a biocompatible gel surface. Acrylamide-based hydrogels were photo-polymerized in the presence of an acroyl-streptavidin monomer to create planar, functionalized surfaces capable of binding biotin-labelled proteins. Soft protein lithography (microcontact printing) of proteins was used to transfer the biotinylated extracellular matrix proteins, fibronectin and laminin, and the laminin peptide biotin-IKVAV, onto modified surfaces. As a biological assay, we plated LRM55 astroglioma and primary rat hippocampal neurons on patterned hydrogels. We found both cell types to selectively adhere to areas patterned with biotin-conjugated proteins. Fluorescence and bright-field modes of microscopy were used to assess cell attachment and cell morphology on modified surfaces. LRM55 cells were found to attach to protein-stamped regions of the hydrogel only. Neurons exhibited significant neurite extension after 72h in vitro, and remained viable on protein-stamped areas for more than 4 weeks. Patterned neurons developed functionally active synapses, as measured by uptake of the dye FM1-43FX. Results from this study suggest that hydrogel surfaces can be patterned with multiple proteins to direct cell growth and attachment.

Directed cell growth on protein-functionalized hydrogel surfaces.

Modification de surface biochimique a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour diriger la fixation des cellules et la croissance sur une surface de gel biocompatible. Ax&eacute;e sur l&#39;acrylamide hydrogels sont polym&eacute;ris&eacute;s en photo en pr&eacute;sence d&#39;une acroyl-streptavidine monom&egrave;re pour cr&eacute;er planaire, fonctionnalis&eacute;s capables de biotine marqu&eacute;e des prot&eacute;ines de liaison des surfaces. La lithographie (impression par microcontact) de prot&eacute;ines douces des prot&eacute;ines a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour transf&eacute;rer les prot&eacute;ines de la matrice extracellulaire biotinyl&eacute;, fibronectine et laminine et la biotine de peptide de laminine-IKVAV, sur surfaces modifi&eacute;es. Comme des tests biologiques, nous plaqu&eacute; LRM55 astroglioma et les neurones de l&#39;hippocampe primaires de rat sur hydrogels &agrave; motifs. Nous avons trouv&eacute; les deux types de cellules s&eacute;lectivement respecte les zones avec des prot&eacute;ines conjugu&eacute; biotine. Fluorescence et modes lumineux-zone de microscopie ont servi &agrave; &eacute;valuer la fixation des cellules et la morphologie des cellules sur surfaces modifi&eacute;es. LRM55 cellules trouv&eacute;es pour attacher aux r&eacute;gions de prot&eacute;ine-estampill&eacute; de l&#39;hydrogel seulement. Neurones pr&eacute;sentaient des neurites importante extension apr&egrave;s 72h in vitro et demeurent viables sur timbre prot&eacute;ine domaines pendant plus de 4 semaines. Les neurones &agrave; motifs mis au point des synapses fonctionnellement actifs, telle que mesur&eacute;e par absorption du colorant FM1-43FX. Les r&eacute;sultats de cette &eacute;tude sugg&egrave;rent que surfaces hydrogel peuvent &ecirc;tre model&eacute;s avec les prot&eacute;ines multiples pour diriger la fixation et la croissance cellulaire.

R&eacute;alis&eacute; la croissance des cellules sur des surfaces de prot&eacute;ine fonctionnalis&eacute;s hydrogel.

Biochimica modificazione superficiale &egrave; stato utilizzato per dirigere l&#39;attacco delle cellule e la crescita su una superficie di gel biocompatibile. Idrogel a base di acrilammide sono stati foto-polimerizzato in presenza di un acroyl-streptavidina monomero per creare planare, FUNZIONALIZZATO superfici in grado di legare le proteine marcate con biotina. Litografia di proteina morbido (microcontatto stampa) delle proteine &egrave; stato utilizzato per trasferire le proteine della matrice extracellulare biotinilato, fibronectina e laminina e la laminina peptide biotina-IKVAV, sulle superfici modificate. Come un saggio biologico, abbiamo placcato LRM55 astroglioma e primario ratto neuroni hippocampal su idrogel fantasia. Abbiamo trovato entrambi i tipi di cellule di aderire selettivamente alle aree modellate con proteine coniugate con biotina. Fluorescenza e luminoso campo modalit&agrave; di microscopia sono stati utilizzati per valutare la cella attaccamento e morfologia cellulare su superfici modificate. Le cellule LRM55 sono state trovate da allegare alle regioni della proteina-timbrato dell&#39;idrogel solo. Neuroni esposto estensione significativa dei neuriti dopo 72h in vitro e rimasero praticabili su aree proteina-timbrato per pi&ugrave; di 4 settimane. Neuroni fantasia sviluppato sinapsi funzionalmente attivi, come misurato da assorbimento della tintura FM1-43FX. Risultati di questo studio suggeriscono che le superfici idrogel possono essere modellate con pi&ugrave; proteine per dirigere l&#39;attaccamento e la crescita delle cellule.

Crescita cellulare diretto sulle superfici di idrogel funzionalizzato della proteina.

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&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x4FEE;&#x98FE;&#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x6307;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xD45C;&#xBA74; &#xAC1C; &#xC9C8;&#xC740; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC824; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD80;&#xCC29; &#xBC0F; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xD06C;&#xB9B4; &#xC544; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; hydrogels acroyl streptavidin&#xC758; &#xC0AC;&#xC9C4;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xD3C9;&#xBA74;, &#xBAA8;&#xB178; &#xBA38; functionalized &#xD45C;&#xBA74; &#xBE44;&#xC624; &#xD2F4; &#xC774;&#xB77C;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC18C;&#xD504;&#xD2B8; &#xB9AC;&#xC18C; &#xADF8;&#xB798;&#xD53C; (microcontact &#xC778;&#xC1C4;) &#xC804;&#xC1A1; biotinylated &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, fibronectin&#xACFC; laminin, &#xBC0F; laminin &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xBE44;&#xC624; &#xD2F4;-IKVAV, &#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xBD84;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; LRM55 astroglioma&#xC640; &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC; hydrogels&#xC5D0; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC950; hippocampal &#xB274;&#xB7F0;&#xC744; &#xB3C4;&#xAE08;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xBE44;&#xD0C0;&#xBBFC; b &#xBCF5;&#xD569;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xD65C;&#xC6A9; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD328;&#xD134; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC900;&#xC218;&#xB97C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xBC0F; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC758; &#xBC1D;&#xC740; &#xD544;&#xB4DC; &#xBAA8;&#xB4DC; &#xC140; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xACFC; &#xC218;&#xC815; &#xB41C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. LRM55 &#xC140; &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94;&#xB9CC;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2A4;&#xD0EC;&#xD504; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB274;&#xB7F0; 72 h &#xCCB4; &#xC678;, &#xD6C4; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; neurite &#xD655;&#xC7A5;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; 4 &#xC8FC; &#xC774;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2A4;&#xD0EC;&#xD504; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB0A8;&#xC544;. &#xAF43;&#xBB34;&#xB2AC; &#xB274;&#xB7F0; FM1 43FX &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xC131; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94; &#xD45C;&#xBA74; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xBC29; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; functionalized &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xAC10;&#xB3C5;.

Modificaci&oacute;n de superficies por bioqu&iacute;mico se ha utilizado para dirigir el accesorio de celular y el crecimiento en una superficie de gel biocompatible. Los hidrogeles de acrilamida fueron foto polimerizado en presencia de un acroyl-estreptavidina mon&oacute;mero para crear planos, funcionalizados superficies capaces de las prote&iacute;nas marcadas de biotina. Litograf&iacute;a (impresi&oacute;n de capas) de la prote&iacute;na suave de prote&iacute;nas fue utilizada para transferir las prote&iacute;nas de matriz extracelular biotinilado, fibronectina y laminina y la biotina de p&eacute;ptido de laminina-IKVAV, sobre superficies modificadas. Como un ensayo biol&oacute;gico, nos hab&iacute;an plateado LRM55 astroglioma y neuronas hipocampales rata primaria en hidrogeles modelados. Se encontraron ambos tipos de c&eacute;lulas se adhieran selectivamente a &aacute;reas estampadas con prote&iacute;nas conjugadas de biotina. Fluorescencia y modos de microscop&iacute;a de campo brillante fueron utilizados para determinar la c&eacute;lula apego y morfolog&iacute;a de la c&eacute;lula en superficies modificadas. Las c&eacute;lulas LRM55 fueron encontradas a regiones de estampado de prote&iacute;na de s&oacute;lo el hidrogel. Las neuronas exhibieron neurita significativa extensi&oacute;n despu&eacute;s de 72h in vitro y segu&iacute;a siendo viables en las &aacute;reas de estampado de prote&iacute;na por m&aacute;s de 4 semanas. Neuronas modeladas desarrollaron sinapsis funcionalmente activas, seg&uacute;n lo medido por la absorci&oacute;n del tinte FM1-43FX. Resultados de este estudio sugieren que las superficies de hidrogel pueden ser estampadas con m&uacute;ltiples prote&iacute;nas de fijaci&oacute;n y crecimiento de la c&eacute;lula.

Crecimiento de la c&eacute;lula dirigida en superficies de hidrogel prote&iacute;na funcionalizados.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x6A21;&#x578B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x6548;&#x5242;&#x91CF;&#xFF0C;toxiciology &#x548C;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8BB8;&#x591A;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x672A;&#x80FD;&#x5145;&#x5206;&#x9884;&#x6D4B;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5728;&#x4E00;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x5C06;&#x5982;&#x4F55;&#x8868;&#x73B0;&#x3002;&#x5728;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x5668;&#x5B98;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x5927;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x7531;&#x5176;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x6216;&#x6D88;&#x9664;&#x5B83;&#x4ECE;&#x8EAB;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E00;&#x7EA7;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6539;&#x53D8;&#x4F20;&#x8F93;&#x5C5E;&#x6027;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7279;&#x5B9A;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#xFF0C;&#x6216;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7F13;&#x51B2;&#x7684;&#x6444;&#x53D6;&#x3001; &#x5904;&#x7406;&#x6216;&#x5316;&#x5B66;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x53CA;&#x5176;&#x5BF9;&#x9776;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5728;&#x4EFB;&#x4F55;&#x7ED9;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5185;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E09;&#x7EF4;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x4ECE;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x4F20;&#x7EDF;&#x4E8C;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E0A;&#x6240;&#x6709;&#x53CC;&#x65B9;&#x6709;&#x754C;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6587;&#x5316;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7269;&#x76EE;&#x524D;&#x6B63;&#x5728;&#x5411;&#x66F4;&#x597D;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x548C;&#x5904;&#x7406;&#x51FA;&#x73B0;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x9884;&#x6D4B;&#x8840;&#x8111;&#x5C4F;&#x969C;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x5438;&#x6536;&#x4E4B;&#x524D;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5229;&#x7528;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x3001; &#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x77E9;&#x9635;&#x548C;&#x591A;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x5305;&#x62EC;&#x80BA;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x8102;&#x80AA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF09; &#x66F4;&#x51C6;&#x786E;&#x6A21;&#x578B;&#x836F;&#x7269;&#x8FD0;&#x8F93;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x4E5F;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65F6;&#x7A7A;&#x7684;&#x91CA;&#x653E;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;

&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x7B5B;&#x9009;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x3002;

Cell culture models can provide information pertaining to the effective dose, toxiciology, and kinetics, for a variety of neuroactive compounds. However, many in vitro models fail to adequately predict how such compounds will perform in a living organism. At the systems level, interactions between organs can dramatically affect the properties of a compound by alteration of its biological activity or by elimination of it from the body. At the tissue level, interaction between cell types can alter the transport properties of a particular compound, or can buffer its effects on target cells by uptake, processing, or changes in chemical signaling between cells. In any given tissue, cells exist in a three-dimensional environment bounded on all sides by other cells and components of the extracellular matrix, providing kinetics that are dramatically different from the kinetics in traditional two-dimensional cell culture systems. Cell culture analogs are currently being developed to better model the complex transport and processing that occur prior to drug uptake in the CNS, and to predict blood-brain barrier permeability. These approaches utilize microfluidics, hydrogel matrices, and a variety of cell types (including lung epithelial cells, hepatocytes, adipocytes, glial cells, and neurons) to more accurately model drug transport and biological activity. Similar strategies are also being used to control both the spatial and temporal release of therapeutic compounds for targeted treatment of CNS disease.

