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Assessing Neurodegenerative Phenotypes in <em>Drosophila</em> Dopaminergic Neurons by Climbing Assays and Whole Brain Immunostaining

Drosophila melanogaster is a valuable model organism to study aging and pathological degenerative processes in the nervous system. The advantages of the ...

University of Rochester Medical Center 

The reduction kinetics of the mutants K354M and D124N of the Paracoccus denitrificans cytochrome oxidase (heme aa(3)) by ruthenium hexamine was investigated by stopped-flow spectrophotometry in the absence/presence of NO. Quick heme a reduction precedes the biphasic heme a(3) reduction, which is extremely slow in the K354M mutant (k(1) = 0.09 +/- 0.01 s(-1); k(2) = 0.005 +/- 0.001 s(-1)) but much faster in the D124N aa(3) (k(1) = 21 +/- 6 s(-1); k(2) = 2.2 +/- 0.5 s(-1)). NO causes a very large increase (>100-fold) in the rate constant of heme a(3) reduction in the K354M mutant but only a approximately 5-fold increase in the D124N mutant. The K354M enzyme reacts rapidly with O(2) when fully reduced but is essentially inactive in turnover; thus, it was proposed that impaired reduction of the active site is the cause of activity loss. Since at saturating [NO], heme a(3) reduction is approximately 100-fold faster than the extremely low turnover rate, we conclude that, contrary to O(2), NO can react not only with the two-electron but also with the single-electron reduced active site. This mechanism would account for the efficient inhibition of cytochrome oxidase activity by NO in the wild-type enzyme, both from P. denitrificans and from beef heart. Results also suggest that the H(+)-conducting K pathway, but not the D pathway, controls the kinetics of the single-electron reduction of the active site.

Nitric oxide reacts with the single-electron reduced active site of cytochrome c oxidase.

La cin&eacute;tique de r&eacute;duction des mutants K354M et D124N de la Paracoccus denitrificans cytochrome oxydase (h&egrave;me aa(3)) par hexamine de ruth&eacute;nium a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e par spectrophotom&eacute;trie &agrave; flux stopp&eacute; en absence/pr&eacute;sence de no H&egrave;me rapide une r&eacute;duction pr&eacute;c&egrave;de la r&eacute;duction d&#39;a 3 biphasique h&egrave;me, qui est extr&ecirc;mement lente chez le mutant K354M (k(1) = 0,09 +/-0,01 s(-1); k = 0,005 +/-0,001 s(-1)) mais beaucoup plus rapide dans le aa(3) de D124N (k(1) = 21 +/-6 s(-1); k = 2.2 +/-0,5 s(-1)). NE provoque une tr&egrave;s forte augmentation (&gt; 100 fois) dans la constante de vitesse de r&eacute;duction a 3 h&egrave;me chez le mutant K354M mais seulement une augmentation environ 5 fois chez le mutant D124N. L&#39;enzyme K354M r&eacute;agit rapidement avec o (2) quand enti&egrave;rement r&eacute;duite mais est essentiellement inactif dans le chiffre d&#39;affaires ; Il a donc &eacute;t&eacute; propos&eacute; que r&eacute;duction des visuels du site actif est la cause de la perte d&#39;activit&eacute;. &Eacute;tant donn&eacute; que saturante [non], h&egrave;me a 3 r&eacute;duction est environ 100 fois plus vite que le taux de roulement extr&ecirc;mement faible, nous concluons que, contrairement &agrave; o (2), ne peuvent r&eacute;agir non seulement avec les deux &eacute;lectrons mais aussi avec l&#39;&eacute;lectron r&eacute;duits site actif. Ce m&eacute;canisme expliquerait l&#39;inhibition efficace de l&#39;activit&eacute; de la cytochrome oxydase par non dans l&#39;enzyme de type sauvage, de P. denitrificans et de coeur de boeuf. R&eacute;sultats sugg&egrave;rent aussi que le H (+)-voie K, mais pas la voie D, contr&ocirc;le la cin&eacute;tique de l&#39;&eacute;lectron de r&eacute;duction du site actif.

Monoxyde d&#39;azote r&eacute;agit avec le site actif r&eacute;duit mono-&eacute;lectronique de cytochrome c oxydase.

La cinetica di riduzione dei mutanti K354M e D124N della Paracoccus denitrificans citocromo ossidasi (EME aa(3)) di rutenio esametilentetrammina &egrave; stata studiata mediante spettrofotometria di flusso interrotto in assenza/presenza di n. EME rapida riduzione precede la riduzione del quanto bifasico eme, che &egrave; estremamente lenta nel mutante K354M (k(1) = 0,09 + /-0.01 s(-1); k(2) = 0,005 + /-0.001 s(-1)) ma molto pi&ugrave; veloce in aa(3) la D124N (k(1) = 21 + 6 s(-1); k(2) = 2,2 + /-0,5 s(-1)). NON provoca un aumento molto grande (&amp;gt; 100 volte) nella costante tasso di riduzione dell&#39;eme quanto il mutante K354M ma solo un aumento di circa 5 volte in mutante D124N. L&#39;enzima K354M reagisce rapidamente con l&#39;apparato quando completamente ridotto ma &egrave; essenzialmente inattivi nel fatturato; cos&igrave;, &egrave; stato proposto che ridotta riduzione del sito attivo &egrave; la causa della perdita di attivit&agrave;. Poich&eacute; a saturare [NO], EME quanto la riduzione &egrave; circa 100 volte pi&ugrave; veloce rispetto al tasso di rotazione estremamente bassa, possiamo concludere che, contrariamente a quanto apparato, non pu&ograve; reagire non solo con i due elettroni ma anche con il singolo elettrone ridotto sito attivo. Questo meccanismo spiegherebbe l&#39;inibizione efficace dell&#39;attivit&agrave; citocromo-ossidasi non l&#39;enzima wild-type sia da p. denitrificans cuore di manzo. Risultati suggeriscono anche che la H (+)-conducendo percorso K, ma non il percorso D, controlla la cinetica della riduzione singolo elettrone del sito attivo.

L&#39;ossido nitrico reagisce con il sito attivo ridotto singolo elettrone del citocromo c ossidasi.

La cin&eacute;tica de la reducci&oacute;n de los mutantes K354M y D124N de la Paracoccus denitrificans citocromo oxidasa (aa(3)) heme por rutenio hexamina fue investigado por espectrofotometr&iacute;a de flujo detenido en ausencia/presencia de NO. Heme r&aacute;pido una reducci&oacute;n precede a la reducci&oacute;n de a(3) bif&aacute;sico heme, que es extremadamente lenta en el mutante de K354M (protrombina-complejo = 0. 09 + /-0.01 s(-1); k(2) = 0. 005 + /-0.001 s(-1)) pero mucho m&aacute;s r&aacute;pido en el aa(3) de D124N (protrombina-complejo = 21 +/-6 s(-1); k(2) = 2.2 +/-0,5 s(-1)). NO causa un aumento muy grande (&gt; centesimal) en la constante de la tasa de reducci&oacute;n de a(3) de heme en el mutante K354M pero s&oacute;lo un aumento de aproximadamente cinco veces en el mutante de D124N. La enzima K354M reacciona r&aacute;pidamente con O(2) cuando totalmente reducido pero es esencialmente inactivo en el volumen de ventas; as&iacute;, se propuso que la reducci&oacute;n deteriorada del sitio activo es la causa de la p&eacute;rdida de actividad. Puesto que al saturar [NO], reducci&oacute;n de a(3) heme es aproximadamente centesimal m&aacute;s r&aacute;pido que la tasa de rotaci&oacute;n extremadamente bajo, concluimos que, contrario a O(2), NO puede reaccionar no s&oacute;lo con los dos electrones pero tambi&eacute;n con el electr&oacute;n solo reducido sitio activo. Este mecanismo explicar&iacute;a la eficaz inhibici&oacute;n de la actividad de la citocromo oxidasa no en la enzima de tipo salvaje, de p. denitrificans y de coraz&oacute;n de res. Los resultados tambi&eacute;n sugieren que la H (+)-realizaci&oacute;n de v&iacute;a K, pero no el sendero D, controla la cin&eacute;tica de la reducci&oacute;n del &uacute;nico electr&oacute;n del sitio activo.

&Oacute;xido n&iacute;trico reacciona con el sitio activo reducido solo electrones del citocromo c oxidasa.

The effect of bound Cl- on the redox-linked protonation of soluble beef heart cytochrome c oxidase (CcOX) has been investigated at pH 7.3-7.5 by multiwavelength stopped-flow spectroscopy, using phenol red as the pH indicator in an unbuffered medium. Reduction by Ru-II hexamine of the Cl-bound enzyme is associated with an overall apparent uptake of 1.40 +/- 0.21 H+/aa3, whereas 2.28 +/- 0.36 H+/aa3 is taken upon reduction of the Cl-free enzyme. Bound Cl- has no effect on the extent of H+ uptake coupled to heme a reduction (0.59 +/- 0.06 H+/aa3), but significantly decreases (by approximately 0.9 H+/aa3) the apparent stoichiometry of H+ uptake coupled to heme a3-Cu(B) reduction, by eliminating the net H+ uptake linked to Cu(B) reduction. To account for these results, we propose that, after the transfer of the first electron to the active site, reduction of Cu(B) is associated with Cl- dissociation, addition of a H+, and diffusion into the bulk (with subsequent dissociation) of HCl. In the physiologically competent Cl--free enzyme, an OH- likely bound to oxidized Cu(B) is protonated upon arrival of the first electron, and dissociates as H2O. The relevance of this finding to the understanding of the enzyme mechanism is discussed.

Redox-linked protonation of cytochrome c oxidase: the effect of chloride bound to CuB.