Biomedical Technologies for in vitro Screening and Controlled Delivery of Neuroactive Compounds.

Mod&egrave;les de culture de cellules peuvent fournir des informations relatives &agrave; la dose efficace, toxicologie et cin&eacute;tique, pour une vari&eacute;t&eacute; de compos&eacute;s neuroactifs. Cependant, beaucoup de mod&egrave;les in vitro ne parviennent pas &agrave; pr&eacute;dire ad&eacute;quatement comment de tels compos&eacute;s seront produira dans un organisme vivant. Au niveau des syst&egrave;mes, interactions entre organes peuvent consid&eacute;rablement affecter les propri&eacute;t&eacute;s d&#39;un compos&eacute; par l&#39;alt&eacute;ration de son activit&eacute; biologique ou de l&#39;&eacute;limination de celui-ci par le corps. Au niveau des tissus, interaction entre les types de cellules peut modifier les propri&eacute;t&eacute;s de transport d&#39;un compos&eacute; particulier, ou peut mettre en m&eacute;moire tampon ses effets sur les cellules cibles par absorption, la transformation ou changements de signalisation chimique entre les cellules. Dans n&#39;importe quel tissu donn&eacute;, il existe des cellules dans un environnement en trois dimensions limit&eacute; sur tous les c&ocirc;t&eacute;s par d&#39;autres cellules et les constituants de la matrice extracellulaire, fournissant la cin&eacute;tique qui sont radicalement diff&eacute;rent de la cin&eacute;tique dans les syst&egrave;mes de culture cellulaire &agrave; deux dimensions traditionnelles. Cellule culture analogues sont en cours d&#39;&eacute;laboration au meilleur mod&egrave;le le transport complex et le traitement qui se produisent avant l&#39;absorption de la drogue dans le syst&egrave;me nerveux central et de pr&eacute;dire la perm&eacute;abilit&eacute; de la barri&egrave;re h&eacute;mato - enc&eacute;phalique. Ces approches utilisent la microfluidique, hydrogel matrices et une vari&eacute;t&eacute; de types de cellules (y compris les cellules &eacute;pith&eacute;liales pulmonaires, h&eacute;patocytes, adipocytes, cellules gliales et les neurones) &agrave; avec plus de pr&eacute;cision mod&egrave;le m&eacute;dicament transport et l&#39;activit&eacute; biologique. Des strat&eacute;gies similaires sont &eacute;galement utilis&eacute;s pour contr&ocirc;ler les rejets de compos&eacute;s th&eacute;rapeutiques pour le traitement cibl&eacute; de la maladie de CNS fois spatiale et temporelle.

Technologies biom&eacute;dicales pour d&eacute;pistage in vitro et livraison contr&ocirc;l&eacute;e de Neuroactive compos&eacute;s.

Modelli di cultura cellulare possono fornire informazioni riguardanti la dose efficace, toxiciology e cinetica, per una variet&agrave; di composti neuroattivi. Tuttavia, molti modelli in vitro non riescono a predire adeguatamente come tali composti si esibiranno in un organismo vivente. A livello di sistemi, interazioni tra organi possono influenzare notevolmente le propriet&agrave; di un composto da alterazione della sua attivit&agrave; biologica o di eliminazione di esso dal corpo. A livello di tessuto, interazione tra tipi cellulari pu&ograve; alterare le propriet&agrave; di trasporto di un particolare composto, o pu&ograve; tampone suoi effetti sulle cellule bersaglio di assorbimento, trasformazione o cambiamenti di segnali chimici tra cellule. In qualsiasi tessuto specifico, cellule esistono in un ambiente tridimensionale delimitato su tutti i lati da altre cellule e componenti della matrice extracellulare, fornendo cinetica che sono drammaticamente diversa da cinetica in sistemi di coltura cellulare bidimensionale tradizionale. Cella cultura analoghi sono attualmente sviluppati per il modello migliore il trasporto complesso e l&#39;elaborazione che si verificano prima dell&#39;assorbimento del farmaco nel SNC e prevedere la permeabilit&agrave; della barriera emato - encefalica. Questi approcci utilizzano microfluidica, matrici di idrogel e una variet&agrave; di tipi di cellule (comprese le cellule epiteliali del polmone, epatociti, adipociti, cellule gliali e neuroni) per pi&ugrave; accuratamente modello droga trasporto e biologici dell&#39;attivit&agrave;. Simili strategie sono essere utilizzati anche per controllare il rilascio spaziale e temporale dei composti terapeutici per il trattamento mirato di malattia del CNS.

Tecnologie Biomediche per Screening in vitro e la consegna controllata di composti neuroattivi.

&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x5B9F;&#x52B9;&#x7DDA;&#x91CF;&#x3001;toxiciology&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x8133;&#x5185;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E; in vitro &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x81D3;&#x5668;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3084;&#x64A4;&#x5EC3;&#x3001;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; &#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3001;&#x51E6;&#x7406;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5185;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D44;&#x7E54;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x5F93;&#x6765;&#x306E; 2&#x6B21;&#x5143;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x901F;&#x5EA6;&#x8AD6;&#x304B;&#x3089;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x901F;&#x5EA6;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x3066; 3&#x6B21;&#x5143;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x985E;&#x7E01;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x3078;&#x306E;&#x85AC;&#x5264;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3068;&#x8840;&#x6DB2;-&#x8133;&#x95A2;&#x9580;&#x306E;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x51E6;&#x7406;&#x3088;&#x308A;&#x826F;&#x3044;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x3001;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x643A;&#x5E2F;&#x578B; (&#x80BA;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x8102;&#x80AA;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;) &#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x3088;&#x308A;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x85AC;&#x7269;&#x8F38;&#x9001;&#x3068;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3082;&#x6642;&#x7A7A;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x6CBB;&#x7642;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x8133;&#x5185;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3002;

&#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;, toxiciology, &#xBC0F; neuroactive &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB9CE;&#xC740; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378; &#xAC19;&#xC740; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC801;&#xC808; &#xD558; &#xAC8C; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xC9C0;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xAD00; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2EC;&#xB77C;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC18D;&#xC131; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB610;&#xB294; &#xBCF8;&#xBB38;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70;. &#xC870;&#xC9C1; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD2B9;&#xC815; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xC804;&#xC1A1; &#xC18D;&#xC131;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD;&#xD560; &#xC218; &#xB610;&#xB294; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;, &#xCC98;&#xB9AC;, &#xB610;&#xB294; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC140; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xD654;&#xD559; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC84;&#xD37C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAE30;&#xC9C8;, &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xD55C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xD658;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC874;&#xC7AC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xAD50;&#xD1B5; &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC57D; &#xAE00;&#xADC0; CNS, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD608;&#xC561;-&#xB1CC; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xCE68;&#xD22C;&#xC131;&#xC744; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xAE30; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xC544;&#xB0A0;&#xB85C;&#xADF8; &#xD604;&#xC7AC; &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xB354; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xBAA8;&#xB378; &#xB9C8;&#xC57D; &#xC218;&#xC1A1; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; microfluidics, &#xD558;&#xC774;&#xB4DC;&#xB85C; &#xAC94; &#xD589;&#xB82C; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD; (&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3D0; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;, hepatocytes, adipocytes, glial &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;)&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC804;&#xB7B5; &#xB610;&#xD55C; CNS &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xACFC; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

&#xCCB4; &#xC678; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; Neuroactive &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC758;&#xD559; &#xAE30;&#xC220;.

Modelos de cultura de c&eacute;lula pueden proporcionar informaci&oacute;n relacionada con la dosis efectiva, toxiciology y cin&eacute;tica, para una variedad de compuestos neuroactivos. Sin embargo, muchos modelos in vitro no predecir adecuadamente c&oacute;mo dichos compuestos llevar&aacute; a cabo en un organismo vivo. A nivel de sistemas, las interacciones entre &oacute;rganos pueden afectar dram&aacute;ticamente las propiedades de un compuesto por alteraci&oacute;n de su actividad biol&oacute;gica o por la eliminaci&oacute;n de &eacute;l del cuerpo. A nivel de tejido, interacci&oacute;n entre tipos celulares puede alterar las propiedades de transporte de un compuesto especial, o puede amortiguar sus efectos sobre las c&eacute;lulas diana por absorci&oacute;n, transformaci&oacute;n o cambios en la se&ntilde;alizaci&oacute;n qu&iacute;mica entre las c&eacute;lulas. En cualquier tejido determinado, las c&eacute;lulas existen en un entorno tridimensional delimitado por todos lados por otras c&eacute;lulas y componentes de la matriz extracelular, proporcionando cin&eacute;tica que son radicalmente diferentes de la cin&eacute;tica en sistemas de cultivo celular bidimensional tradicional. An&aacute;logos de la cultura de c&eacute;lula actualmente se est&aacute;n desarrollando al mejor modelo transporte complejo y procesamiento que ocurran antes de la absorci&oacute;n de la droga en el SNC y predecir la permeabilidad de la barrera hemato - encef&aacute;lica. Estos enfoques utilizan microflu&iacute;dica, matrices de hidrogel y una variedad de tipos de c&eacute;lulas (incluyendo las c&eacute;lulas epiteliales del pulm&oacute;n, hepatocitos, adipocitos, c&eacute;lulas gliales y neuronas) para mayor precisi&oacute;n modelo drogas transporte y actividad biol&oacute;gica. Tambi&eacute;n se utilizan estrategias similares para controlar la salida espacial y temporal de compuestos terap&eacute;uticos para el tratamiento de la enfermedad de la CNS.

Tecnolog&iacute;as biom&eacute;dicas para Screening in vitro y la entrega controlada de neuroactivos compuestos.

Actualmente los m&eacute;todos disponibles para el an&aacute;lisis de las propiedades estructurales del tejido neural est&aacute;n limitados por la frecuencia en que se pueden recoger datos y por la necesidad de sacrificar la muestra para correlacionar la histolog&iacute;a con otros datos. Espectroscopia de impedancia el&eacute;ctrica (EIS) puede utilizarse para complementar los m&eacute;todos histol&oacute;gicos y basadas en la proyecci&oacute;n de imagen convencionales mediante la medici&oacute;n en tiempo real datos el&eacute;ctricos que pueden atribuirse a los cambios en la estructura y composici&oacute;n tisular. Este informe describe un m&eacute;todo basado en la impedancia para el an&aacute;lisis y modelado de las propiedades el&eacute;ctricas del tejido neural tridimensional construcciones in vitro. Este sistema del modelo se utiliz&oacute; para evaluar los efectos de la densidad celular, el tipo y la organizaci&oacute;n sobre el rendimiento de electrodo de dispositivo neuroprosthetic.

Un sistema in vitro para modelar las respuestas reactivas cerebrales y cambios en la impedancia del dispositivo de neuroprosthetic.

&#x76EE;&#x524D;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7ED3;&#x6784;&#x5C5E;&#x6027;&#x6709;&#x9650;&#x7531;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6536;&#x96C6;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x548C;&#x9700;&#x8981;&#x4F5C;&#x51FA;&#x727A;&#x7272;&#x7684;&#x6807;&#x672C;&#xFF0C;&#x5C06;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x6570;&#x636E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x7535;&#x963B;&#x6297;&#x8C31; (EIS) &#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x8865;&#x5145;&#x4F20;&#x7EDF;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x548C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6210;&#x50CF;&#x65B9;&#x6CD5;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F52;&#x548E;&#x4E8E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x7EC4;&#x6210;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x5B9E;&#x65F6;&#x7535;&#x5B50;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4EFD;&#x62A5;&#x544A;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4E86;&#x57FA;&#x4E8E;&#x963B;&#x6297;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x4E0E;&#x5EFA;&#x6A21;&#x7684;&#x7535;&#x6C14;&#x6027;&#x80FD;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x4E09;&#x7EF4;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7528;&#x4E8E;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3001; &#x7C7B;&#x578B;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684; neuroprosthetic &#x8BBE;&#x5907;&#x7535;&#x6781;&#x6027;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x5EFA;&#x6A21;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C; neuroprosthetic &#x8BBE;&#x5907;&#x963B;&#x6297;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

Currently available methods for analyzing the structural properties of neural tissue are limited by the frequency at which data can be collected and by the need to sacrifice the specimen to correlate histology with other data. Electrical impedance spectroscopy (EIS) can be used to complement conventional histological and imaging-based methods by measuring real-time electrical data that can be ascribed to changes in tissue composition and structure. This report describes an impedance-based method for the analysis and modeling of the electrical properties of three-dimensional neural tissue constructs in vitro. This model system was used to assess the effects of cell density, type and organization on neuroprosthetic device electrode performance.

An in vitro system for modeling brain reactive responses and changes in neuroprosthetic device impedance.

Actuellement, les m&eacute;thodes disponibles pour analyser les propri&eacute;t&eacute;s structurelles du tissu neural sont limit&eacute;es par la fr&eacute;quence &agrave; laquelle les donn&eacute;es peuvent &ecirc;tre collect&eacute;es et par la n&eacute;cessit&eacute; de sacrifier le sp&eacute;cimen pour l&#39;histologie en corr&eacute;lation avec d&#39;autres donn&eacute;es. Spectroscopie d&#39;imp&eacute;dance &eacute;lectrique (SIE) peut &ecirc;tre utilis&eacute;e en compl&eacute;ment des m&eacute;thodes histologiques et ax&eacute;e sur l&#39;imagerie conventionnelles en mesurant les caract&eacute;ristiques &eacute;lectriques en temps r&eacute;el qui peuvent &ecirc;tre attribu&eacute;es aux changements dans la structure et la composition du tissu. Le pr&eacute;sent rapport d&eacute;crit une m&eacute;thode ax&eacute;e sur l&#39;imp&eacute;dance pour l&#39;analyse et la mod&eacute;lisation des propri&eacute;t&eacute;s &eacute;lectriques des constructions en trois dimensions de tissu neural in vitro. Ce syst&egrave;me de mod&egrave;le a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour &eacute;valuer les effets de la densit&eacute; cellulaire, de type et d&#39;organisation sur la performance d&#39;&eacute;lectrode l&#39;appareil NEUROPROTH&Eacute;TIQUES.

Un syst&egrave;me in vitro pour la mod&eacute;lisation des r&eacute;ponses r&eacute;actives de cerveau et les changes d&#39;imp&eacute;dance p&eacute;riph&eacute;rique NEUROPROTH&Eacute;TIQUES.

Attualmente disponibili metodi per analizzare le propriet&agrave; strutturali del tessuto neurale sono limitati dalla frequenza con cui i dati possono essere raccolti e dalla necessit&agrave; di sacrificare il campione per correlare istologia con altri dati. Spettroscopia di impedenza elettrica (EIS) pu&ograve; essere utilizzata per integrare i metodi convenzionali basati su immagini e istologici misurando in tempo reale dati elettrici che possono essere attribuiti ai cambiamenti nella struttura e composizione del tessuto. Questo rapporto descrive un metodo per l&#39;analisi e la modellazione delle propriet&agrave; elettriche del tessuto neurale tridimensionale costrutti in vitro basati su impedenza. Questo sistema di modello &egrave; stato utilizzato per valutare gli effetti della densit&agrave; delle cellule, tipo e organizzazione sulle prestazioni di elettrodi del dispositivo neuroprosthetic.

Un sistema in vitro per la modellazione di risposte reattive di cervello e cambiamenti di impedenza del dispositivo neuroprosthetic.

&#x73FE;&#x5728;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x304C;&#x53CE;&#x96C6;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x983B;&#x5EA6;&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x6A19;&#x672C;&#x3092;&#x72A0;&#x7272;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x96FB;&#x6C17;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5; (EIS) &#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x7D44;&#x6210;&#x53CA;&#x3073;&#x69CB;&#x9020;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x753B;&#x50CF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3068;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D44;&#x7E54;&#x69CB;&#x9020;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;, &#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D44;&#x7E54;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7FA9;&#x80A2;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x96FB;&#x6975;&#x6027;&#x80FD;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x8133;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7FA9;&#x80A2;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9; &#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081; in vitro &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3002;

&#xD604;&#xC7AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xAC00; &#xC218;&#xC9D1; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xB2E4;&#xB978; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xB8CC;&#xB97C; &#xD76C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xD544;&#xC694;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xAE30; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; (EIS) &#xC870;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC131; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC870; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xAE30; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559; &#xBC0F; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xAE30;&#xBC18; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC644; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC870; &#xC0DD;&#xCCB4;&#xC758; &#xC804;&#xAE30;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xAE30;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC124;&#xBA85;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC00;&#xB3C4;, &#xC885;&#xB958; &#xBC0F; neuroprosthetic &#xC7A5;&#xCE58; &#xC804;&#xADF9; &#xC131;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xB1CC; &#xBC18;&#xC751; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC0F; neuroprosthetic &#xC7A5;&#xCE58; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;.

&#x795E;&#x7ECF;&#x4FEE;&#x590D;&#x8BBE;&#x5907;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x5404;&#x79CD;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6210;&#x529F;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8BBE;&#x5907;&#x548C;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x63A5;&#x53E3;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x690D;&#x5165;&#x5F0F;&#x7684;&#x88C5;&#x7F6E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x6709;&#x5173;&#x8054;&#x8BBE;&#x5907;&#x7535;&#x6781;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x7684;&#x6027;&#x80FD;&#x662F;&#x690D;&#x5165;&#x73B0;&#x573A;&#x7684;&#x7535;&#x7EDD;&#x7F18;&#x80F6;&#x8D28;&#x9798;&#x5F62;&#x6210;&#x5047;&#x8BF4;&#x4ECE;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x963B;&#x6297;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5C11;&#x5DF2;&#x77E5;&#x6709;&#x5173;&#x54EA;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x963B;&#x6297;&#x503C;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7535;&#x6781;&#x6027;&#x80FD;&#x7684;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728;&#x54EA;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5047;&#x4F53;&#x88C5;&#x7F6E;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x77E9;&#x9635;&#x5185;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x963B;&#x6297;&#x8C31;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x57F9;&#x517B;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x661F;&#x5F62;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x517B;&#x6B96;&#x5728;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#xFF0C;&#x77E9;&#x9635;&#x4E2D;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6BD4;&#x7387;&#x548C;&#x88AB;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4E86;&#x4E3A;&#x671F; 2 &#x5468;&#x3002;&#x79CD;&#x5B50;&#x8BBE;&#x5B9A;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E0E;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x56FE;&#x50CF;&#x88AB;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x963B;&#x6297;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF;&#x80FD;&#x591F;&#x5BF9;&#x7535;&#x6781;&#x963B;&#x6297;&#x5F85;&#x5B9A;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x4ECE;&#x4F53;&#x5916;&#x7684; neuralprosthetic &#x8BBE;&#x5907;&#x8BB0;&#x5F55;&#x7535;&#x6781;&#x963B;&#x6297;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Neural prosthetic devices hold the potential to be used in the treatment of a variety of neurological disorders. However, their long-term clinical success is currently limited by the ability to achieve stable interfaces between devices and the CNS. Immunohistochemical analysis has shown that cellular responses occur in tissue surrounding implanted devices. These cellular responses have been correlated with the impedance measured from device electrodes, leading to the hypothesis that a possible mechanism resulting in inconsistent device performance is the formation of an electrically insulating glial sheath at the implantation site. However, little is known about what cellular and tissue changes affect impedance values and thus contribute to the decreases in electrode performance. We have designed an in vitro system in which cell conditions can be varied within an artificial tissue matrix surrounding a neural prosthetic device. In this study, high-density cultures of glial cells were analyzed by immunohistochemical methods and impedance spectroscopy. Astrocytes and microglia were cultured at various ratios within the matrix surrounding the probes, and were observed over a period of 2 weeks. Cell seeding conditions and confocal images were compared to impedance data to enable the effects of glial cell type on electrode impedance to be determined.

Effects of glial cells on electrode impedance recorded from neuralprosthetic devices in vitro.

Les proth&egrave;ses neurales d&eacute;tiennent le potentiel pour &ecirc;tre utilis&eacute; dans le traitement de divers troubles neurologiques. Cependant, leur succ&egrave;s clinique &agrave; long terme est actuellement limit&eacute; par la capacit&eacute; de r&eacute;aliser des interfaces stables entre les p&eacute;riph&eacute;riques et les CNS. L&#39;analyse immunohistochimique a montr&eacute; que les r&eacute;ponses cellulaires se produisent dans le tissu entourant les dispositifs implant&eacute;s. Ces r&eacute;ponses cellulaires ont &eacute;t&eacute; corr&eacute;l&eacute;s avec l&#39;imp&eacute;dance mesur&eacute;e &agrave; partir des &eacute;lectrodes de l&#39;appareil, conduisant &agrave; l&#39;hypoth&egrave;se qu&#39;un m&eacute;canisme possible r&eacute;sultant en une performance p&eacute;riph&eacute;rique incompatible est la formation d&#39;une gaine gliale &eacute;lectriquement isolante sur le site d&#39;implantation. Cependant, peu est connu sur ce que cellulaires et tissulaires modifications affectent des valeurs d&#39;imp&eacute;dance et contribuer ainsi &agrave; la diminution des performances de l&#39;&eacute;lectrode. Nous avons con&ccedil;u un syst&egrave;me in vitro dans quelle cellule conditions peuvent varier au sein d&#39;une matrice de tissu artificiel entourant une proth&egrave;se neuronale. Dans cette &eacute;tude, les cultures &agrave; haute densit&eacute; de cellules gliales ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es par des m&eacute;thodes immunohistochimiques et spectroscopie d&#39;imp&eacute;dance. Les astrocytes et les cellules microgliales ont &eacute;t&eacute; cultiv&eacute;s &agrave; divers rapports au sein de la matrice qui entoure les sondes et ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s sur une p&eacute;riode de 2 semaines. Conditions de semis de cellules et images confocales ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;s aux donn&eacute;es d&#39;imp&eacute;dance pour activer les effets du type de cellules gliales sur l&#39;imp&eacute;dance de l&#39;&eacute;lectrode &agrave; d&eacute;terminer.

Effets des cellules gliales sur l&#39;imp&eacute;dance de l&#39;&eacute;lectrode enregistrement de dispositifs neuralprosthetic in vitro.

Dispositivi protesici neurale tengono il potenziale per essere utilizzato nel trattamento di una variet&agrave; di disordini neurologici. Tuttavia, il loro successo clinico a lungo termine attualmente &egrave; limitato dalla capacit&agrave; di realizzare interfacce stabili fra i dispositivi e il CNS. L&#39;analisi di immunohistochemical ha mostrato che le risposte cellulari si verificano nel tessuto circostante dispositivi impiantati. Queste risposte cellulari sono state correlate con l&#39;impedenza misurata dagli elettrodi del dispositivo, che porta l&#39;ipotesi che un possibile meccanismo con conseguente le prestazioni del dispositivo incoerente &egrave; la formazione di una guaina gliale elettricamente isolante al sito di impianto. Tuttavia, poco &egrave; noto sul cellulare e tessuto cambiamenti possono influenzare i valori di impedenza e contribuire cos&igrave; a diminuzioni delle prestazioni degli elettrodi. Abbiamo progettato un sistema in vitro in quale cella possono essere variate le condizioni all&#39;interno di una matrice di tessuto artificiale che circonda un dispositivo protesico neurale. In questo studio, le culture ad alta densit&agrave; di cellule gliali sono state analizzate con metodi immunoistochimici e spettroscopia di impedenza. Astrociti e microglia sono state coltivate in vari rapporti all&#39;interno della matrice che circonda le sonde e sono stati osservati per un periodo di 2 settimane. Condizioni di semina di cella e immagini confocal erano rispetto ai dati di impedenza per abilitare gli effetti del tipo di cellula gliale sull&#39;impedenza elettrodo da determinarsi.

Effetti di cellule gliali sull&#39;impedenza elettrodo registrarono da neuralprosthetic dispositivi in vitro.