A &eacute;tudi&eacute; l&#39;effet de liaison Cl - sur la protonation redox-li&eacute; de boeuf soluble coeur du cytochrome c oxydase (CcOX) &agrave; un pH de 7,3 &agrave; 7,5 par spectroscopie de flux stopp&eacute; longueurs d&#39;onde multiples, &agrave; l&#39;aide de rouge de ph&eacute;nol comme l&#39;indicateur de pH dans un milieu sans tampon. R&eacute;duction par Ru-II hexamine de l&#39;enzyme li&eacute;e aux Cl est associ&eacute;e &agrave; une absorption apparente globale de 1,40 +/-0,21 H + / aa3, consid&eacute;rant que 2,28 +/-0,36 H + / aa3 est prise lors de la r&eacute;duction de l&#39;enzyme libre-Cl. Li&eacute; Cl-n&#39;a aucun effet sur le degr&eacute; d&#39;absorption H + coupl&eacute; &agrave; l&#39;h&egrave;me, une r&eacute;duction (0,59 +/-0,06 H + / aa3), mais diminue de mani&egrave;re significative (environ 0,9 h + / aa3) la stoechiom&eacute;trie apparente de H + absorption coupl&eacute;e &agrave; la r&eacute;duction a3-Cu(B) h&egrave;me, en &eacute;liminant le captage H + net li&eacute; &agrave; la r&eacute;duction de Cu(B). Pour expliquer ces r&eacute;sultats, nous proposons que, apr&egrave;s le transfert de l&#39;&eacute;lectron en premier au site actif, la r&eacute;duction de Cu(B) est associ&eacute;e &agrave; la Cl-dissociation, ajout d&#39;un H + et la diffusion dans la masse (avec dissociation subs&eacute;quente) de HCl. Dans la Cl physiologiquement comp&eacute;tente--enzyme libre, un OH-sans doute li&eacute; &agrave; Cu(B) oxyd&eacute; est proton&eacute; &agrave; l&#39;arriv&eacute;e de l&#39;&eacute;lectron en premier et se dissocie comme H2O. On discute de la pertinence de cette conclusion &agrave; la compr&eacute;hension du m&eacute;canisme enzymatique.

Oxydo-r&eacute;duction-li&eacute; protonation de la cytochrome c oxydase : les effets du chlorure li&eacute; au CuB.

L&#39;effetto di Cl - bound sulla protonazione redox-collegati di manzo solubile cuore citocromo c ossidasi (CcOX) &egrave; stato studiato a pH 7.3-7.5 composita spettroscopia di flusso interrotto, usando il rosso fenolo come indicatore di pH in un mezzo unbuffered. Riduzione di esametilentetrammina Ru-II dell&#39;enzima associato a Cl &egrave; associato con un assorbimento complessivo apparente di 1,40 + 0,21 H + aa3, mentre 2,28 + 0,36 H + aa3 &egrave; preso sulla riduzione dell&#39;enzima libero Cl. Associato Cl-non ha alcun effetto sulla misura dell&#39;assorbimento di H + accoppiato a EME una riduzione (0,59 + /-0,06 H + aa3), ma diminuisce notevolmente (di circa 0,9 H + aa3) la stechiometria apparente di H + assorbimento accoppiata alla riduzione a3-Cu(B) EME, eliminando l&#39;assorbimento H + netto legato alla riduzione di Cu(B). Per tenere conto di questi risultati, proponiamo che, dopo il trasferimento dell&#39;elettrone prima al sito attivo, riduzione di Cu(B) &egrave; associato con Cl-dissociazione, aggiunta di un H + e la diffusione all&#39;interno della massa (con conseguente dissociazione) di HCl. In fisiologicamente competente Cl - enzima libero, un OH-probabilmente associato a Cu(B) ossidato &egrave; protonati all&#39;arrivo dell&#39;elettrone prima e si dissocia come H2O. La rilevanza di questa constatazione per la comprensione del meccanismo enzimatico &egrave; discusso.

Protonazione redox-collegati di citocromo c ossidasi: l&#39;effetto del cloruro associato al cucciolo.

El efecto de encuadernado Cl - en la protonaci&oacute;n de redox-ligado de ternera soluble coraz&oacute;n citocromo c oxidasa (CcOX) ha sido investigado en pH 7.3-7.5 por espectroscopia de flujo detenido m&uacute;ltiples longitudes de onda, utilizando rojo de fenol como indicador de pH en un medio sin memoria intermedia. Reducci&oacute;n por hexamina Ru-II de la enzima de Cl-limite est&aacute; asociada a una absorci&oacute;n total aparente de 1,40 + /-0,21 H + / aa3, mientras que 2.28 +/-0,36 H + / aa3 se toma sobre la reducci&oacute;n de la enzima libre de Cl. L&iacute;mite Cl-ha ning&uacute;n efecto sobre el grado de absorci&oacute;n de H + junto a heme una reducci&oacute;n (0,59 +-0,06 H + / aa3), pero disminuye significativamente (por aproximadamente 0,9 H + / aa3) la estequiometr&iacute;a aparente de H + absorci&oacute;n junto a la reducci&oacute;n de la a3-Cu(B) de heme, eliminando la red H + absorci&oacute;n ligada a la reducci&oacute;n de la Cu(B). Para tener en cuenta estos resultados, proponemos que, despu&eacute;s de la transferencia del primer electr&oacute;n al sitio activo, reducci&oacute;n de Cu(B) se asocia con Cl-disociaci&oacute;n, la adici&oacute;n de un H + y difusi&oacute;n en la mayor parte (con posterior disociaci&oacute;n) de HCl. En el Cl fisiol&oacute;gicamente competente--enzima libre, un OH-probablemente ligada a Cu(B) oxidado es protonada a la llegada del primer electr&oacute;n y disocia como H2O. Se discute la relevancia de este hallazgo a la comprensi&oacute;n del mecanismo de la enzima.

Protonaci&oacute;n redox-ligado de la citocromo c oxidasa: el efecto del cloruro obligado a CuB.

Cardiovascular diseases encompass a wide spectrum of abnormalities with diverse etiologies. The molecular mechanisms underlying these disorders include a variety of responses such as changes in nitric oxide- (NO) dependent cell signaling and increased apoptosis. An interesting aspect that has received little or no attention is the role mitochondria may play in the vascular changes that occur in both atherosclerosis and hypertension. With the changing perspective of the organelle from simply a role in metabolism to a contributor to signal transduction pathways, the role of mitochondria in cells with relatively low energy demands such as the endothelium has become important to understand. In this context, the definition of the NO-cytochrome c oxidase signaling pathway and the influence this has on cytochrome c release is particularly important in understanding apoptotic mechanisms involving the mitochondrion. This review examines the role of compromised mitochondrial function in a variety of vascular pathologies and the modulation of these effects by NO. The interaction of NO with the various mitochondrial respiratory complexes and the role NO plays in modulating mitochondrial-mediated apoptosis in these systems will be discussed.

Mitochondria, nitric oxide, and cardiovascular dysfunction.

Maladies cardiovasculaires englobent un large &eacute;ventail d&#39;anomalies avec des &eacute;tiologies diverses. Les m&eacute;canismes mol&eacute;culaires qui sous-tendent ces troubles incluent une vari&eacute;t&eacute; de r&eacute;ponses comme signalisation et une augmentation de l&#39;apoptose de cellules de changements dans l&#39;oxyde nitrique (non) d&eacute;pendant. Un aspect int&eacute;ressant qui a re&ccedil;u peu ou pas d&#39;attention est que la mitochondrie r&ocirc;le pourrait jouer dans les changements vasculaires qui se produisent dans l&#39;ath&eacute;roscl&eacute;rose et l&#39;hypertension. Avec les perspectives d&#39;&eacute;volution de l&#39;organite de simplement un r&ocirc;le dans le m&eacute;tabolisme d&#39;un contributeur &agrave; des voies de transduction de signal, le r&ocirc;le des mitochondries dans les cellules avec des demandes d&#39;&eacute;nergie relativement faible comme l&#39;endoth&eacute;lium est devenu important de comprendre. Dans ce contexte, la d&eacute;finition de la non-cytochrome c oxydase signalisation voie et l&#39;influence que cela a sur la lib&eacute;ration du cytochrome c est particuli&egrave;rement importante dans la compr&eacute;hension des m&eacute;canismes apoptotiques impliquant la mitochondrie. La pr&eacute;sente analyse examine le r&ocirc;le de la fonction mitochondriale compromise dans une vari&eacute;t&eacute; de pathologies vasculaires et la modulation de ces effets par no L&#39;interaction de NO avec les divers complexes respiratoires mitochondriales et le r&ocirc;le aucune fois dans la modulation de l&#39;apoptose m&eacute;di&eacute;e par les mitochondries dans ces syst&egrave;mes ne seront discut&eacute;s.

Les mitochondries, l&#39;oxyde nitrique et trouble cardiovasculaire.

Malattie cardiovascolari comprendono un ampio spettro di anomalie con eziologie diverse. I meccanismi molecolari alla base di questi disturbi comprendono una variet&agrave; di risposte come cambiamenti di ossido nitrico (NO) dipendente cell signaling e aumentata apoptosi. Un aspetto interessante che ha ricevuto poca o nessuna attenzione &egrave; che i mitocondri ruolo possono giocare nei cambiamenti vascolari che si verificano in entrambi l&#39;aterosclerosi e l&#39;ipertensione. Con la prospettiva cambia dell&#39;organello da semplicemente un ruolo nel metabolismo di un collaboratore di vie di trasduzione del segnale, il ruolo dei mitocondri nelle cellule con richieste di energia relativamente bassa come l&#39;endotelio &egrave; diventato importante per capire. In questo contesto, la definizione della NO-citocromo c ossidasi signaling pathway e l&#39;influenza che questo ha sulla versione del citocromo c &egrave; particolarmente importante nella comprensione dei meccanismi apoptotici che coinvolgono il mitocondrio. Questa revisione esamina il ruolo della funzione mitocondriale compromessa in una variet&agrave; di patologie vascolari e la modulazione di questi effetti da n. L&#39;interazione di NO con i vari complessi respiratori mitocondriali e il ruolo non gioca nella modulazione apoptosis mitocondriale-mediata in questi sistemi sar&agrave; discussi.

I mitocondri, l&#39;ossido nitrico e disfunzione cardiovascolare.

Las enfermedades cardiovasculares abarcan un amplio espectro de anormalidades con diversas etiolog&iacute;as. Los mecanismos moleculares subyacentes a estos trastornos incluyen una variedad de respuestas tales como cambios en la dependiente del &oacute;xido n&iacute;trico (NO) se&ntilde;alizaci&oacute;n y aumentada de la apoptosis de la c&eacute;lula. Un aspecto interesante que ha recibido poca o ninguna atenci&oacute;n es que la mitocondria de papel puede desempe&ntilde;ar en los cambios vasculares que ocurren en la aterosclerosis y la hipertensi&oacute;n. Con la perspectiva cambiante de las organelas de simplemente un papel en el metabolismo al colaborador a v&iacute;as de transducci&oacute;n de se&ntilde;al, el papel de las mitocondrias en las c&eacute;lulas con las demandas de energ&iacute;a relativamente baja como el endotelio se ha convertido en importante entender. En este contexto, la definici&oacute;n de la NO-citocromo c oxidasa se&ntilde;alizaci&oacute;n v&iacute;a y la influencia que esto tiene en la liberaci&oacute;n del citocromo c es particularmente importante en la comprensi&oacute;n de mecanismos apopt&oacute;ticos de la mitocondria. Esta revisi&oacute;n examina el papel de la funci&oacute;n mitocondrial comprometido en una variedad de patolog&iacute;as vasculares y la modulaci&oacute;n de estos efectos por NO. La interacci&oacute;n del NO con los varios complejos respiratorios mitocondriales y el papel NO juega en la modulaci&oacute;n de apoptosis mitocondrial mediado en estos sistemas se discutir&aacute;.

Las mitocondrias, &oacute;xido n&iacute;trico y disfunci&oacute;n cardiovascular.

Lo scopo di questo lavoro &egrave; quello di esaminare le informazioni disponibili sui meccanismi molecolari con cui il radicale NO reversibilmente sottoregola la funzione di citocromo c ossidasi (CcOX). I meccanismi delle reazioni con NO chiarito negli ultimi anni sono descritti e discussi nell&#39;ambito degli effetti inibitori sull&#39;attivit&agrave; enzimatica. Due percorsi alternativi di reazione sono presentati per cui non reagisce con i prodotti intermedi catalitici di CcOX popolata durante il giro d&#39;affari. The central idea is that at &quot;cellular&quot; concentrations of NO (&lt;/= microM), the redox state of the respiratory chain results in the formation of either the nitrosyl- or the nitrite-derivative of CcOX, with potentially different metabolic implications for the cell. In particolare, il ruolo svolto dai CcOX nel proteggere la cellula da eccesso NO, potenzialmente tossico per i mitocondri, viene anche rivisto evidenziando le differenze meccanicistiche tra gli eucarioti e alcuni procarioti.

Ossido nitrico e citocromo ossidasi: meccanismi di reazione dall&#39;enzima nella cella.

El objetivo de este trabajo es revisar la informaci&oacute;n disponible sobre los mecanismos moleculares por los que el radical NO reversible regula la funci&oacute;n de la citocromo c oxidasa (CcOX). Los mecanismos de las reacciones con NO aclarada en los &uacute;ltimos a&ntilde;os se describen y se discuten en el contexto de los efectos inhibitorios sobre la actividad de la enzima. Se presentan dos v&iacute;as alternativas de reacci&oacute;n por el que NO reacciona con los intermedios catal&iacute;ticos de CcOX poblada durante la facturaci&oacute;n. The central idea is that at &quot;cellular&quot; concentrations of NO (&lt;/= microM), the redox state of the respiratory chain results in the formation of either the nitrosyl- or the nitrite-derivative of CcOX, with potentially different metabolic implications for the cell. En particular, el papel desempe&ntilde;ado por CcOX en la protecci&oacute;n de la c&eacute;lula de exceso NO, potencialmente t&oacute;xicos para las mitocondrias, se repasa tambi&eacute;n destacando las diferencias mec&aacute;nicas entre eucariotas y algunos procariotas.

&Oacute;xido n&iacute;trico y la citocromo oxidasa: mecanismos de la reacci&oacute;n de la enzima a la celda.

The aim of this work is to review the information available on the molecular mechanisms by which the NO radical reversibly downregulates the function of cytochrome c oxidase (CcOX). The mechanisms of the reactions with NO elucidated over the past few years are described and discussed in the context of the inhibitory effects on the enzyme activity. Two alternative reaction pathways are presented whereby NO reacts with the catalytic intermediates of CcOX populated during turnover. The central idea is that at "cellular" concentrations of NO (</= microM), the redox state of the respiratory chain results in the formation of either the nitrosyl- or the nitrite-derivative of CcOX, with potentially different metabolic implications for the cell. In particular, the role played by CcOX in protecting the cell from excess NO, potentially toxic for mitochondria, is also reviewed highlighting the mechanistic differences between eukaryotes and some prokaryotes.

Nitric oxide and cytochrome oxidase: reaction mechanisms from the enzyme to the cell.

Le but de ce travail est d&#39;examiner les informations disponibles sur les m&eacute;canismes mol&eacute;culaires par lesquels le radical non r&eacute;versible entra&icirc;ne la fonction de cytochrome c oxydase (CcOX). Les m&eacute;canismes des r&eacute;actions non &eacute;lucid&eacute;es au cours des derni&egrave;res ann&eacute;es sont d&eacute;crites et discut&eacute;es dans le contexte des effets inhibiteurs sur l&#39;activit&eacute; enzymatique. Deux voies de r&eacute;action de l&#39;autre sont pr&eacute;sent&eacute;s selon lequel aucune r&eacute;agit avec les interm&eacute;diaires catalytiques de CcOX ne remplie au cours de chiffre d&#39;affaires. The central idea is that at &quot;cellular&quot; concentrations of NO (&lt;/= microM), the redox state of the respiratory chain results in the formation of either the nitrosyl- or the nitrite-derivative of CcOX, with potentially different metabolic implications for the cell. En particulier, le r&ocirc;le jou&eacute; par les CcOX dans la protection de la cellule d&#39;exc&egrave;s non, potentiellement toxique pour les mitochondries, est &eacute;galement examin&eacute; les diff&eacute;rences m&eacute;caniques entre eucaryotes et des procaryotes.

L&#39;oxyde nitrique et la cytochrome oxydase : m&eacute;canismes de r&eacute;action de l&#39;enzyme de la cellule.

&#x53EF;&#x9006;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x6C27;&#x5316;&#x9176; (CcOX) &#x7684;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E; (NO *) &#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x547C;&#x5438;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x6C27;&#x5316;&#x8FD8;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x5177;&#x6709;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#x8FC7;&#x6C27;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0; (ONOO-)&#xFF0C;&#x6C27;&#x5316;&#x5242;&#x7EC4;&#x6210;&#x4ECE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684; NO * &#x548C;&#x8D85;&#x6C27;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x51FA;&#x73B0;&#x5229;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x51FA;&#x73B0;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x76F4;&#x63A5;&#x6C27;&#x5316;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x964D;&#x4F4E; NO * CcOX &#x4E0E;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3002;&#x5F53;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684; CcOX &#x672C;&#x8EAB;&#x4E0E;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11;&#x57FA;&#x6750;&#x65F6;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x4E3A; ONOO-NO * &#x662F;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x5B83;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x662F;&#x5426;&#x8FD9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F52;&#x56E0;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9176;&#x4E0E; ONOO-&#x76F4;&#x63A5;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x8C03;&#x67E5;&#xFF0C;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x5728;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x7814;&#x7A76;&#x4F7F;&#x7528;&#x6781;&#x8C31;&#x65B9;&#x6CD5;&#x63AA;&#x65BD; NO * &#x751F;&#x4EA7;&#x548C; CcOX &#x540C;&#x65F6;&#x5728;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x9176;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x624D;&#x53D1;&#x73B0;&#x8FD9;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x672C;&#x8EAB;&#x5360; &gt; 90%&#x7684; NO * &#x4EA7;&#x91CF;&#x4ECE; ONOO-&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x6216;&#x7F3A;&#x5C11;&#x7684;&#x7EAF;&#x51C0; CcOX &#x7684;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x3002;&#x4EA7;&#x91CF;&#x7684;&#x4E0D;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; CcOX &#x7684;&#x4F46;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x548C; ONOO-&#x6D53;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x53D7;&#x91D1;&#x5C5E;&#x87AF;&#x3002;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#xFF0C;&#x5728; respiring &#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x4E2D;&#x7684; ONOO-&#x4E0E; CcOX &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EA; NO * &#x65F6;&#x5DF2;&#x4EA7;&#x751F;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x5728;&#x573A;&#x4E5F;&#x5B75;&#x5316;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x90FD;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x7684; ONOO-/ &#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x6D3B;&#x6027;&#x6C2E;&#x7269;&#x79CD;&#x4E0E; CcOX &#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x53EF;&#x9006;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8272;&#x7D20; c &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x8FC7;&#x6C27;&#x4E9A;&#x785D;&#x9178;&#x76D0;&#x7684;&#x6536;&#x76CA;&#x901A;&#x8FC7;&#x6297;&#x574F;&#x8840;&#x9178;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x3002;

Reversible inhibition of cytochrome c oxidase (CcOX) by nitric oxide (NO*) has potential physiological roles in the regulation of mitochondrial respiration, redox signaling, and apoptosis. However peroxynitrite (ONOO-), an oxidant formed from the reaction of NO* and superoxide, appears mostly detrimental to cell function. This occurs both through direct oxidant reactions and by decreasing the availability of NO* for interacting with CcOX. When isolated CcOX respires with ascorbate as a reducing substrate, the conversion of ONOO- to NO* is observed. It is not known whether this can be ascribed to a direct interaction of the enzyme with ONOO-. In this investigation, the role of ascorbate in this system was examined using polarographic methods to measure NO* production and CcOX activity simultaneously in both the purified enzyme and isolated mitochondria. It was found that ascorbate alone accounts for >90% of the NO* yield from ONOO- in the presence or absence of purified CcOX in turnover. The yield of NO was CcOX-independent but was dependent on ascorbate and ONOO- concentrations and was not affected by metal chelators. Consistent with this, the interaction of ONOO- with CcOX in respiring isolated mitochondria only yielded NO* when ascorbate was also present in the incubation. These observations are discussed in the context of ONOO-/ascorbate reactivity and the interaction of CcOX with reactive nitrogen species.

Reversible inhibition of cytochrome c oxidase by peroxynitrite proceeds through ascorbate-dependent generation of nitric oxide.