&#x795E;&#x7D4C;&#x88DC;&#x7DB4;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x5B66;&#x7684;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x81E8;&#x5E8A;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x5B89;&#x5B9A;&#x300D;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF; &#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30B9; &#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3068;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6CE8;&#x5165;&#x5468;&#x56F2;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x7D76;&#x7E01;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x9798;&#x6CE8;&#x5165;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x96FB;&#x6975;&#x304B;&#x3089;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;.&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5024;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x96FB;&#x6975;&#x6027;&#x80FD;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5185;&#x306E;&#x3069;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x6761;&#x4EF6;&#x795E;&#x7D4C;&#x88DC;&#x7DB4;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x5DFB;&#x304F;&#x306F;&#x4EBA;&#x5DE5;&#x7D44;&#x7E54;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5185;&#x3067;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; in vitro &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x57F9;&#x990A;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x6CD5;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3068;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x5468;&#x8FBA;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5185;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x6BD4;&#x7387;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;2 &#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x64AD;&#x7A2E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3068;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x753B;&#x50CF;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x96FB;&#x6975;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9; &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x96FB;&#x6975;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E; neuralprosthetic &#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x8A18;&#x9332;&#x3002;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xBCF4; &#xCCA0; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC784;&#xC0C1; &#xC131;&#xACF5; &#xD604;&#xC7AC; &#xC7A5;&#xCE58; &#xBC0F; CNS &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Immunohistochemical &#xBD84;&#xC11D; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC870;&#xC9C1; &#xC774;&#xC2DD;&#xB41C; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC774;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC804;&#xADF9;, &#xC77C;&#xAD00;&#xC131; &#xC5C6;&#xB294; &#xC7A5;&#xCE58; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC774;&#xC2DD; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC808;&#xC5F0; &#xD3D0;&#xD574; &#xCE7C; &#xC9D1;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC740; &#xAC00;&#xC124;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC791;&#xC740; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC740; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xAC12; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC73C;&#xBA70; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC804;&#xADF9; &#xC131;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC140;&#xC5D0; &#xC870;&#xAC74; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBCF4; &#xCCA0; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xC778;&#xACF5; &#xC870;&#xC9C1; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC124;&#xACC4; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xBB38;&#xD654; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; immunohistochemical &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xBC0F; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xC11D; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB2E4;&#xC640; microglia &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xB97C; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBE44;&#xC728;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACBD;&#xC791; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; 2 &#xC8FC; &#xB3D9;&#xC548; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xB4DC; &#xC870;&#xAC74; &#xC140;&#xACFC; &#xACF5;&#xCD08;&#xC810; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xACB0;&#xC815; &#xC804;&#xADF9; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4;&#xC5D0; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC804;&#xADF9; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4;&#xC5D0; glial &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; neuralprosthetic &#xC7A5;&#xCE58; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB85D;.

Pr&oacute;tesis neuronales tienen el potencial para ser utilizados en el tratamiento de una variedad de trastornos neurol&oacute;gicos. Sin embargo, su &eacute;xito cl&iacute;nico a largo plazo actualmente est&aacute; limitada por la capacidad de lograr interfaces estables entre dispositivos y el CNS. An&aacute;lisis immunohistochemical ha mostrado que las respuestas celulares ocurren en el tejido que rodea los dispositivos implantados. Estas respuestas celulares se han correlacionado con la impedancia de electrodos de dispositivo, conduce a la hip&oacute;tesis de que un mecanismo posible rendimiento dispositivo incompatible es la formaci&oacute;n de una vaina glial el&eacute;ctricamente aislante en el sitio de implantaci&oacute;n. Sin embargo, poco se sabe sobre qu&eacute; celular y tejido cambios afectan valores de impedancia y as&iacute; contribuir a las disminuciones en el rendimiento del electrodo. Hemos dise&ntilde;ado un sistema in vitro en que celda condiciones pueden variar dentro de una matriz de tejido artificial que rodea una pr&oacute;tesis neuronal. En este estudio, cultivos de alta densidad de c&eacute;lulas gliales se analizaron por m&eacute;todos inmunohistoqu&iacute;micos y espectroscopia de impedancia. Astrocitos y microglia fueron cultivados en diferentes proporciones dentro de la matriz que rodea las sondas y fueron observados durante un per&iacute;odo de 2 semanas. Condiciones de siembra de la c&eacute;lula y confocales im&aacute;genes se compararon con datos de impedancia para permitir que los efectos del tipo de c&eacute;lula glial en la impedancia del electrodo a determinarse.

Efectos de la c&eacute;lulas gliales en impedancia de electrodo registran de dispositivos de neuralprosthetic in vitro.

&#x5C42;&#x6D41;&#x548C;&#x8109;&#x52A8;&#x6D41;&#x7684;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x901A;&#x9053;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x3002;&#x8272;&#x6563;&#x5F71;&#x54CD;&#x6269;&#x6563;&#x548C;&#x5BF9;&#x6D41;&#x5E72;&#x6270;&#x9020;&#x6210;&#x7684;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8BD5;&#x5242;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x914D;&#x7F6E;&#x6587;&#x4EF6;&#x53D8;&#x5F97;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x6A21;&#x7CCA;&#x4E86;&#x6E20;&#x9053;&#x7684;&#x957F;&#x5EA6;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x6CB9;-&#x6C34;&#x9636;&#x6BB5;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x90E8;&#x5206;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6709;&#x7684;&#x8D34;&#x58C1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#x7684;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x5B8C;&#x5168;&#x5177;&#x6709;&#x751F;&#x7269;&#x76F8;&#x5BB9;&#x6027;&#x6C34;&#x4E24;&#x76F8;&#x6D41;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x56FE;&#x6848;&#x7B80;&#x5355;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x63D0;&#x4F9B;&#x751F;&#x5316;&#x5904;&#x7406;&#x6839;&#x636E;&#x79BB;&#x6563;&#x8FB9;&#x754C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5185;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x53CC;&#x6C34;&#x76F8;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x7CBE;&#x786E;&#x5730;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5C42;&#x6D41;&#x56FE;&#x6848;&#xFF0C;&#x6216;&#x4EE5;&#x5F3A;&#x8FEB;&#x7684;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5C9B;&#x5C7F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x7CBE;&#x786E;&#x63A7;&#x5236;&#x5316;&#x5B66;&#x4F20;&#x9012;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x6E20;&#x9053;&#x5185;&#x7684;&#x9884;&#x5236;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x3002;&#x542B;&#x80F0;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x66F4;&#x53EF;&#x9760;&#x5730;&#x4F7F;&#x7528;&#x6BD4;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E38;&#x89C4;&#x8FD0;&#x8F7D;&#x5728;&#x6C34;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C34;&#x4E24;&#x76F8;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x5206;&#x5B50;&#x5185;&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x4F7F;&#x7528;&#x53CC;&#x6C34;&#x76F8;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x7CBE;&#x786E;&#x5730;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7684;&#x5F00;&#x5C55;&#x3002;

Laminar and pulsatile flow of aqueous solutions in microfluidic channels can be useful for controlled delivery of cells and molecules. Dispersion effects resulting from diffusion and convective disturbances, however, result in reagent delivery profiles becoming blurred over the length of the channels. This issue is addressed partially by using oil-in-water phase systems. However, there are limitations in terms of the biocompatibility of these systems for adherent cell culture. Here we present a fully biocompatible aqueous two-phase flow system that can be used to pattern cells within simple microfluidic channel designs, as well as to deliver biochemical treatments to cells according to discrete boundaries. We demonstrate that aqueous two-phase systems are capable of precisely delivering cells as laminar patterns, or as islands by way of forced droplet formation. We also demonstrate that these systems can be used to precisely control chemical delivery to preformed monolayers of cells growing within channels. Treatments containing trypsin were localized more reliably using aqueous two-phase delivery than using conventional delivery in aqueous medium.

Precisely targeted delivery of cells and biomolecules within microchannels using aqueous two-phase systems.

&Eacute;coulement laminaire et pulsatile de solutions aqueuses dans des canaux microfluidiques peut &ecirc;tre utile pour des livraisons surveill&eacute;es des cellules et des mol&eacute;cules. Effets de dispersion r&eacute;sultant de la diffusion et de convection perturbations, entra&icirc;nent cependant, profils de livraison r&eacute;actif deviennent floues sur toute la longueur des canaux. Ce probl&egrave;me est r&eacute;solu partiellement &agrave; l&#39;aide de syst&egrave;mes phase huile dans l&#39;eau. Cependant, il y a des limites sur le plan de la biocompatibilit&eacute; des ces syst&egrave;mes pour culture cellulaire adh&eacute;rente. Nous pr&eacute;sentons un syst&egrave;me enti&egrave;rement biocompatible &eacute;coulement biphas&eacute; aqueux qui permet aux cellules de patron au sein de la microfluidique simple canal con&ccedil;oit, aussi bien quant &agrave; livrer des traitements biochimiques aux cellules selon limites discr&egrave;tes. Nous d&eacute;montrent que les syst&egrave;mes &agrave; deux phases aqueuses sont capables de d&eacute;livrer pr&eacute;cis&eacute;ment les cellules comme patrons laminaires ou &icirc;les au moyen de la formation de gouttelettes forc&eacute;. Nous d&eacute;montrons &eacute;galement que ces syst&egrave;mes peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;s pour contr&ocirc;ler pr&eacute;cis&eacute;ment chimique livraison &agrave; pr&eacute;form&eacute; monocouches de cellules qui croissent dans les chenaux. Traitements contenant la trypsine ont &eacute;t&eacute; localis&eacute;s plus s&ucirc;rement &agrave; l&#39;aide de livraison en deux phases aqueuse que d&#39;utiliser la livraison conventionnelle en milieu aqueux.

Administration pr&eacute;cis&eacute;ment cibl&eacute;e des cellules et biomol&eacute;cules au sein de microcanaux en utilisant des syst&egrave;mes &agrave; deux phases aqueuses.

Flusso laminare e pulsatile di soluzioni acquose in canali microfluidici pu&ograve; essere utile per la consegna controllata di cellule e molecole. Gli effetti di dispersione derivante dalla diffusione e dispersioni convettivi, tuttavia, comportare profili di consegna del reagente diventando offuscate per la lunghezza dei canali. Questo problema &egrave; affrontato parzialmente utilizzando sistemi a fase di olio in acqua. Tuttavia, ci sono limitazioni in termini della biocompatibilit&agrave; di questi sistemi per la coltura delle cellule aderenti. Qui vi presentiamo un sistema di flusso a due fasi acquose completamente biocompatibile che pu&ograve; essere utilizzato per celle di pattern all&#39;interno di microfluidica semplice canale disegni, come pure quanto a fornire trattamenti biochimici alle cellule secondo i confini discreti. Dimostriamo che sistemi a due fasi acquosi sono in grado di fornire esattamente le cellule come modelli laminare, o isole a titolo di formazione di goccioline forzata. Abbiamo anche dimostrare che questi sistemi possono essere utilizzati per controllare con precisione chimica consegna a preformato monostrati di cellule in crescita all&#39;interno di canali. Trattamenti contenente tripsina erano localizzati in modo pi&ugrave; affidabile mediante consegna a due fasi acquosa rispetto all&#39;utilizzo di consegna convenzionale in mezzo acquoso.

Consegna precisamente mirata delle cellule e biomolecole all&#39;interno di microcanali utilizzando sistemi bifasi acquosi.

&#x6C34;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x8DEF;&#x306E;&#x5C64;&#x6D41;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8108;&#x52D5;&#x6D41;&#x308C;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x4FE1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x62E1;&#x6563;&#x3068;&#x5BFE;&#x6D41;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x5206;&#x6563;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x307C;&#x3084;&#x3051;&#x3066;&#x8A66;&#x85AC;&#x914D;&#x4FE1;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x6C34;&#x4E2D;&#x6CB9;&#x76F8;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6271;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x306E;&#x9762;&#x3067;&#x5236;&#x9650;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x96E2;&#x6563;&#x5883;&#x754C;&#x306B;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6CBB;&#x7642;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x751F;&#x4F53;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x306E;&#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6D41;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x7CFB;&#x304C;&#x5C64;&#x6D41;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3084;&#x8AF8;&#x5CF6;&#x5F37;&#x5236;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30B1;&#x30DF;&#x30AB;&#x30EB;&#x4F9B;&#x7D66;&#x306E;&#x524D;&#x3082;&#x3063;&#x3066;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5358;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x5185;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x80B2;&#x3064;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3092;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x6DFB;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3088;&#x308A;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x914D;&#x4FE1;&#x6C34;&#x6027;&#x5A92;&#x4F53;&#x4E2D;&#x306E;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

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Flujo laminar y puls&aacute;til de soluciones acuosas en microfluidos canales puede ser &uacute;til para liberaci&oacute;n controlada de las c&eacute;lulas y las mol&eacute;culas. Efectos de dispersi&oacute;n resultante de difusi&oacute;n y convecci&oacute;n disturbios, sin embargo, resultar en perfiles de entrega de reactivo desdibujados a lo largo de los canales. Este tema es tratado parcialmente mediante el uso de sistemas de la fase de aceite en agua. Sin embargo, existen limitaciones en cuanto a la compatibilidad de estos sistemas de cultivo de c&eacute;lulas adherentes. Aqu&iacute; presentamos un sistema de flujo de dos fases acuosas totalmente biocompatible que permite a las c&eacute;lulas del patr&oacute;n dentro de microfluidos simple canal dise&ntilde;os, as&iacute; como para ofrecer tratamientos bioqu&iacute;micos a las c&eacute;lulas seg&uacute;n fronteras discretas. Demostramos que los sistemas de dos fases acuosos son capaces de entregar precisamente las c&eacute;lulas como patrones laminares, o como las islas a trav&eacute;s de la formaci&oacute;n de gotas forzada. Tambi&eacute;n demostramos que estos sistemas pueden utilizarse para controlar precisamente la entrega de productos qu&iacute;micos para preformado monocapas de c&eacute;lulas creciendo dentro de canales. Tratamientos con tripsina fueron localizados m&aacute;s confiablemente con entrega de dos fases acuosa que entrega convencional en medio acuoso.