Une inhibition r&eacute;versible de la cytochrome c oxydase (CcOX) de l&#39;oxyde nitrique (non *) a des r&ocirc;les physiologiques possibles dans la r&eacute;gulation de la respiration mitochondriale, signalisation redox et l&#39;apoptose. Cependant le peroxynitrite (ONOO-), un oxydant form&eacute; de la r&eacute;action de non * et superoxyde, appara&icirc;t surtout pr&eacute;judiciable au fonctionnement des cellules. Cela se produit tant par r&eacute;action directe oxydant et en diminuant la disponibilit&eacute; de non * permettant d&#39;interagir avec les CcOX. Lorsque CcOX isol&eacute; respire avec ascorbate comme un substrat r&eacute;ducteur, la conversion de ONOO - non * est observ&eacute;e. On ne sait pas si cela peut &ecirc;tre attribu&eacute; &agrave; une interaction directe de l&#39;enzyme avec ONOO-. Dans le cadre de cette enqu&ecirc;te, on a examin&eacute; le r&ocirc;le de l&#39;ascorbate dans ce syst&egrave;me &agrave; l&#39;aide de m&eacute;thodes polarographiques &agrave; mesure non * production et activit&eacute; CcOX simultan&eacute;ment dans l&#39;enzyme purifi&eacute;e et mitochondries isol&eacute;es. Il a &eacute;t&eacute; constat&eacute; que l&#39;ascorbate repr&eacute;sente &agrave; lui seul &gt; 90 % des non * rendement de ONOO-en pr&eacute;sence ou en absence de CcOX purifi&eacute; son chiffre d&#39;affaires. Le rendement du non &eacute;tait ind&eacute;pendant du CcOX mais &eacute;tait tributaire de l&#39;ascorbate et concentrations de ONOO- et n&#39;a pas &eacute;t&eacute; affect&eacute; par des ch&eacute;lateurs de m&eacute;taux. Conform&eacute;ment &agrave; cela, l&#39;interaction des ONOO-avec CcOX dans les mitochondries isol&eacute;es respiration seulement ne transmise * lorsque ascorbate &eacute;tait &eacute;galement pr&eacute;sent lors de l&#39;incubation. Ces observations sont discut&eacute;es dans le contexte de ONOO-/ r&eacute;activit&eacute; de l&#39;ascorbate et l&#39;interaction de CcOX avec les esp&egrave;ces r&eacute;actives de l&#39;azote.

Une inhibition r&eacute;versible de la cytochrome c oxydase par le peroxynitrite proc&egrave;de par g&eacute;n&eacute;ration d&#39;ascorbate d&eacute;pendant du monoxyde d&#39;azote.

Reversible Hemmung der Cytochrom c Oxidase durch Peroxynitrit durchl&#xE4;uft Ascorbat-abh&#xE4;ngige Erzeugung von Stickoxid.

L&#39;inibizione reversibile della citocromo c ossidasi (CcOX) di ossido nitrico (NO *) ha potenziale ruolo fisiologico nella regolazione della respirazione mitocondriale, segnalazione redox e apoptosi. Tuttavia il perossinitrito (ONOO-), un ossidante formata da reazione di NO e superossido, appare per lo pi&ugrave; dannosa alla funzione delle cellule. Questo si verifica sia attraverso reazioni ossidanti diretti e diminuendo la disponibilit&agrave; di NO per l&#39;interazione con CcOX. Quando isolato CcOX respira con ascorbato come substrato riducente, la conversione di ONOO - per non &egrave; osservata. Non &egrave; noto se questo pu&ograve; essere ascritto a una diretta interazione dell&#39;enzima con ONOO-. In questa inchiesta, il ruolo di ascorbato in questo sistema &egrave; stato esaminato usando metodi polarografica a misura NO * produzione e CcOX attivit&agrave; simultaneamente sia l&#39;enzima purificato e mitocondri isolati. E &#39; stato trovato che ascorbato conti solo per &amp;gt; 90% del NO resa da ONOO-in presenza o assenza di CcOX purificato in fatturato. La resa di NO era CcOX-indipendente ma era dipendente da ascorbato e ONOO-concentrazioni e non &egrave; stata influenzata da chelanti metalli. Coerentemente con questo, l&#39;interazione di ONOO-con CcOX in mitocondri isolati respiro solo non ceduto * quando ascorbato era anche presente in incubazione. Queste osservazioni sono discussi nel contesto del ONOO-/ ascorbato reattivit&agrave; e l&#39;interazione del CcOX con le specie reattive dell&#39;azoto.

Inibizione reversibile della citocromo c ossidasi di perossinitrito procede attraverso la generazione di ascorbato-dipendente dell&#39;ossido nitrico.

&#x30C1;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0; c &#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; (CcOX) &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20; &#xFF08;NO &#x203B;&#xFF09; &#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x547C;&#x5438;&#x3068;&#x9178;&#x5316;&#x9084;&#x5143;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30F3;&#x30C8; &#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30CA;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8; (ONOO -&#xFF09; &#x304B;&#x3089;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306A;&#x3057; &#x203B; &#x53CD;&#x5FDC;&#x3068;&#x30B9;&#x30FC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C9;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x652F;&#x969C;&#x3092;&#x304D;&#x305F;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x76F4;&#x63A5;&#x9178;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x304B;&#x3089;&#x3068;&#x306A;&#x3057; &#x203B; CcOX &#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B64;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F; CcOX &#x3068;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x9084;&#x5143;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5916;&#x6C17;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306E; ONOO-&#x3044;&#x3044;&#x3048; &#x203B; &#x3078;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3068; ONOO - &#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x5E30;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E1;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x306A;&#x3057; &#x203B; &#x751F;&#x7523;&#x3068;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x7CBE;&#x88FD;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x5206;&#x96E2;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; CcOX &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x30DD;&#x30FC;&#x30E9;&#x30ED; &#x30B0;&#x30E9;&#x30D5; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x5360;&#x3081;&#x308B;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x76EE;&#x306E;&#x3044;&#x3044;&#x3048; &#x203B; 90 &#xFF05; &#x53CE;&#x7387; ONOO-&#x58F2;&#x308A;&#x4E0A;&#x3052;&#x9AD8;&#x3067;&#x7CBE;&#x88FD; CcOX &#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x3067;&#x3002;NO &#x306E;&#x53CE;&#x91CF; CcOX &#x72EC;&#x7ACB;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x3068; ONOO &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x91D1;&#x5C5E;&#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5264;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x307E;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x305F;&#x3001;ONOO - CcOX &#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; respiring &#x5206;&#x96E2;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x307F;&#x306A;&#x3057; &#x203B; &#x5C48;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306E; ONOO - &#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;/&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x3068;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x7A92;&#x7D20;&#x7A2E;&#x3068; CcOX &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x30DA;&#x30EB;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7; &#x30CA;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30C1;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E0;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x306E;&#x30A2;&#x30B9;&#x30B3;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x9178;&#x4F9D;&#x5B58;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x9032;&#x884C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC9C8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C; (NO *)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; (CcOX)&#xC758; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC800;&#xD574; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xD638;&#xD761;, &#xC0B0;&#xD654; &#xD658; &#xC6D0; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; apoptosis&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; peroxynitrite (ONOO-)&#xB294; &#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xC131;&#xC758; * &#xBC18;&#xC751; superoxide, &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xCE58; &#xBA85; &#xD0C0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C1;&#xC811; &#xC0B0;&#xD654; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xACE0;&#xC758; * Ccox&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; CcOX &#xC904;&#xC774;&#xB294; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; ascorbate&#xC640; respires, NO * ONOO-&#xBCC0;&#xD658; &#xAD00;&#xCC30; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83; &#xC5EC;&#xBD80;&#xC774; ONOO-&#xB85C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xC791;&#xC6A9; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; ascorbate&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xADF8;&#xB798;&#xD53C; &#xBC29;&#xBC95; &#xCE21;&#xC815; * &#xC0DD;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC815;&#xC81C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC640; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; CcOX &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBC1C;&#xACAC; &#xADF8; ascorbate &#xD63C;&#xC790; &#xCC28;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &amp;gt; NO *&#xC758; 90% &#xC218;&#xC775;&#xB960; ONOO-&#xB9E4;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC21C;&#xD654; Ccox&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC720;&#xBB34;&#xC5D0;. NO&#xC758; &#xC218;&#xC775;&#xB960; CcOX &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xC5C8;&#xACE0; ascorbate ONOO-&#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC758;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4; &#xAE08;&#xC18D; chelators&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0;&#xB294;. &#xC774; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C;, &#xC561;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; ONOO-Ccox&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xB9CC; &#xB098;&#xC654;&#xACE0; NO * ascorbate&#xB294; &#xBD80; &#xD654;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xB54C;. ONOO-&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; / ascorbate &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xBC0F; &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC885; CcOX &#xC0C1;&#xD638;.

Peroxynitrite&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC; &#xD1A0; &#xD06C;&#xB86C; c &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xAC00;&#xC5ED; &#xC800;&#xD574; ascorbate &#xC885;&#xC18D; &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Inhibici&oacute;n reversible de la citocromo c oxidasa (CcOX) por el &oacute;xido n&iacute;trico (NO *) tiene potencial papel fisiol&oacute;gico en la regulaci&oacute;n de la respiraci&oacute;n mitocondrial, las se&ntilde;ales redox y apoptosis. Sin embargo el peroxinitrito (ONOO-), un oxidante formado por la reacci&oacute;n de NO * y super&oacute;xido, aparece sobre todo perjudiciales para la funci&oacute;n de la c&eacute;lula. Esto ocurre a trav&eacute;s de reacciones oxidante directa y reduciendo la disponibilidad de NO * para interactuar con CcOX. Cuando CcOX aislado respires con ascorbato como sustrato reducci&oacute;n, se observa la conversi&oacute;n de ONOO - a NO *. No se sabe si esto puede atribuirse a una interacci&oacute;n directa de la enzima con ONOO-. En esta investigaci&oacute;n, el papel de ascorbato en este sistema fue examinado usando m&eacute;todos polarogr&aacute;ficos a medida NO * producci&oacute;n y actividad CcOX simult&aacute;neamente en la enzima purificada y mitocondrias aisladas. Se encontr&oacute; que ascorbato representa solo &gt; 90% de los NO * rendimiento de ONOO-en la presencia o ausencia de CcOX purificada en facturaci&oacute;n. El rendimiento no era CcOX independiente pero depend&iacute;a de ascorbato y ONOO-concentraciones y no fue afectado por quelantes de metales. De acuerdo con esto, la interacci&oacute;n de ONOO-con CcOX en mitocondrias aisladas respira s&oacute;lo no rindi&oacute; * cuando ascorbato tambi&eacute;n estuvo presente en la incubaci&oacute;n. Estas observaciones se discuten en el contexto de ONOO-/ reactividad de ascorbato y la interacci&oacute;n de CcOX con especies de nitr&oacute;geno reactivo.