Objetivo entrega de c&eacute;lulas y biomol&eacute;culas en microcanales utilizando sistemas de dos fases acuosos.

Exposure of a negative photoresist-coated glass slide with diffused light from the backside through a mask with disconnected features provides multi-level rounded channels with narrow orifices in one exposure. Using these structures, we construct microfluidic systems capable of creating aqueous two-phase system droplets where one aqueous phase forms droplets and the other aqueous phase forms the surrounding matrix. Unlike water-in-oil droplet systems, aqueous two-phase systems can have very low interfacial tensions that prevent spontaneous droplet formation. The multi-level channels fabricated by backside lithography satisfy two conflicting needs: (i) the requirement to have narrowed channels for efficient valve closure by channel deformation and (ii) the need to have wide channels to reduce the flow velocity, thus reducing the capillary number and enhancing droplet formation.

Rounded multi-level microchannels with orifices made in one exposure enable aqueous two-phase system droplet microfluidics.

&#x5F25;&#x6F2B;&#x5149;&#x7684;&#x8D1F;&#x5149;&#x523B;&#x80F6;&#x6D82;&#x5C42;&#x73BB;&#x7483;&#x5E7B;&#x706F;&#x7247;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x9762;&#x5177;&#x4E0E;&#x65AD;&#x5F00;&#x8FDE;&#x63A5;&#x529F;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x80CC;&#x9762;&#x7684;&#x66DD;&#x5149;&#x63D0;&#x4F9B;&#x591A;&#x5C42;&#x6B21;&#x5706;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#x4E0E;&#x7A84;&#x5B54;&#x7A8D;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x66DD;&#x5149;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x6784;&#x9020;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x80FD;&#x591F;&#x521B;&#x5EFA;&#x53CC;&#x6C34;&#x76F8;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x54EA;&#x91CC;&#x4E00;&#x6C34;&#x76F8;&#x5F62;&#x6210;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x542B;&#x6C34;&#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x77E9;&#x9635;&#x3002;&#x4E0E;&#x6C34;&#x5728;&#x6CB9;&#x6EF4;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;&#x53CC;&#x6C34;&#x76F8;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x5F88;&#x4F4E;&#x7684;&#x754C;&#x9762;&#x5F20;&#x529B;&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x7F16;&#x9020;&#x7684;&#x80CC;&#x9762;&#x523B;&#x7684;&#x591A;&#x7EA7;&#x6E20;&#x9053;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x4E24;&#x4E2A;&#x77DB;&#x76FE;&#x7684;&#x9700;&#x6C42;&#xFF1A; (i) &#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#xFF0C;&#x6709;&#x6536;&#x7A84;&#x6E20;&#x9053;&#x9AD8;&#x6548;&#x9600;&#x95E8;&#x5173;&#x95ED;&#x901A;&#x9053;&#x53D8;&#x5F62;&#x548C; (ii)&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x6709;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x6D41;&#x52A8;&#x901F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x51CF;&#x5C11;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6570;&#x91CF;&#x548C;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

&#x5B54;&#x7A8D;&#x4E00;&#x66B4;&#x9732;&#x5728;&#x53D6;&#x5F97;&#x7684;&#x5706;&#x89D2;&#x591A;&#x5C42;&#x6B21;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x9053;&#x542F;&#x7528;&#x53CC;&#x6C34;&#x76F8;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x3002;

Exposition d&#39;une lame de verre r&eacute;sine photosensible n&eacute;gative avec la lumi&egrave;re diffuse de l&#39;arri&egrave;re &agrave; travers un masque avec des fonctionnalit&eacute;s d&eacute;connect&eacute;es fournit des canaux d&#39;arrondis &agrave; plusieurs niveaux avec des orifices &eacute;troits dans une exposition. &Agrave; l&#39;aide de ces structures, nous construisons des syst&egrave;mes microfluidiques capables de cr&eacute;er des gouttelettes de syst&egrave;me &agrave; deux phases aqueuses o&ugrave; une phase aqueuse forme des gouttelettes et l&#39;autre phase aqueuse constitue la matrice environnante. Contrairement aux syst&egrave;mes de gouttelettes d&#39;eau dans l&#39;huile, syst&egrave;mes &agrave; deux phases aqueuses peuvent avoir des tr&egrave;s faibles tensions interfaciales qui emp&ecirc;chent la formation de gouttelettes spontan&eacute;e. Les canaux &agrave; plusieurs niveaux, fabriqu&eacute;s par Lithographie dos satisfont deux besoins contradictoires: (i) l&#39;obligation d&#39;avoir r&eacute;duit les canaux pour fermeture de soupape efficace par d&eacute;formation de canal et (ii) la n&eacute;cessit&eacute; de disposer de larges canaux afin de r&eacute;duire la vitesse d&#39;&eacute;coulement, ainsi r&eacute;duisant le nombre de capillaire et renforcer la formation de gouttelettes.

Arrondis MICROCANAUX multi-niveaux avec orifices r&eacute;alis&eacute;s dans une exposition permettre un syst&egrave;me biphas&eacute; aqueux gouttelettes microfluidique.

L&#39;esposizione di una diapositiva di vetro rivestite con photoresist negativo con luce diffusa dal retro attraverso una maschera con caratteristiche disconnessi fornisce canali arrotondati multilivelli con stretti orifizi in una unica esposizione. Utilizzando queste strutture, costruiamo sistemi microfluidici capaci di creare droplet sistema bifase acquoso dove una fase acquosa forma goccioline e l&#39;altra fase acquosa della matrice circostante. A differenza dei sistemi di gocciolina di acqua in olio, sistemi a due fasi acquosi possono avere molto basse tensioni interfacciali che impediscono la formazione di goccioline spontanea. I canali multi-livelli fabbricati dalla litografia retro soddisfano due esigenze contrastanti: (i) l&#39;obbligo di avere ridotto canali per chiusura valvola efficiente dalla deformazione del canale e (ii) la necessit&agrave; di avere ampie canali per ridurre la velocit&agrave; del flusso, riducendo il numero di capillare e migliorando la formazione di goccioline.

Arrotondati microcanali multilivelli con orifizi effettuati in una unica esposizione attiva sistema bifase acquoso gocciolina microfluidica.

&#x8CA0;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8; &#x30B3;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30AC;&#x30E9;&#x30B9; &#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#x62E1;&#x6563;&#x5149;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x5207;&#x65AD;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x30DE;&#x30B9;&#x30AF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x88CF;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4E38;&#x307F;&#x3092;&#x5E2F;&#x3073;&#x305F;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB; 1 &#x3064;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x306E;&#x72ED;&#x3044;&#x958B;&#x53E3;&#x90E8;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E;&#x6DB2;&#x76F8;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x6DB2;&#x76F8;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x6C34;&#x6027; 2 &#x76F8;&#x7CFB;&#x6EF4;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6CB9;&#x4E2D;&#x6C34;&#x6EF4;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x7CFB;&#x81EA;&#x7136;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x306E;&#x754C;&#x9762;&#x5F35;&#x529B;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x88CF;&#x9762;&#x30EA;&#x30BD;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x591A;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7AF6;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x3092;&#x6E80;&#x305F;&#x3059;: (i) &#x306E;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x7D5E;&#x308A;&#x8FBC;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x5F01;&#x9589;&#x9396;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x5909;&#x5F62;&#x3057;&#x3066; (ii) &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x6570;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x3068;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3001;&#x6D41;&#x901F;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5E83;&#x3044;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

1 &#x3064;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x3067;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x958B;&#x53E3;&#x90E8;&#x306B;&#x4E38;&#x307F;&#x3092;&#x5E2F;&#x3073;&#x305F;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6C34;&#x6027; 2 &#x76F8;&#x7CFB;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5F0;&#xACB0;&#xC774; &#xB04A;&#xAE34;&#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC2A4;&#xD06C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB4B7;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC0B0; &#xB41C; &#xBE5B;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xAD11; &#xC81C; &#xCF54;&#xD305; &#xC720;&#xB9AC; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C; &#xD55C; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC881;&#xC740; orifices&#xACFC; &#xB2E4;&#xB2E8;&#xACC4; &#xB465;&#xADFC;&#xB41C; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBC29;&#xC6B8; &#xBC29;&#xC6B8;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC218;&#xC131; &#xB2E8;&#xACC4; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xC218;&#xC131; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBBF8;&#xC138; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC0DD;&#xC131;. &#xBB3C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xB984; &#xBC29;&#xC6B8; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xACFC; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC790;&#xC5F0; &#xC2A4;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8; &#xD615;&#xC131; &#xBC29;&#xC9C0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB0AE;&#xC740; &#xACC4;&#xBA74; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB4B7;&#xBA74; &#xB9AC;&#xC18C; &#xADF8;&#xB798;&#xD53C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xBA40;&#xD2F0; &#xCC44;&#xB110; &#xB450; &#xC0C1;&#xBC18; &#xB41C; &#xC694;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCDA9;&#xC871;: (i) &#xB098;&#xAC00;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4; &#xC694;&#xAD6C; &#xCC44;&#xB110; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBC38;&#xBE0C; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC44;&#xB110; &#xBCC0;&#xD615;, (ii)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xC218;&#xC640; &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8; &#xD615;&#xC131; &#xAC15;&#xD654; &#xD750;&#xB984; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xCC44;&#xB110;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD55C; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; orifices&#xACFC; &#xB465;&#xADFC;&#xB41C; &#xB2E4;&#xB2E8;&#xACC4; microchannels &#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8; microfluidics &#xD65C;&#xC131;&#xD654;.

Exposici&oacute;n de una diapositiva de cristal revestido de photoresist negativo con luz difusa de la parte trasera a trav&eacute;s de una m&aacute;scara con caracter&iacute;sticas desconectados proporciona niveles m&uacute;ltiples canales redondeados con orificios estrechos en una exposici&oacute;n. Con estas estructuras, construimos sistemas microflu&iacute;dicos capaces de crear gotas de sistema de dos fases acuosas donde una fase acuosa forma gotitas y otra fase acuosa de la matriz circundante. A diferencia de los sistemas de la gota de agua en aceite, sistemas de dos fases acuosos pueden tener muy bajas tensiones interfaciales que impiden la formaci&oacute;n espont&aacute;nea de la gotita. Los canales multiniveles fabricados por litograf&iacute;a de parte trasera satisfacen dos necesidades conflictivas: (i) la obligaci&oacute;n se han estrechado los canales para el cierre de la v&aacute;lvula eficiente por la deformaci&oacute;n del canal y (ii) la necesidad de tener amplio canales para reducir la velocidad del flujo, lo que reduce el n&uacute;mero capilar y mejorar la formaci&oacute;n de gotas.

Microcanales multiniveles redondeados con orificios en una exposici&oacute;n permiten microflu&iacute;dica gotita de sistema de dos fases acuosas.