Inhibici&oacute;n reversible de la citocromo c oxidasa por peroxinitrito procede a trav&eacute;s de la generaci&oacute;n de ascorbato dependiente del &oacute;xido n&iacute;trico.

Nitric oxide (NO.) inhibits mitochondrial respiration by binding to the binuclear heme a3/CuB center in cytochrome c oxidase. However, the significance of this reaction at physiological O2 levels (5-10 microM) and the effects of respiratory state are unknown. In this study mitochondrial respiration, absorption spectra, [O2], and [NO.] were measured simultaneously at physiological O2 levels with constant O2 delivery, to model in vivo respiratory dynamics. Under these conditions NO. inhibited mitochondrial respiration with an IC50 of 0.14 +/- 0.01 microm in state 3 versus 0.31 +/- 0.04 microM in state 4. Spectral data indicate that the higher sensitivity of state 3 respiration to NO. is due to greater control over respiration by an NO.-dependent spectral species in the respiratory chain in this state. These results are discussed in the context of regulation of respiration by NO. in vivo and its implications for the control of vessel-parenchymal O2 gradients.

Control of mitochondrial respiration by NO*, effects of low oxygen and respiratory state.

L&#39;oxyde nitrique (no) inhibe la respiration mitochondriale en se liant au centre binucl&eacute;aire h&egrave;me a3/CuB en cytochrome c oxydase. Cependant, l&#39;importance de cette r&eacute;action &agrave; des niveaux physiologiques de O2 (5-10 microM) et les effets de l&#39;&Eacute;tat respiratoire sont inconnus. Dans cette &eacute;tude de la respiration mitochondriale, spectres d&#39;absorption, [O2] et [no] ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;s simultan&eacute;ment &agrave; des niveaux physiologiques de O2 avec cylindr&eacute;e constante de O2, au mod&egrave;le de la dynamique respiratoire vivo. Dans ces conditions no inhibe la respiration mitochondriale avec une IC50 de 0,14 +/-0,01 microm &eacute;tat 3 par rapport &agrave; 0,31 +/-0,04 microM en &eacute;tat 4. Les donn&eacute;es spectrales indiquent que la plus grande sensibilit&eacute; de respiration &eacute;tat 3 &agrave; no est due &agrave; une plus grande ma&icirc;trise de la respiration par une esp&egrave;ce de no-d&eacute;pendante spectrale dans la cha&icirc;ne respiratoire dans cet &Eacute;tat. Ces r&eacute;sultats sont discut&eacute;s dans le cadre de r&eacute;gulation de la respiration par no in vivo et ses implications pour le contr&ocirc;le du navires-parenchymateuses O2 d&eacute;grad&eacute;s.

Contr&ocirc;le de la respiration mitochondriale par non *, les effets de faibles concentrations d&#39;oxyg&egrave;ne et &Eacute;tat respiratoire.

L&#39;ossido di azoto (n) inibisce la respirazione mitocondriale legandosi al centro vacuolizzate eme a3/CuB nel citocromo c ossidasi. Tuttavia, il significato di questa reazione a livelli fisiologici di O2 (5-10 microM) e gli effetti dello stato delle vie respiratorie sono sconosciuti. In questo studio respirazione mitocondriale, spettri di assorbimento [O2] e [n] sono state misurate simultaneamente a livelli fisiologici di O2 con costante consegna di O2, al modello in vivo dinamica respiratoria. In queste condizioni NO. inibisce la respirazione mitocondriale con una CL50 di 0,14 + /-0,01 microm nello stato 3 versus 0,31 + /-0,04 microM nello stato 4. I dati spettrali indicano che la maggiore sensibilit&agrave; della respirazione stato 3 a n. &egrave; a causa della maggiore controllo sulla respirazione da una specie di spettrale n.-dipendente della catena respiratoria in questo stato. Questi risultati sono discussi nel contesto del regolamento della respirazione da n. in vivo e le sue implicazioni per il controllo della nave-parenchimali gradienti di O2.

Controllo della respirazione mitocondriale da NO *, gli effetti del basso tenore di ossigeno e lo stato delle vie respiratorie.

El &oacute;xido n&iacute;trico (n&ordm;) inhibe la respiraci&oacute;n mitocondrial atando al centro a3/CuB binuclear heme citocromo c oxidasa. Sin embargo, se desconocen la importancia de esta reacci&oacute;n a concentraciones fisiol&oacute;gicas de O2 (5-10 microM) y los efectos del estado respiratorio. En este estudio la respiraci&oacute;n mitocondrial, espectros de absorci&oacute;n, [O2] y [N&ordm;] fueron medidos simult&aacute;neamente a concentraciones fisiol&oacute;gicas de O2 con entrega constante de O2, al modelo de la din&aacute;mica respiratoria vivo. En estas condiciones NO. inhibe la respiraci&oacute;n mitocondrial con un IC50 de 0.14 +/-0.01 microm en estado 3 versus 0.31 +/-0.04 microM en estado 4. Datos espectrales indican que la mayor sensibilidad de la respiraci&oacute;n del estado 3 a NO. es debido a un mayor control de la respiraci&oacute;n por una especie espectral NO. dependiente en la cadena respiratoria en este estado. Estos resultados se discuten en el contexto de la regulaci&oacute;n de la respiraci&oacute;n por NO. en vivo y sus implicaciones para el control del buques parenquimales gradientes de O2.

Control de la respiraci&oacute;n mitocondrial por NO *, efectos de bajo nivel de ox&iacute;geno y el estado respiratorio.

Micromolar nitric oxide (NO) rapidly (ms) inhibits cytochrome c oxidase in turnover with physiological substrates. Two reaction mechanisms have been identified leading, respectively, to formation of a nitrosyl- [a3(2+) -NO] or a nitrite- [a3(3+) -NO2-] derivative of the enzyme. In the presence of O2, the nitrosyl adduct recovers activity slowly, following NO displacement at k' approximately equal to 0.01 s(-1) (37 degrees C); the recovery of the nitrite adduct is much faster. Relevant to pathophysiology, the enzyme does not degrade NO by following the first mechanism, whereas by following the second one it promotes NO oxidation and disposal as nitrite/nitrate. The reaction between NO and cytochrome c oxidase has been investigated at different integration levels of the enzyme, including the in situ state, such as in mouse liver mitochondria or cultured human SY5Y neuroblastoma cells. The respiratory chain is inhibited by NO, either supplied exogenously or produced endogenously via the NO synthase activation. Inhibition of respiration is reversible, although it remains to be clarified whether reversibility is always full and how it depends on concentration of and time of exposure to NO. Oxygraphic measurements show that cultured cells or isolated state 4 mitochondria exposed to micromolar (or less) NO recover from NO inhibition rapidly, as if the nitrite reaction was predominant. Mitochondria in state 3 display a slightly more persistent inhibition than in state 4, possibly due to a higher accumulation of the nitrosyl adduct. Among a number of parameters that appear to control the switch over between the two mechanisms, the concentration of reductants (reduced cytochrome c) at the cytochrome c oxidase site has been proved to be the most relevant one.

Nitric oxide and mitochondrial complex IV.

L&#39;oxyde nitrique (non) micromolaire rapidement (ms) inhibe le cytochrome c oxydase dans le chiffre d&#39;affaires dont le substrat physiologique. Deux m&eacute;canismes de r&eacute;action ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s, respectivement, conduisant &agrave; la formation d&#39;un nitrosyle-[a3(2+)-non] ou un d&eacute;riv&eacute; de nitrite-[a3(3+) - NO2-] de l&#39;enzyme. En pr&eacute;sence de O2, la nitrosyle adduit activit&eacute; r&eacute;cup&egrave;re lentement, ne suivi aucun d&eacute;placement &agrave; k&#39; environ &eacute;gale &agrave; 0,01 s(-1) (37 degr&eacute;s C) ; la r&eacute;cup&eacute;ration de la nitrite adduit est beaucoup plus rapide. Pertinentes &agrave; la physiopathologie, l&#39;enzyme ne d&eacute;grade pas non en suivant le premier m&eacute;canisme, consid&eacute;rant que par suite de l&#39;autre, il ne favorise aucune oxydation et &eacute;limination sous forme de nitrite/nitrate. La r&eacute;action entre non et cytochrome c oxydase a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e &agrave; des niveaux diff&eacute;rents d&#39;int&eacute;gration de l&#39;enzyme, y compris l&#39;&eacute;tat in situ, comme dans les mitochondries de foie de souris ou de cellules humaines cultiv&eacute;es de neuroblastome SY5Y. La cha&icirc;ne respiratoire est inhib&eacute;e par le non, soit exog&egrave;ne ou produites de fa&ccedil;on endog&egrave;ne par l&#39;interm&eacute;diaire de l&#39;activation de synthase de non. L&#39;inhibition de la respiration est r&eacute;versible, bien qu&#39;il reste &agrave; clarifier si r&eacute;versibilit&eacute; est toujours pleine et comment cela d&eacute;pend de concentration et temps d&#39;exposition &agrave; no Oxygraphic mesures montrent que cultiv&eacute;s des cellules ou des mitochondries &Eacute;tat isol&eacute; 4 expos&eacute;s non micromolaires (ou moins) r&eacute;cup&eacute;rer d&#39;aucune inhibition rapidement, comme si la r&eacute;action de nitrite &eacute;tait pr&eacute;dominante. Mitochondries &eacute;tat 3 affichent une inhibition l&eacute;g&egrave;rement plus persistante que dans l&#39;&eacute;tat 4, possiblement en raison d&#39;une accumulation plus &eacute;lev&eacute;e de la nitrosyle adduit. Parmi un certain nombre de param&egrave;tres qui semblent contr&ocirc;ler l&#39;interrupteur entre les deux m&eacute;canismes, la concentration des agents r&eacute;ducteurs (r&eacute;duit le cytochrome c) sur le site de cytochrome c oxydase a &eacute;t&eacute; prouv&eacute;e &agrave; &ecirc;tre la plus pertinente.

L&#39;oxyde nitrique et mitochondrial complexe IV.