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The development of tools for patterning cocultures of cells is a fundamental interest among cell biologists and tissue engineers. Although a variety of systems exist for micropatterning cells, the methods used to generate cell micropatterns are often cumbersome and difficult to adapt for tissue engineering purposes. This study combines acoustic droplet ejection and aqueous two-phase system exclusion patterning to introduce a method for patterning cocultures of cells in multiplexed arrays. This new method uses focused acoustic radiation pressure to eject discrete droplets of uniform size from the surface of a dextran solution containing cells. The size of droplets is controlled by adjusting ultrasound parameters, such as pulse, duration, and amplitude. The ejected dextran droplets are captured on a cell culture substrate that is manipulated by a computer-controlled 3D positioning system according to predesigned patterns. Polyethylene glycol solution containing an additional cell type is then added to the culture dish to produce a two-phase system capable of depositing different types of cells around the initial pattern of cells. We demonstrate that our method can produce patterns of islands or lines with two or more cell types. Further, we demonstrate that patterns can be multiplexed for studies involving combinations of multiple cell types. This method offers a tool to transfer cell-containing samples in a contact-free, nozzle-less manner, avoiding sample cross-contamination. It can be used to pattern cell cocultures without complicated fabrication of culture substrates. These capabilities were used to examine the response of cancer cells to the presence of a ligand (CXCL12) secreted from surrounding cocultured cells.

Rapid generation of multiplexed cell cocultures using acoustic droplet ejection followed by aqueous two-phase exclusion patterning.

Le d&eacute;veloppement d&#39;outils de structuration des cocultures de cellules est un int&eacute;r&ecirc;t fondamental entre les biologistes cellulaires et ing&eacute;nieurs de tissu. Bien que divers syst&egrave;mes existent pour les cellules de micropatterns, les m&eacute;thodes utilis&eacute;es pour g&eacute;n&eacute;rer les cellules micropatterns sont souvent lourdes et difficiles &agrave; adapter pour fins d&#39;ing&eacute;nierie tissulaire. Cette &eacute;tude combine l&#39;&eacute;jection de gouttelettes acoustique et exclusion de syst&egrave;me &agrave; deux phases aqueuses patterning pour mettre en place une m&eacute;thode de structuration des cocultures de cellules dans les tableaux multiplex&eacute;s. Cette nouvelle m&eacute;thode utilise la pression sonore cibl&eacute;e pour &eacute;jecter des gouttelettes discrets de taille uniforme de la surface d&#39;une solution de dextran contenant des cellules. La taille des gouttelettes est contr&ocirc;l&eacute;e en ajustant les param&egrave;tres ultrasons, tels que les impulsions, la dur&eacute;e et amplitude. Les gouttelettes de dextran &eacute;ject&eacute; sont captur&eacute;es sur un substrat de culture cellulaire qui est manipul&eacute; par un syst&egrave;me de positionnement 3D command&eacute;e par ordinateur selon des mod&egrave;les pr&eacute;d&eacute;finis. Solution poly&eacute;thyl&egrave;ne glycol contenant un type de cellule suppl&eacute;mentaire est alors ajout&eacute;e &agrave; la bo&icirc;te de Petri pour produire un syst&egrave;me &agrave; deux phases capable de d&eacute;poser les diff&eacute;rents types de cellules autour de la configuration initiale des cellules. Nous d&eacute;montrons que notre m&eacute;thode peut produire des mod&egrave;les de lignes avec deux ou plusieurs types de cellules ou des &icirc;les. De plus, nous d&eacute;montrons que patrons peuvent &ecirc;tre multiplex&eacute;s pour les &eacute;tudes concernant les combinaisons de plusieurs types de cellules. Cette m&eacute;thode offre un outil pour transf&eacute;rer les &eacute;chantillons contenant des cellules d&#39;une mani&egrave;re sans contact, sans buse, &eacute;vitant la contamination crois&eacute;e &eacute;chantillon. Il peut &ecirc;tre utilis&eacute; pour mod&egrave;le cellulaire cocultures sans complexe fabrication de substrats de culture. Ces capacit&eacute;s ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour &eacute;tudier la r&eacute;ponse des cellules canc&eacute;reuses &agrave; la pr&eacute;sence d&#39;un ligand (CXCL12) s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e par les cellules cocultured.

G&eacute;n&eacute;ration rapide des cocultures multiplex&eacute; de cellule &agrave; l&#39;aide d&#39;&eacute;jection de gouttelettes acoustique suivie de structuration de l&#39;exclusion de deux phases aqueuses.

Lo sviluppo di strumenti per la creazione di serie di cocultures delle cellule &egrave; un interesse fondamentale tra i biologi delle cellule e tessuti tecnici. Anche se per le cellule micropatterning esiste una variet&agrave; di sistemi, i metodi utilizzati per generare cellule microdisegni sono spesso ingombranti e difficili da adattare per scopi di ingegneria dei tessuti. Questo studio combina espulsione gocciolina acustica e l&#39;esclusione di sistema a due fasi acquose creazione per introdurre un metodo per la creazione di serie di cocultures delle cellule matrici multiplex. Questo nuovo metodo utilizza la pressione di radiazione acustica focalizzata per espellere discrete goccioline di dimensione uniforme dalla superficie di una soluzione di destrano contenente cellule. La dimensione delle goccioline &egrave; controllata dalla regolazione parametri ad ultrasuoni, come impulso, ampiezza e durata. Le goccioline di destrano espulso vengono catturate su un substrato di cultura cellulare che viene manipolato da un computer controllato 3D sistema di posizionamento secondo schemi predefiniti. Polietilene glicole soluzione contenente un tipo di cellule supplementari viene quindi aggiunto al piatto di cultura per produrre un sistema a due fasi in grado di depositare diversi tipi di cellule intorno al pattern iniziale delle cellule. Dimostriamo che il nostro metodo in grado di produrre modelli di isole o linee con due o pi&ugrave; tipi di cellule. Inoltre, dimostriamo che possono essere multiplexati modelli per gli studi che coinvolgono combinazioni di pi&ugrave; tipi di cellule. Questo metodo offre uno strumento per trasferire campioni contenenti cellule in maniera senza contatto, ugello di meno, evitando contaminazioni campione. Pu&ograve; essere utilizzato per pattern celle cocultures senza complicate fabbricazione dei substrati di coltura. Queste funzionalit&agrave; sono state utilizzate per esaminare la risposta delle cellule di cancro per la presenza di un ligando (CXCL12) secernuta dai circostanti cellule cocultured.

Generazione rapida di cella multiplex cocultures utilizzando espulsione acustica goccia seguita da patterning esclusione due fasi acquose.

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2 &#x76F8;&#x7CFB;&#x306E;&#x9664;&#x5916;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x96C6;&#x675F;&#x97F3;&#x97FF;&#x653E;&#x5C04;&#x5727;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5747;&#x4E00;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x96E2;&#x6563;&#x6EF4;&#x3092;&#x30A4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;&#x671F;&#x9593;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x632F;&#x5E45;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8D85;&#x97F3;&#x6CE2;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5674;&#x51FA;&#x30C7;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5236;&#x5FA1; 3 D &#x6E2C;&#x4F4D;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x6E08;&#x307F;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x57FA;&#x6750;&#x3067;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0; &#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30EB;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3092;&#x5165;&#x91D1;&#x306E;&#x6C17;&#x6DB2;&#x4E8C;&#x76F8;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x57F9;&#x990A;&#x76BF;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x5CF6;&#x3005; &#x3084; 2 &#x3064;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x578B;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x884C;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x591A;&#x91CD;&#x5316;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB; &#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x6C5A;&#x67D3;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x7121;&#x6599;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x3001;&#x30CE;&#x30BA;&#x30EB;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BB;&#x30EB;&#x8907;&#x5408;&#x57F9;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x52A0;&#x5DE5;&#x306A;&#x3057;&#x3092;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x3001;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x904A;&#x8D70;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; (cxcl 12) &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x751F;&#x6210;&#x306E;&#x6C34;&#x6027;&#x4E8C;&#x76F8;&#x9664;&#x5916;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x97F3;&#x97FF;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x5410;&#x51FA;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x591A;&#x91CD;&#x30BB;&#x30EB;&#x8907;&#x5408;&#x3002;

Cocultures &#xC140;&#xC758; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4; &#xB4E4;&#xC758; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; micropatterning &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC874;&#xC7AC;, &#xC138;&#xD3EC; micropatterns&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC885;&#xC885; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD558; &#xACE0; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559; &#xC6A9;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC801;&#xC751; &#xD558;&#xAE30;&#xAC00;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xD569; &#xC74C;&#xD5A5; &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xB41C; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC758; cocultures&#xB97C; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD558;&#xB294; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD; &#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC81C;&#xC678;. &#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; dextran &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADE0;&#xC77C; &#xD55C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xBD88;&#xC5F0;&#xC18D; &#xBC29;&#xC6B8; &#xCD94;&#xCD9C; &#xC74C;&#xD5A5; &#xC9D1;&#xC911;&#xB41C; &#xBC29;&#xC0AC; &#xC555;&#xB825;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC29;&#xC6B8;&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB294; &#xD384;&#xC2A4;, &#xAE30;&#xAC04;, &#xC9C4;&#xD3ED; &#xB4F1; &#xCD08;&#xC74C;&#xD30C;&#xC758; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xC870;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAEBC;&#xB0B8;&#xB41C; dextran &#xBC29;&#xC6B8; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xD310; &#xCEF4;&#xD4E8;&#xD130; &#xC81C;&#xC5B4; 3D &#xD3EC;&#xC9C0;&#xC154;&#xB2DD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBBF8;&#xB9AC; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC870;&#xC791;&#xC5D0; &#xCEA1;&#xCC98;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3F4; &#xB9AC; &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C; &#xAE00;&#xB9AC;&#xCF5C; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xCD94;&#xAC00; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC140;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xD328;&#xD134; &#xC8FC;&#xC704; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC885;&#xB958;&#xB97C; &#xC785;&#xAE08; &#xC218; &#xC788;&#xB294; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBB38;&#xD654; &#xC811;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xCD94;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xC12C; &#xB610;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC140; &#xC885;&#xB958;&#xC640; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD328;&#xD134; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC758; &#xC870;&#xD569;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC0D8;&#xD50C; &#xAD50;&#xCC28; &#xC624;&#xC5FC;&#xC744; &#xD53C;&#xD558; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xBB34;&#xB8CC;, &#xB178;&#xC990; &#xC5C6;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xC1A1; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC81C;&#xC791; &#xC5C6;&#xC774; &#xC140; cocultures &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC740; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xBCC0; cocultured &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84; &#xBE44; &#xD558;&#xB294; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; (CXCL12)&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xB2E4;&#xC911;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC138;&#xB300; &#xC74C;&#xD5A5; &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8; &#xBC29;&#xCD9C; &#xC218;&#xC131; 2 &#xB2E8;&#xACC4; &#xC81C;&#xC678; &#xD328;&#xD130; &#xB2DD; &#xB4A4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; cocultures.

El desarrollo de herramientas para la creaci&oacute;n de patrones cocultures de c&eacute;lulas es un inter&eacute;s fundamental entre la c&eacute;lula bi&oacute;logos e ingenieros de tejido. Aunque existe una variedad de sistemas para las c&eacute;lulas micropatterning, los m&eacute;todos utilizados para generar c&eacute;lulas micropatrones son a menudo complicado y dif&iacute;cil de adaptar para prop&oacute;sitos de ingenier&iacute;a de tejidos. Este estudio combina la eyecci&oacute;n de ac&uacute;stica de la gotita y exclusi&oacute;n del sistema de dos fases acuosas patrones para introducir un m&eacute;todo para patrones cocultures de c&eacute;lulas en matrices multiplexadas. Este nuevo m&eacute;todo utiliza presi&oacute;n de radiaci&oacute;n ac&uacute;stica focalizada para expulsar discretas gotas de tama&ntilde;o uniforme de la superficie de una soluci&oacute;n de dextrano que contiene las c&eacute;lulas. El tama&ntilde;o de las gotitas se controla mediante el ajuste de par&aacute;metros de ultrasonido, tales como el pulso, la duraci&oacute;n y la amplitud. Las gotitas de dextrano expulsado son capturadas en un sustrato de cultivo celular que es manipulado por un sistema de posicionamiento 3D computarizado seg&uacute;n patrones predise&ntilde;ados. Soluci&oacute;n de polietilenglicol, que contiene un tipo de c&eacute;lula adicionales se a&ntilde;ade a la placa de cultivo para producir un sistema bif&aacute;sico capaz de depositar los diferentes tipos de c&eacute;lulas en el patr&oacute;n inicial de las c&eacute;lulas. Demostramos que nuestro m&eacute;todo puede producir patrones de islas o l&iacute;neas con dos o m&aacute;s tipos de c&eacute;lulas. Adem&aacute;s, demostramos que los patrones pueden ser multiplexados para estudios que incluyeron combinaciones de m&uacute;ltiples tipos de c&eacute;lulas. Este m&eacute;todo ofrece una herramienta para transferir las muestras que contienen c&eacute;lulas de una manera sin contacto, sin boquilla, evitando la contaminaci&oacute;n de la muestra. Puede ser utilizado para patr&oacute;n celular cocultures sin complicados fabricaci&oacute;n de sustratos de cultivo. Estas capacidades se utilizaron para examinar la respuesta de las c&eacute;lulas cancerosas a la presencia de un ligando (CXCL12) secretada de cerco de c&eacute;lulas de morfolog&iacute;a.

Generaci&oacute;n r&aacute;pida de c&eacute;lulas multiplexados cocultures usando la eyecci&oacute;n de la gotita ac&uacute;stica seguida patrones de exclusi&oacute;n de dos fases acuosas.

Deficiencias en la degradaci&oacute;n de las prote&iacute;nas y la funci&oacute;n proteol&iacute;tica dentro de las neuronas est&aacute;n vinculadas a una serie de enfermedades neurodegenerativas y trastornos del desarrollo. Culturas compartimentadas de las neuronas perif&eacute;ricas se utilizaron para investigar las propiedades y la abundancia relativa de la maquinaria proteol&iacute;tica en los axones y cuerpos celulares de las neuronas simp&aacute;ticas y sensoriales. Immunoblotting de prote&iacute;nas axonal demostr&oacute; que LAMP2 LC3 y PSMA2 eran abundantes en axones, sugiriendo que los lisosomas, autophagosomes y proteasomas fueron situados en axones. Curiosamente, la expresi&oacute;n de prote&iacute;nas asociadas con lisosomas y proteasomas fueron alza selectivamente en axones por el est&iacute;mulo de los axones distales de neuronas simp&aacute;ticas, lo que sugiere que el crecimiento axonal de NGF y mantenimiento requiere una facturaci&oacute;n de prote&iacute;na local. La regulaci&oacute;n de la abundancia de proteasomas y lisosomas en axones por NGF proporciona un v&iacute;nculo entre la degradaci&oacute;n de las prote&iacute;nas y el estado tr&oacute;fico de las neuronas perif&eacute;ricas. Inhibici&oacute;n de los proteasomas situado en axones dio lugar a una acumulaci&oacute;n de prote&iacute;nas ubiquitinated en estos axones. Por el contrario, inhibici&oacute;n del lisosoma en axones no dio lugar a una acumulaci&oacute;n de prote&iacute;nas ubiquitinated o el receptor de transferrina, una prote&iacute;na transmembrana degradado por lisosomas. Curiosamente, los lisosomas fueron transportados tanto retrogradely y anterogradely, por lo que es probable que ubiquitinated prote&iacute;nas que normalmente est&aacute;n destinados a la degradaci&oacute;n por lisosomas en axones puede transportarse a los cuerpos celulares de degradaci&oacute;n. En Resumen, degradaci&oacute;n proteasomal se produce localmente, mientras que las prote&iacute;nas degradadas por lisosomas pueden probablemente tampoco ser degradadas localmente en axones o transportadas a los cuerpos celulares de degradaci&oacute;n.

Expresi&oacute;n de la maquinaria de degradaci&oacute;n de prote&iacute;na axonal en neuronas simp&aacute;ticas est&aacute; regulada por el factor de crecimiento nervioso.

&#x5728;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5185;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x548C;&#x53D1;&#x80B2;&#x969C;&#x788D;&#x3002;&#x5206;&#x95E8;&#x522B;&#x7C7B;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x5916;&#x56F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E30;&#x5EA6;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x673A;&#x68B0;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x548C;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x611F;&#x5B98;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x86CB;&#x767D;&#x514D;&#x75AB;&#x5370;&#x8FF9;&#x8868;&#x660E; LAMP2&#x3001; LC3 &#x548C; PSMA2 &#x662F;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x3001; &#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x3001; autophagosomes &#x548C; proteasomes &#x4F4D;&#x4E8E;&#x8F74;&#x7A81;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C; proteasomes &#x662F;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x523A;&#x6FC0;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x90A3;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x957F;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x8F74;&#x7A81;&#x8F74;&#x7A81;&#x589E;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x9700;&#x8981;&#x672C;&#x5730;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5468;&#x8F6C;&#x3002;Proteasomes &#x548C;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x4E30;&#x76C8;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x63D0;&#x4F9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x964D;&#x89E3;&#x548C;&#x5468;&#x8FB9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8425;&#x517B;&#x72B6;&#x6001;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x3002;Proteasomes &#x4F4D;&#x4E8E;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x4E2D;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x6291;&#x5236;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x4E0D;&#x662F;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6216;&#x8F6C;&#x94C1;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x8DE8;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x662F;&#x9006;&#x884C;&#x8FD0;&#x90FD;&#x548C; anterogradely&#xFF0C;&#x5F88;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x90A3;&#x901A;&#x5E38;&#x6CE8;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x9000;&#x5316;&#x7684;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4E2D;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6CDB;&#x7D20;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x8FD0;&#x9001;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x6784;&#x4E3A;&#x9000;&#x5316;&#x3002;&#x5728;&#x6458;&#x8981;&#xFF0C;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x53D1;&#x751F;&#x672C;&#x5730;&#xFF0C;&#x800C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6700;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E5F;&#x88AB;&#x964D;&#x7EA7;&#x672C;&#x5730;&#x5728;&#x8F74;&#x7A81;&#x6216;&#x88AB;&#x8FD0;&#x9001;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9000;&#x5316;&#x7684;&#x673A;&#x6784;&#x3002;

&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x86CB;&#x767D;&#x964D;&#x89E3;&#x673A;&#x68B0;&#x7684;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x88AB;&#x53D7;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;

Deficiencies in protein degradation and proteolytic function within neurons are linked to a number of neurodegenerative diseases and developmental disorders. Compartmentalized cultures of peripheral neurons were used to investigate the properties and relative abundance of the proteolytic machinery in the axons and cell bodies of sympathetic and sensory neurons. Immunoblotting of axonal proteins demonstrated that LAMP2, LC3, and PSMA2 were abundant in axons, suggesting that lysosomes, autophagosomes and proteasomes were located in axons. Interestingly, the expression of proteins associated with lysosomes and proteasomes were upregulated selectively in axons by NGF stimulation of the distal axons of sympathetic neurons, suggesting that axonal growth and maintenance requires local protein turnover. The regulation of the abundance of both proteasomes and lysosomes in axons by NGF provides a link between protein degradation and the trophic status of peripheral neurons. Inhibition of proteasomes located in axons resulted in an accumulation of ubiquitinated proteins in these axons. In contrast, lysosome inhibition in axons did not result in an accumulation of ubiquitinated proteins or the transferrin receptor, a transmembrane protein degraded by lysosomes. Interestingly, lysosomes were transported both retrogradely and anterogradely, so it is likely that ubiquitinated proteins that are normally destined for degradation by lysosomes in axons can be transported to the cell bodies for degradation. In summary, proteasomal degradation occurs locally, whereas proteins degraded by lysosomes can most likely either be degraded locally in axons or be transported to cell bodies for degradation.

Expression of axonal protein degradation machinery in sympathetic neurons is regulated by nerve growth factor.

Lacunes dans la d&eacute;gradation des prot&eacute;ines et fonction prot&eacute;olytique dans les neurones sont li&eacute;s &agrave; un certain nombre de maladies neurod&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives et les troubles du d&eacute;veloppement. Cultures compartiment&eacute;es des neurones p&eacute;riph&eacute;riques ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour &eacute;tudier les propri&eacute;t&eacute;s et l&#39;abondance relative de la machinerie prot&eacute;olytique dans les axones et les corps cellulaires des neurones sympathiques et sensorielles. Immunobuvardage de prot&eacute;ines axonales d&eacute;montr&eacute; que LAMP2 LC3 et PSMA2 &eacute;taient abondants dans les axones, sugg&eacute;rant que les lysosomes, autophagosomes et prot&eacute;asomes &eacute;taient situ&eacute;es dans les axones. Fait int&eacute;ressant, l&#39;expression de prot&eacute;ines associ&eacute;es aux lysosomes et prot&eacute;asomes sont surexprim&eacute;s s&eacute;lectivement dans les axones par la stimulation des axones des neurones sympathiques, ce qui sugg&egrave;re que la croissance axonale distales NGF et entretien n&eacute;cessite le renouvellement des prot&eacute;ines locales. Le r&egrave;glement de l&#39;abondance des prot&eacute;asomes et des lysosomes dans les axones de NGF fournit un lien entre la d&eacute;gradation des prot&eacute;ines et de l&#39;&eacute;tat trophique des neurones p&eacute;riph&eacute;riques. Inhibition des prot&eacute;asomes situ&eacute; dans les axones a entra&icirc;n&eacute; une accumulation de prot&eacute;ines ubiquitin&eacute;es dans ces axones. En revanche, l&#39;inhibition lysosome dans les axones ne r&eacute;sulte pas en une accumulation de prot&eacute;ines ubiquitin&eacute;es ou le r&eacute;cepteur de la transferrine, une prot&eacute;ine transmembranaire d&eacute;grad&eacute;e par les lysosomes. Fait int&eacute;ressant, les lysosomes sont transport&eacute;s tous deux marqu&eacute;s et axonales, donc il est probable que les prot&eacute;ines ubiquitin&eacute;es normalement destin&eacute;s &agrave; la d&eacute;gradation par les lysosomes dans les axones peuvent &ecirc;tre transport&eacute;s aux organes cellulaires pour d&eacute;gradation. En r&eacute;sum&eacute;, d&eacute;gradation de l&#39;activit&eacute; se produit localement, tandis que les prot&eacute;ines d&eacute;grad&eacute;es par les lysosomes peuvent tr&egrave;s probablement non plus &ecirc;tre d&eacute;grad&eacute;es localement dans les axones ou &ecirc;tre transport&eacute;s vers les corps cellulaires pour la d&eacute;gradation.

Expression des machines de d&eacute;gradation de prot&eacute;ine axonale dans des neurones sympathiques est r&eacute;gul&eacute;e par le facteur de croissance nerveuse.

Carenze nella degradazione delle proteine e la funzione proteolitici all&#39;interno dei neuroni sono collegate a un certo numero di malattie neurodegenerative e disturbi dello sviluppo. Compartimenti culture di neuroni periferici sono state utilizzate per studiare le propriet&agrave; e l&#39;abbondanza relativa del macchinario proteolitico in assoni e corpi cellulari dei neuroni simpatici e sensoriali. Immunoblotting di axonal proteine hanno dimostrato che LAMP2, LC3 e PSMA2 erano abbondanti in assoni, suggerendo che i lisosomi, autophagosomes e proteasomi erano situati in assoni. &Egrave; interessante notare che, l&#39;espressione delle proteine associate con lisosomi e proteasomi sono sovraregolati selettivamente in assoni di stimolazione NGF di distale assoni dei neuroni simpatici, suggerendo che la crescita assonale e manutenzione richiede fatturato locale della proteina. Il regolamento dell&#39;abbondanza di entrambi i proteasomi e lisosomi in assoni di NGF fornisce un collegamento tra la degradazione delle proteine e lo stato trofico dei neuroni periferici. Inibizione dei proteasomi situati in assoni ha provocato un accumulo di proteine ubiquitarie in questi assoni. Al contrario, inibizione lisosoma in assoni non si traducesse in un accumulo di proteine ubiquitarie o il recettore della transferrina, una proteina transmembrana degradato dai lisosomi. &Egrave; interessante notare, lisosomi furono trasportati entrambi retrogradely e anterogradely, quindi &egrave; probabile che proteine ubiquitarie che normalmente sono destinati per la degradazione di lisosomi in assoni possono essere trasportati agli organi per la degradazione cellulare. In sintesi, degradazione proteosomale si verifica localmente, mentre le proteine degradate da lisosomi possono molto probabilmente neanche essere degradate localmente in assoni o essere trasportate ai corpi cellulari per la degradazione.

Espressione di macchinari degradazione della proteina assonale in neuroni simpatici &egrave; regolata dal fattore di crescita nervosa.