Micromolare ossido nitrico (NO) rapidamente (ms) inibisce la citocromo c ossidasi nel fatturato con substrati fisiologici. Sono state identificate due meccanismi di reazione che portano, rispettivamente, alla formazione di un nitrosyl-[a3(2+)-NO] o un nitrito-[a3(3+) - NO2-] derivato dell&#39;enzima. In presenza di O2, il nitrosyl addotto attivit&agrave; recupera lentamente, non seguendo nessun spostamento a k&#39; circa pari a 0.01 s(-1) (37 gradi C); il recupero del nitrito addotto &egrave; molto pi&ugrave; veloce. Pertinenti alla patofisiologia, l&#39;enzima non degradano NO seguendo il primo meccanismo, mentre seguendo il secondo non si promuove Nessuna ossidazione e smaltimento come nitriti/nitrati. La reazione tra NO e citocromo c ossidasi sono stato studiato a livelli diversi di integrazione dell&#39;enzima, compreso lo stato in situ, come i mitocondri del fegato del mouse o cellule SY5Y neuroblastoma umane in coltura. La catena respiratoria &egrave; inibita da NO, o forniti in maniera esogena o endogena prodotta attraverso l&#39;attivazione di NO sintasi. Inibizione della respirazione &egrave; reversibile, anche se rimane da chiarire se la reversibilit&agrave; &egrave; sempre pieno e come dipende dalla concentrazione e tempo di esposizione a n. Oxygraphic le misurazioni mostrano che coltivate le cellule o i mitocondri stato isolato 4 esposti a micromolare (o meno) NO recuperare da alcuna inibizione rapidamente, come se la reazione del nitrito era predominante. Mitocondri nello stato 3 visualizzano un&#39;inibizione leggermente pi&ugrave; persistente che nello stato 4, probabilmente a causa di un maggiore accumulo del nitrosyl addotto. Tra un certo numero di parametri che sembrano controllare lo switch tra i due meccanismi, la concentrazione del riducente (citocromo ridotto c) presso il sito di citocromo c ossidasi ha dimostrata di essere il pi&ugrave; pertinente.

Ossido nitrico e mitocondriale complesso IV.

Micromolar el &oacute;xido n&iacute;trico (NO) r&aacute;pidamente (ms) inhibe la citocromo c oxidasa en facturaci&oacute;n con sustratos fisiol&oacute;gicos. Se han identificado dos mecanismos de reacci&oacute;n llevan, respectivamente, a la formaci&oacute;n de un nitrosyl-[a3(2+)-NO] o un nitrito-[a3(3+) - NO2-] derivado de la enzima. En presencia de O2, el nitrosyl aducto actividad se recupera lentamente, no siguiendo desplazamiento en k&#39; aproximadamente igual a 0.01 s(-1) (37 grados C); la recuperaci&oacute;n de la nitrito aducto es mucho m&aacute;s r&aacute;pido. Correspondiente a la Fisiopatolog&iacute;a, la enzima no degrada NO siguiendo el primer mecanismo, mientras que siguiendo el otro no promueve ninguna oxidaci&oacute;n y eliminaci&oacute;n como nitrito/nitrato. La reacci&oacute;n entre el NO y citocromo c oxidasa ha sido investigada en los niveles de integraci&oacute;n diferentes de la enzima, incluido el estado in situ, tal como en las mitocondrias de h&iacute;gado de rat&oacute;n o c&eacute;lulas de neuroblastoma SY5Y humanas cultivadas. La cadena respiratoria es inhibida por el NO, suministra ex&oacute;geno o end&oacute;geno producido mediante la activaci&oacute;n de la sintasa de NO. Inhibici&oacute;n de la respiraci&oacute;n es reversible, aunque queda por aclarar si la reversibilidad siempre est&aacute; lleno y c&oacute;mo depende de la concentraci&oacute;n de y tiempo de exposici&oacute;n al NO. Oxygraphic mediciones muestran que cultivan c&eacute;lulas o mitocondrias aisladas estado 4 expuestas a micromolar (o menos) NO recuperarse ninguna inhibici&oacute;n r&aacute;pidamente, como si la reacci&oacute;n de nitrito era predominante. Mitocondrias en estado 3 muestran una inhibici&oacute;n ligeramente m&aacute;s persistente que en estado 4, posiblemente debido a una mayor acumulaci&oacute;n de la nitrosyl aducto. Entre un n&uacute;mero de par&aacute;metros que parecen controlar el interruptor entre los dos mecanismos, la concentraci&oacute;n de reductores (citocromo reducido c) en el sitio de citocromo c oxidasa ha demostrado para ser el m&aacute;s relevante.

&Oacute;xido n&iacute;trico y mitocondrial complejo IV.

Over the past decade it was discovered that, over-and-above multiple regulatory functions, nitric oxide (NO) is responsible for the modulation of cell respiration by inhibiting cytochrome c oxidase (CcOX). As assessed at different integration levels (from the purified enzyme in detergent solution to intact cells), CcOX can react with NO following two alternative reaction pathways, both leading to an effective, fully reversible inhibition of respiration. A crucial finding is that the rate of electron flux through the respiratory chain controls the mechanism of inhibition by NO, leading to either a "nitrosyl" or a "nitrite" derivative. The two mechanisms can be discriminated on the basis of the differential photosensitivity of the inhibited state. Of relevance to cell pathophysiology, the pathway involving the nitrite derivative leads to oxidative degradation of NO, thereby protecting the cell from NO toxicity. The aim of this work is to review the information available on these two mechanisms of inhibition of respiration.

Control of cytochrome c oxidase activity by nitric oxide.

Ces dix derni&egrave;res ann&eacute;es, on a d&eacute;couvert que, sur-et-dessus multiples r&eacute;glementaire fonctions, oxyde nitrique (NO) est responsable de la modulation de la respiration cellulaire en inhibant la cytochrome c oxydase (CcOX). Telles qu&#39;&eacute;valu&eacute;es aux niveaux d&#39;int&eacute;gration diff&eacute;rents (&agrave; partir de l&#39;enzyme purifi&eacute;e dans une solution d&eacute;tergente &agrave; cellules intactes), CcOX peut r&eacute;agir avec aucun suite &agrave; deux voies de r&eacute;action de l&#39;autre, les deux conduisant &agrave; une inhibition efficace, enti&egrave;rement r&eacute;versible de la respiration. Une conclusion essentielle est que le taux d&#39;&eacute;lectron de flux &agrave; travers les contr&ocirc;les de la cha&icirc;ne respiratoire le m&eacute;canisme d&#39;inhibition par non, menant &agrave; une &laquo; nitrosyle &raquo; ou un d&eacute;riv&eacute; de &laquo; nitrite &raquo;. Les deux m&eacute;canismes peuvent &ecirc;tre distingu&eacute;es sur la base de la photosensibilit&eacute; diff&eacute;rentielle de l&#39;&eacute;tat inhib&eacute;. Pertinent pour la physiopathologie des cellules, la voie impliquant le d&eacute;riv&eacute; de nitrite conduit &agrave; une d&eacute;gradation oxydative de NO, prot&eacute;geant ainsi la cellule d&#39;aucune toxicit&eacute;. Le but de ce travail est d&#39;examiner les informations disponibles sur ces deux m&eacute;canismes d&#39;inhibition de la respiration.

Contr&ocirc;le de l&#39;activit&eacute; cytochrome c oxydase de l&#39;oxyde nitrique.

Nell&#39;ultimo decennio si &egrave; scoperto che, oltre e sopra multiplo di regolamentare le funzioni, l&#39;ossido nitrico (NO) &egrave; responsabile per la modulazione della respirazione cellulare inibendo il citocromo c ossidasi (CcOX). Come valutato a livelli diversi di integrazione (dall&#39;enzima purificato nella soluzione detergente di cellule intatte), CcOX pu&ograve; reagire con NO seguendo due percorsi alternativi di reazione, entrambi leader per un&#39;efficacia, completamente reversibile inibizione della respirazione. Una scoperta fondamentale &egrave; che la velocit&agrave; dell&#39;elettrone flusso attraverso i controlli di catena respiratoria il meccanismo di inibizione di NO, che conduce a un &quot;nitrosyl&quot; o un derivato di &quot;nitriti&quot;. I due meccanismi possono essere discriminati in base al differenziale fotosensibilit&agrave; dello stato inibito. Rilevante per la fisiopatologia di cella, il percorso che coinvolge il derivato di nitrito conduce alla degradazione ossidativa di NO, proteggendo la cellula da nessuna tossicit&agrave;. Lo scopo di questo lavoro &egrave; quello di esaminare le informazioni disponibili su questi due meccanismi di inibizione della respirazione.

Controllo delle attivit&agrave; di citocromo c ossidasi di ossido nitrico.

En la &uacute;ltima d&eacute;cada fue descubierto eso, encima y sobre m&uacute;ltiples regulatorios funciones, &oacute;xido n&iacute;trico (NO) es responsable de la modulaci&oacute;n de la respiraci&oacute;n celular mediante la inhibici&oacute;n de la citocromo c oxidasa (CcOX). Seg&uacute;n lo determinado en los niveles de integraci&oacute;n diferentes (desde la enzima purificada en soluci&oacute;n detergente a las c&eacute;lulas intactas), CcOX pueden reaccionar con NO siguiendo dos v&iacute;as alternativas de reacci&oacute;n, ambos conducen a una inhibici&oacute;n eficaz, completamente reversible de la respiraci&oacute;n. Un hallazgo crucial es que la velocidad del electr&oacute;n del flujo a trav&eacute;s de los controles de la cadena respiratoria el mecanismo de inhibici&oacute;n por NO, llevando a un &quot;nitrosyl&quot; o un derivado de &quot;nitritos&quot;. Los dos mecanismos se pueden discriminar sobre la base de la fotosensibilidad diferencial del estado inhibido. De relevancia para la fisiopatolog&iacute;a de la c&eacute;lula, el camino que el derivado de nitrito conduce a la degradaci&oacute;n oxidativa del NO, protegiendo as&iacute; a la c&eacute;lula de ninguna toxicidad. El objetivo de este trabajo es revisar la informaci&oacute;n disponible sobre estos dos mecanismos de inhibici&oacute;n de la respiraci&oacute;n.

Control de la actividad de citocromo c oxidasa por &oacute;xido n&iacute;trico.