&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x86CB;&#x767D;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x3084;&#x767A;&#x9054;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x6570;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672B;&#x68A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x533A;&#x753B;&#x5316;&#x57F9;&#x990A;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x3068;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x611F;&#x899A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; LC3&#x3001;LAMP2&#x3001;PSMA2&#x3001;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B4;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; NGF &#x306F;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3001;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x9060;&#x4F4D;&#x8EF8;&#x7D22;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9078;&#x629E;&#x3068;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x8EE2;&#x63DB;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; NGF &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5206;&#x89E3;&#x3068;&#x672B;&#x68A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x6804;&#x990A;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x6291;&#x5236;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30EA;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52A3;&#x5316;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x578B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x304C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3044;&#x305F;&#x4E21;&#x65B9;&#x9006;&#x884C;&#x6027;&#x8EF8;&#x7D22;&#x8F38;&#x9001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3089;&#x3057;&#x3044;&#x306E;&#x3067; anterogradely &#x3092;&#x8F38;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x304C;&#x6700;&#x3082;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306B;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x306E;&#x52A3;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8F38;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x8981;&#x7D04;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x308B;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x304C;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x6A5F;&#x68B0;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558; &#xB418; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC548;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xD574; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC7A5;&#xC560;&#xC758; &#xBC88;&#xD638;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xD55C;&#xC815;&#xB41C; &#xBB38;&#xD654; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xBD84;&#xD574; &#xAE30;&#xACC4; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xD48D;&#xC694;&#xC640; &#xAD50;&#xAC10; &#xBC0F; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC140; &#xC2DC;&#xCCB4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Axonal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Immunoblotting LAMP2, LC3, &#xBC0F; psma2&#xB294; &#xCD95; &#xC0AD;, &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;, autophagosomes &#xBC0F; proteasomes &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DD;&#xC774; proteasomes&#xC740; NGF axonal &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xB9D0; &#xCD08; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC758; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; upregulated &#xBC0F; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC; &#xD544;&#xC694; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;. Proteasomes &#xACE0; NGF&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xC758; &#xD48D;&#xC694;&#xB85C; &#xC6C0;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558;&#xC640; &#xB9D0; &#xCD08; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xC601;&#xC591; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; proteasomes&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; axons&#xC5D0;&#xC11C; ubiquitinated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xCD95; &#xC0AD;&#xC758; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xC800;&#xD574; ubiquitinated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xB610;&#xB294; &#xCC98;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD558; &#xB418;&#xC9C0;&#xB294; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xC740; &#xBAA8;&#xB450; retrogradely &#xC774;&#xC1A1; &#xBC0F; anterogradely, &#xADF8;&#xB798;&#xC11C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC544;&#xB9C8; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B4;&#xBA85; &#xADF8; ubiquitinated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; &#xC218;&#xC1A1; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC694;&#xC57D; &#xD558;&#xBA74;, proteasomal &#xC800;&#xD558; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xB85C;&#xCEEC;&#xB85C;, &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD0C0;&#xB77D; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xB3C4; &#xC800;&#xD558; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB85C;&#xCEEC; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC5D0; &#xB610;&#xB294; &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; &#xC774;&#xC1A1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD45C;&#xD604;&#xC758; axonal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC800;&#xD558; &#xAE30;&#xACC4; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB41C;&#xB2E4;.

&#x4F20;&#x7EDF;&#x6587;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5F80;&#x5F80;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x53D7;&#x5230;&#x9650;&#x5236;&#x3002;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53EF;&#x4EE5;&#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C40;&#x9650;&#x6027;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7531;&#x7528;&#x6237;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x65F6;&#x7A7A;&#x63D0;&#x793A;&#x63D0;&#x793A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F7F;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x80FD;&#x591F;&#x8C03;&#x8282;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x5316;&#x53CA;&#x673A;&#x68B0;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x901A;&#x8FC7;&#x5FAE;&#x578B;&#x9635;&#x5217;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x80DE;&#x5916;&#x6750;&#x6599;&#x3002;&#x4ECE;&#x6839;&#x672C;&#x4E0A;&#x8BB2;&#xFF0C;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x5DE5;&#x5177;&#x51CF;&#x5C11;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x73AF;&#x5883;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9F9B;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x548C;&#x52A8;&#x6001;&#x529F;&#x80FD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5DEE;&#x8DDD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x6587;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x96C6;&#x6210;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x5FAE;&#x91CF;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5730;&#x4F4D;&#x4E0E;&#x5065;&#x5EB7;&#x3002;&#x63A7;&#x5236;&#x751F;&#x5316;&#x53CA;&#x673A;&#x68B0;&#x8F93;&#x5165;&#x5230;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8FC5;&#x901F;&#x548C;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x5206;&#x6790;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x8F93;&#x51FA;&#x4ECE;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5C06;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4E86;&#x89E3;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E2E;&#x52A9;&#x5C06;&#x5176;&#x8F6C;&#x5316;&#x4E3A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x68C0;&#x8BA8;&#x5BF9;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5168;&#x9762; insignt&#x3002;

&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF1A; &#x65B0;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x7BB1;&#x7684;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Conventional culture systems are often limited in their ability to regulate the growth and differentiation of pluripotent stem cells. Microfluidic systems can overcome some of these limitations by providing defined growth conditions with user-controlled spatiotemporal cues. Microfluidic systems allow researchers to modulate pluripotent stem cell renewal and differentiation through biochemical and mechanical stimulation, as well as through microscale patterning and organization of cells and extracellular materials. Essentially, microfluidic tools are reducing the gap between in vitro cell culture environments and the complex and dynamic features of the in vivo stem cell niche. These microfluidic culture systems can also be integrated with microanalytical tools to assess the health and molecular status of pluripotent stem cells. The ability to control biochemical and mechanical input to cells, as well as rapidly and efficiently analyze the biological output from cells, will further our understanding of stem cells and help translate them into clinical use. This review provides a comprehensive insignt into the implications of microfluidics on pluripotent stem cell research.

Microfluidic systems: a new toolbox for pluripotent stem cells.

Syst&egrave;mes de culture conventionnels sont souvent limit&eacute;s dans leur capacit&eacute; &agrave; r&eacute;guler la croissance et la diff&eacute;renciation des cellules souches pluripotentes. Syst&egrave;mes microfluidiques peuvent surmonter certaines de ces limitations, en offrant des conditions de croissance contr&ocirc;l&eacute;e par l&#39;utilisateur des rep&egrave;res spatio-temporels. Les syst&egrave;mes microfluidiques permettent aux chercheurs de moduler le renouvellement des cellules souches pluripotentes et diff&eacute;renciation par stimulation m&eacute;canique et biochimique, ainsi que par le biais de micro-&eacute;chelle structuration et Organisation des cellules et mat&eacute;riaux extracellulaires. Essentiellement, microfluidique outils r&eacute;duisent l&#39;&eacute;cart entre les milieux de culture cellulaire in vitro et les fonctionnalit&eacute;s complexes et dynamiques de la niche in vivo de cellules souches. Ces syst&egrave;mes microfluidiques peuvent &eacute;galement &ecirc;tre int&eacute;gr&eacute;s avec les outils micro-analytique pour &eacute;valuer la situation sanitaire et mol&eacute;culaire des cellules souches pluripotentes. La capacit&eacute; de contr&ocirc;ler entr&eacute;e m&eacute;canique et biochimique aux cellules, mais aussi efficacement et rapidement analyser les biologique sortie de cellules, va approfondir notre compr&eacute;hension des cellules souches et aider &agrave; les traduire en pratique clinique. Ce bilan constitue une insignt compl&egrave;te les implications de la microfluidique sur la recherche sur les cellules souches pluripotentes.

Les syst&egrave;mes microfluidiques : une nouvelle bo&icirc;te &agrave; outils pour les cellules souches pluripotentes.

Sistemi di coltura convenzionale sono spesso limitati nella loro capacit&agrave; di regolare la crescita e la differenziazione delle cellule staminali pluripotenti. Sistemi microfluidici possono superare alcune di queste limitazioni, fornendo condizioni di crescita definito con stecche spatiotemporal controllate dall&#39;utente. Sistemi microfluidici permettono ai ricercatori di modulare il rinnovamento delle cellule staminali pluripotenti e differenziazione attraverso stimolazione biochimica e meccanica, nonch&eacute; attraverso patterning Microscala e organizzazione delle cellule e dei materiali extracellulari. Essenzialmente, microfluidica strumenti stanno riducendo il gap tra ambienti di coltura cellulare in vitro e le caratteristiche complesse e dinamiche di nicchia in vivo delle cellule staminali. Questi sistemi di coltura di microfluidica possono anche essere integrati con microanalitici strumenti per valutare l&#39;integrit&agrave; e lo stato molecolare delle cellule staminali pluripotenti. La capacit&agrave; di ingresso biochimica e meccanica alle cellule di controllo, cos&igrave; come rapidamente ed efficientemente analizzare il biologico in uscita dalle cellule, sar&agrave; ulteriormente la nostra comprensione delle cellule staminali e aiutare a tradurli in uso clinico. Questa recensione fornisce una completa insignt nelle implicazioni di microfluidics sulla ricerca sulle cellule staminali pluripotenti.

Sistemi microfluidici: una serie di strumenti nuovi per le cellule staminali pluripotenti.

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Sistemas de cultivo convencionales a menudo est&aacute;n limitados en su capacidad para regular el crecimiento y la diferenciaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre pluripotentes. Sistemas microflu&iacute;dicos pueden superar algunas de estas limitaciones proporcionando condiciones de crecimiento definido con se&ntilde;ales spatiotemporal controlados por el usuario. Sistemas microflu&iacute;dicos permiten a los investigadores modular la renovaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre pluripotentes y diferenciaci&oacute;n a trav&eacute;s de la estimulaci&oacute;n mec&aacute;nica y bioqu&iacute;mica, as&iacute; como a trav&eacute;s de patrones de microescala y organizaci&oacute;n de c&eacute;lulas y materiales extracelulares. Esencialmente, herramientas de microfluidos est&aacute;n reduciendo la brecha entre ambientes de cultivo celular in vitro y las caracter&iacute;sticas complejas y din&aacute;micas del nicho de c&eacute;lulas madre in vivo. Estos sistemas de cultivo de microfluidos tambi&eacute;n pueden ser integrados con microanal&iacute;ticos herramientas para evaluar la salud y el estado molecular de c&eacute;lulas madre pluripotentes. La capacidad de controlar entrada bioqu&iacute;mica y mec&aacute;nica a las c&eacute;lulas, as&iacute; como r&aacute;pidamente y eficientemente analizar el biol&oacute;gico de la salida de las c&eacute;lulas, mejorar nuestra comprensi&oacute;n de las c&eacute;lulas madre y ayudar a traducirlos en uso cl&iacute;nico. Esta revisi&oacute;n proporciona un insignt comprensivo en las implicaciones de la microflu&iacute;dica en investigaci&oacute;n de c&eacute;lulas madre pluripotentes.

Article	Year
Functionalized hydrogel surfaces for the patterning of multiple biomolecules. Journal of biomedical materials research. Part A\| PubMed ID: 17120223	2007
Directed cell growth on protein-functionalized hydrogel surfaces. Journal of neuroscience methods\| PubMed ID: 17368788	2007
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An in vitro system for modeling brain reactive responses and changes in neuroprosthetic device impedance. Conference proceedings : ... Annual International Conference of the IEEE Engineering in Medicine and Biology Society. IEEE Engineering in Medicine and Biology Society. Conference\| PubMed ID: 19965268	2009
Effects of glial cells on electrode impedance recorded from neuralprosthetic devices in vitro. Annals of biomedical engineering\| PubMed ID: 20336824	2010
Precisely targeted delivery of cells and biomolecules within microchannels using aqueous two-phase systems. Biomedical microdevices\| PubMed ID: 21769637	2011
Rounded multi-level microchannels with orifices made in one exposure enable aqueous two-phase system droplet microfluidics. Lab on a chip\| PubMed ID: 21892481	2011
Rapid generation of multiplexed cell cocultures using acoustic droplet ejection followed by aqueous two-phase exclusion patterning. Tissue engineering. Part C, Methods\| PubMed ID: 22356298	2012
Expression of axonal protein degradation machinery in sympathetic neurons is regulated by nerve growth factor. Journal of neuroscience research\| PubMed ID: 22411744	2012
Microfluidic systems: a new toolbox for pluripotent stem cells. Biotechnology journal\| PubMed ID: 23125055	2013

John P. Frampton

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