Hypoxia occurs when oxygen availability drops below the levels necessary to maintain normal rates of metabolism. Because of its high metabolic activity, the brain is highly sensitive to hypoxia. Severe or prolonged oxygen deprivation in the brain contributes to the damage associated with stroke and a variety of other neuronal disorders. Conversely, the extreme hypoxic environment found in the core of many brain tumors supports the growth of the tumor and the survival of tumor cells. Normal cells exposed to transient or moderate hypoxia are generally able to adapt to the hypoxic conditions largely through activation of the hypoxia-inducible transcription factor HIF. HIF-regulated genes encode proteins involved in energy metabolism, cell survival, erythropoiesis, angiogenesis, and vasomotor regulation. In many instances of hypoxia or hypoxia and ischemia, the induction of HIF target genes may be beneficial. When these same insults occur in tissues that are normally poorly vascularized, such as the retina and the core of solid tumors, induction of the same HIF target genes can promote disease. Major new insights into the molecular mechanisms that regulate the oxygen-sensitivity of HIF, and in the development of compounds with which to manipulate HIF activity, are forcing serious consideration of HIF as a therapeutic target for diverse CNS disorders associated with hypoxia.

Targeting hypoxia-inducible factor (HIF) as a therapeutic strategy for CNS disorders.

L&#39;hypoxie se produit lorsque la disponibilit&eacute; de l&#39;oxyg&egrave;ne descend sous les niveaux n&eacute;cessaires pour maintenir un taux normal du m&eacute;tabolisme. En raison de sa forte activit&eacute; m&eacute;tabolique, le cerveau est tr&egrave;s sensible &agrave; l&#39;hypoxie. Privation s&eacute;v&egrave;re ou prolong&eacute;e d&#39;oxyg&egrave;ne dans le cerveau contribue aux dommages associ&eacute;s aux accidents vasculaires c&eacute;r&eacute;braux et de divers autres troubles neuronaux. &Agrave; l&#39;inverse, l&#39;environnement hypoxique extr&ecirc;me dans le c&oelig;ur de nombreuses tumeurs c&eacute;r&eacute;brales soutient la croissance de la tumeur et la survie des cellules tumorales. Les cellules normales, expos&eacute;s &agrave; une hypoxie mod&eacute;r&eacute;e passag&egrave;re ou sans importance sont g&eacute;n&eacute;ralement capables de s&#39;adapter &agrave; l&#39;hypoxie en grande partie gr&acirc;ce &agrave; l&#39;activation du facteur de transcription inductibles par l&#39;hypoxie HIF. G&egrave;nes r&eacute;gul&eacute;s par l&#39;HIF codent pour des prot&eacute;ines impliqu&eacute;es dans le m&eacute;tabolisme &eacute;nerg&eacute;tique, la survie des cellules, l&#39;&eacute;rythropo&iuml;&egrave;se, angiogen&egrave;se et r&egrave;glement vasomoteur. Dans bien des cas d&#39;isch&eacute;mie ou d&#39;hypoxie et de l&#39;hypoxie, l&#39;induction de g&egrave;nes cibles HIF peut &ecirc;tre b&eacute;n&eacute;fique. Lorsque ces m&ecirc;mes insultes se produisent dans les tissus qui sont normalement mal vascularis&eacute;s, tels que la r&eacute;tine et le noyau des tumeurs solides, induction des m&ecirc;mes g&egrave;nes cibles HIF peut favoriser la maladie. Principales nouvelles connaissances sur les m&eacute;canismes mol&eacute;culaires qui r&eacute;gissent l&#39;oxyg&egrave;ne-sensibilit&eacute; de HIF et dans le d&eacute;veloppement de compos&eacute;s permettant de manipuler des activit&eacute; HIF, forcent s&eacute;rieusement de HIF comme une cible th&eacute;rapeutique pour divers troubles du SNC, associ&eacute;e &agrave; une hypoxie.

Ciblage hypoxia-inducible factor (HIF) comme une strat&eacute;gie th&eacute;rapeutique pour les troubles du SNC.

L&#39;ipossia si verifica quando la disponibilit&agrave; di ossigeno scende sotto i livelli necessari per mantenere la normale tasso di metabolismo. A causa della sua elevata attivit&agrave; metabolica, il cervello &egrave; molto sensibile all&#39;ipossia. Privazione di ossigeno grave o prolungata nel cervello contribuisce ai danni associati a ictus e una variet&agrave; di altri disturbi neuronali. Al contrario, l&#39;estrema ambiente ipossica trovata nel nucleo di molti tumori cerebrali supporta la crescita del tumore e la sopravvivenza delle cellule tumorali. Normali cellule esposte all&#39;ipossia transitoria o moderata sono generalmente in grado di adattarsi alle condizioni ipossiche in gran parte attraverso l&#39;attivazione del fattore di trascrizione hypoxia-inducible HIF. HIF-regolati i geni codificano per proteine coinvolte nel metabolismo energetico, la sopravvivenza delle cellule, l&#39;eritropoiesi, angiogenesi e regolazione vasomotoria. In molti casi di ipossia o ipossia e ischemia, l&#39;induzione di geni bersaglio HIF pu&ograve; essere utile. Quando si verificano questi stessi insulti nei tessuti che sono normalmente scarsamente vascolarizzati, come la retina e il nucleo dei tumori solidi, induzione dei geni bersaglio HIF stessi pu&ograve; promuovere la malattia. Principali nuove intuizioni i meccanismi molecolari che regolano la sensibilit&agrave; dell&#39;ossigeno di HIF e nello sviluppo di composti con cui manipolare l&#39;attivit&agrave; HIF, stanno costringendo seria considerazione di HIF come bersaglio terapeutico per diversi disturbi del CNS associata con ipossia.

Targeting hypoxia-inducible factor (HIF) come una strategia terapeutica per i disturbi del CNS.

Hipoxia se produce cuando la disponibilidad de ox&iacute;geno cae por debajo de los niveles necesarios para mantener las tarifas normales del metabolismo. Debido a su alta actividad metab&oacute;lica, el cerebro es muy sensible a la hipoxia. Privaci&oacute;n grave o prolongada de ox&iacute;geno en el cerebro contribuye al da&ntilde;o asociado con el movimiento y una variedad de otros trastornos neuronales. Por el contrario, el ambiente hip&oacute;xico extremo encontrado en la base de muchos tumores cerebrales apoya el crecimiento del tumor y la supervivencia de las c&eacute;lulas tumorales. Las c&eacute;lulas normales expuestas a hipoxia transitoria o moderada son generalmente capaces de adaptarse a las condiciones hip&oacute;xicas en gran parte a trav&eacute;s de la activaci&oacute;n del factor de transcripci&oacute;n inducible por la hipoxia HIF. Regula HIF genes codifican las prote&iacute;nas implicadas en el metabolismo energ&eacute;tico, supervivencia celular, eritropoyesis, angiog&eacute;nesis y regulaci&oacute;n vasomotora. En muchos casos de hipoxia o hipoxia e isquemia, la inducci&oacute;n de genes diana HIF puede ser beneficiosa. Cuando estos mismos insultos se producen en los tejidos que normalmente mal vascularizados, como la retina y el n&uacute;cleo de tumores s&oacute;lidos, inducci&oacute;n de los mismos genes objetivo HIF puede promover la enfermedad. Principales nuevos conocimientos sobre los mecanismos moleculares que regulan la sensibilidad al ox&iacute;geno de HIF y en el desarrollo de compuestos con los que manipular la actividad HIF, est&aacute;n obligando a consideraci&oacute;n seria de HIF como diana terap&eacute;utica para diversos trastornos de la CNS asociada a hipoxia.

A factor inducible por la hipoxia (HIF) como una estrategia terap&eacute;utica para los trastornos de la CNS.

A shortcut to mitochondrial signaling and pathology: a commentary on "Nonenzymatic formation of succinate in mitochondria under oxidative stress".

Un raccourci vers la signalisation mitochondriale et pathologie : un commentaire sur &laquo; Formation non-enzymatique de succinate en mitochondries sous stress oxydatif &raquo;.

Una scorciatoia per segnalazione mitocondriale e patologia: un commento su &quot;Nonenzymatic formazione di succinato nei mitocondri sotto stress ossidativo&quot;.

Un atajo para se&ntilde;alizaci&oacute;n mitocondrial y la patolog&iacute;a: un Comentario sobre &quot;Formaci&oacute;n no enzim&aacute;ticas de succinato en mitocondrias bajo estr&eacute;s oxidativo&quot;.

Developing neurons deprived of trophic support undergo apoptosis mediated by activation of c-Jun N-terminal kinases (JNK) and c-Jun, induction of the Bcl-2 homology 3-only protein Bim(EL), Bax-dependent loss of mitochondrial cytochrome c, and caspase activation. However, the mechanisms that regulate each of these events are only partially understood. Here we show that the prolyl isomerase Pin1 functions as a positive regulator of neuronal death through a c-Jun-dependent mechanism. Ectopic Pin1 promoted caspase-dependent death of NGF-maintained neurons that was associated with an accumulation of Ser(63)-phosphorylated c-Jun in neuronal nuclei and was partially dependent on Bax. Downregulating Pin1 prior to NGF withdrawal suppressed the accumulation of phosphorylated c-Jun, inhibited the release of cytochrome c, and significantly delayed cell death. Pin1 knockdown inhibited NGF deprivation-induced death to a similar extent in Bim (+/+) and Bim (-/-) neurons. The protective effect of Pin1 knockdown was significantly greater than that caused by loss of Bim and nearly identical to that caused by a dominant negative form of c-Jun. Finally, cell death induced by ectopic Pin1 was largely blocked by expression of dominant negative c-Jun. These results suggest a novel mechanism by which Pin1 promotes cell death involving activation of c-Jun.

Pin1 promotes cell death in NGF-dependent neurons through a mechanism requiring c-Jun activity.

Des neurones en d&eacute;veloppement, priv&eacute;s de soutien trophique apoptose m&eacute;di&eacute;e par l&#39;activation de la kinase c-Jun N-terminal (JNK) et c-Jun, induction de la prot&eacute;ine Bcl-2 homologie 3 seule Bim(EL), perte de Bax-d&eacute;pendante du cytochrome c mitochondrial et l&#39;activation de la caspase. Cependant, les m&eacute;canismes qui r&eacute;gissent chacun de ces &eacute;v&eacute;nements ne sont que partiellement compris. Nous d&eacute;montrons que les fonctions de Pin1 prolyl isom&eacute;rase comme un r&eacute;gulateur positif de la mort neuronale par un m&eacute;canisme d&eacute;pendant du c-Jun. Pin1 ectopique promu d&eacute;pendante de la caspase mort neuronale g&eacute;r&eacute;e par NGF qui &eacute;tait associ&eacute;e &agrave; une accumulation de Ser (63)-phosphoryl&eacute;e c-Jun dans noyaux neuronaux et d&eacute;pend partiellement de Bax. Downregulating Pin1 avant le retrait de NGF supprim&eacute;e l&#39;accumulation de phosphoryl&eacute;s c-Jun, inhibe la lib&eacute;ration du cytochrome c et consid&eacute;rablement retard&eacute; la mort cellulaire. PIN1 knockdown inhibe la mort induite par la privation de NGF dans une mesure similaire dans Bim (+ / +) et les neurones de la Bim (- / -). L&#39;effet protecteur du Pin1 knockdown a &eacute;t&eacute; significativement sup&eacute;rieure &agrave; celle caus&eacute;e par la perte du Bim et presque identique &agrave; celle provoqu&eacute;e par une forme n&eacute;gative dominante de c-Jun. Enfin, la mort cellulaire induite par Pin1 ectopique a &eacute;t&eacute; en grande partie bloqu&eacute;e par expression de dominant n&eacute;gatif c-Jun. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent un nouveau m&eacute;canisme par lequel Pin1 favorise l&#39;activation impliquant la mort des cellules de c-Jun.

PIN1 favorise la mort cellulaire dans les neurones de NGF-d&eacute;pendantes &agrave; travers un m&eacute;canisme n&eacute;cessitant une activit&eacute; c-Jun.

I neuroni in via di sviluppo privati di supporto trofico apoptosi mediata dall&#39;attivazione di c-Jun N-terminal chinasi (JNK) e c-Jun, induzione di Bcl-2 homology solo 3 proteina Bim(EL), Bax-dipendente dalla perdita di mitocondriale citocromo c e l&#39;attivazione di caspase. Tuttavia, i meccanismi che regolano ciascuno di questi eventi sono solo parzialmente compresi. Qui vi mostriamo che le funzioni di Prolil isomerasi Pin1 come un regolatore positivo della morte neuronale attraverso un meccanismo di c-Jun-dipendente. Pin1 ectopica promosso caspasi-dipendente morte dei neuroni NGF-mantenuto che &egrave; stato associato con un accumulo di Ser (63)-fosforilato c-Jun in nuclei neuronali e fu parzialmente dipendente da Bax. Downregulating Pin1 prima del ritiro di NGF soppresso l&#39;accumulo di c-Jun fosforilata, inibito il rilascio del citocromo c e significativamente ritardata la morte delle cellule. PIN1 atterramento inibito morte di privazione indotta NGF in misura simile a Bim (+ +) e neuroni Bim (- / -). L&#39;effetto protettivo di atterramento Pin1 era significativamente maggiore rispetto a quella causata dalla perdita di Bim e quasi identica a quella causata da una forma dominante negativa di c-Jun. Infine, morte cellulare indotta da Pin1 ectopica &egrave; stata bloccata in gran parte dall&#39;espressione di c-Jun negativo dominante. Questi risultati suggeriscono un romanzo meccanismo mediante il quale Pin1 promuove delle cellule morte che coinvolgono attivazione di c-Jun.

PIN1 promuove la morte delle cellule in neuroni NGF-dipendente attraverso un meccanismo che richiedono attivit&agrave; di c-Jun.

Las neuronas en desarrollo privadas de apoyo tr&oacute;fica sufren apoptosis mediada por la activaci&oacute;n de quinasas de c-Jun N-terminal (JNK) y c-Jun, inducci&oacute;n de la Bcl-2 homolog&iacute;a s&oacute;lo 3 prote&iacute;na Bim(EL), p&eacute;rdida de Bax-dependiente de mitocondrial citocromo c y la activaci&oacute;n de caspasas. Sin embargo, los mecanismos que regulan cada uno de estos eventos se entienden solamente parcialmente. Aqu&iacute; se muestran que las funciones de Prolil Isomerasa Pin1 como un regulador positivo de la muerte neuronal a trav&eacute;s de un mecanismo dependiente de c-Jun. Pin1 ect&oacute;pico promovido dependiente de caspasa muerte de neuronas NGF mantiene que fue asociada a una acumulaci&oacute;n de Ser (63)-fosforilada c-Jun en n&uacute;cleos neuronales y depend&iacute;a parcialmente de Bax. Downregulating Pin1 antes de la retirada de NGF suprime la acumulaci&oacute;n de c-Jun fosforilada, inhibe la liberaci&oacute;n de citocromo c y retrasar&aacute; su muerte celular. Ca&iacute;da de PIN1 inhibi&oacute; la muerte inducida por la deprivaci&oacute;n de NGF en una medida similar en Bim (+ / +) y las neuronas Bim (- / -). El efecto protector de Pin1 ca&iacute;da fue casi id&eacute;ntica a la causada por una forma negativa dominante de c-Jun y significativamente mayor que la causada por la p&eacute;rdida de Bim. Finalmente, la muerte celular inducida por Pin1 ect&oacute;pico en gran parte fue bloqueada por expresi&oacute;n dominante negativo c-Jun. Estos resultados sugieren un nuevo mecanismo por el cual Pin1 promueve la activaci&oacute;n con muerte de la c&eacute;lula de c-Jun.

PIN1 promueve la muerte celular en las neuronas de NGF-dependiente a trav&eacute;s de un mecanismo que requiere la actividad de c-Jun.

Parkinson's disease (PD) is the most common neurodegenerative movement disorder. Oxidative stress has been associated with the etiology of both sporadic and monogenic forms of PD. The transcription factor Nrf2, a conserved global regulator of cellular antioxidant responses, has been implicated in neuroprotection against PD pathology. However, direct evidence that upregulation of the Nrf2 pathway is sufficient to confer neuroprotection in genetic models of PD is lacking. Expression of the PD-linked gene encoding Î±-synuclein in dopaminergic neurons of Drosophila results in decreased locomotor activity and selective neuron loss in a progressive age-dependent manner, providing a genetically accessible model of PD. Here we show that upregulation of the Nrf2 pathway by overexpressing Nrf2 or its DNA-binding dimerization partner, Maf-S, restores the locomotor activity of Î±-synuclein-expressing flies. Similar benefits are observed upon RNA-interference-mediated downregulation of the prime Nrf2 inhibitor, Keap1, as well as in conditions of keap1 heterozygosity. Consistently, the Î±-synuclein-induced dopaminergic neuron loss is suppressed by Maf-S overexpression or keap1 heterozygosity. Our data validate the sustained upregulation of the Nrf2 pathway as a neuroprotective strategy against PD. This model provides a genetically accessible in vivo system in which to evaluate the potential of additional Nrf2 pathway components and regulators as therapeutic targets.

Genetic activation of Nrf2 signaling is sufficient to ameliorate neurodegenerative phenotypes in a Drosophila model of Parkinson's disease.

Maladie de Parkinson (MP) est la plus courante neurod&eacute;g&eacute;n&eacute;rative de mouvement. Le stress oxydatif a &eacute;t&eacute; associ&eacute; &agrave; l&#39;&eacute;tiologie des formes sporadiques et monog&eacute;niques de PD. Le facteur de transcription Nrf2, un r&eacute;gulateur global conserv&eacute; des r&eacute;ponses de l&#39;antioxydant cellulaire, a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute; dans la neuroprotection contre pathologie PD. Toutefois, une preuve directe que l&#39;augmentation de la voie Nrf2 suffit &agrave; conf&eacute;rer neuroprotection dans des mod&egrave;les g&eacute;n&eacute;tiques de PD fait d&eacute;faut. Expression du g&egrave;ne codant pour &alpha;-synucl&eacute;ine dans les neurones dopaminergiques de la drosophile PD-li&eacute; aboutit &agrave; la diminution de l&#39;activit&eacute; locomotrice et perte s&eacute;lective de neurones progressivement selon l&#39;&acirc;ge, offrant un mod&egrave;le g&eacute;n&eacute;tiquement accessible du PD. Ici, nous montrons que l&#39;augmentation de la voie Nrf2 par Nrf2 surexprimant ou son partenaire de dim&eacute;risation de liaison &agrave; l&#39;ADN, Maf-S, restaure l&#39;activit&eacute; locomotrice des mouches exprimant le &alpha;-synucl&eacute;ine. Prestations de m&ecirc;me nature sont observ&eacute;es lors de RNA interference-induite par la r&eacute;gulation n&eacute;gative du premier inhibiteur Nrf2, Keap1, ainsi que dans des conditions d&#39;h&eacute;t&eacute;rozygotie keap1. R&eacute;guli&egrave;rement, la perte de neurones dopaminergiques induite par le &alpha;-synucl&eacute;ine est supprim&eacute;e par l&#39;h&eacute;t&eacute;rozygotie surexpression ou keap1 Maf-S. Nos donn&eacute;es valident l&#39;upregulation soutenue de la voie Nrf2 comme strat&eacute;gie neuroprotecteur contre PD. Ce mod&egrave;le offre un syst&egrave;me g&eacute;n&eacute;tiquement accessible in vivo permettant d&#39;&eacute;valuer le potentiel des composants de voie Nrf2 suppl&eacute;mentaires et des r&eacute;gulateurs comme cibles th&eacute;rapeutiques.

Activation g&eacute;n&eacute;tique de signalisation Nrf2 est suffisante pour att&eacute;nuer les ph&eacute;notypes neurod&eacute;g&eacute;n&eacute;ratives dans un mod&egrave;le drosophile de la maladie de Parkinson.

Malattia di Parkinson (MdP) &egrave; il disturbo pi&ugrave; comune del movimento neurodegenerative. Lo stress ossidativo &egrave; stato associato con l&#39;eziologia delle forme sporadiche e di monogeniche di PD. Il fattore di trascrizione Nrf2, un regolatore globale conservato delle risposte di antiossidante cellulare, &egrave; stato implicato nella neuroprotezione contro la patologia del PD. Tuttavia, una prova diretta che sovraregolazione del percorso Nrf2 &egrave; sufficiente per conferire neuroprotezione in modelli genetici del PD &egrave; carente. Espressione del gene codifica il &alpha;-sinucleina nei neuroni dopaminergici della drosofila PD-collegato si traduce in una ridotta attivit&agrave; dell&#39;apparato locomotore e perdita selettiva di neuroni in maniera progressiva et&agrave;-dipendente, fornendo un modello geneticamente accessibile del PD. Qui vi mostriamo che sovraregolazione del percorso Nrf2 di Nrf2 all o dei suoi partner di dimerizzazione di DNA-binding, Maf-S, ripristina l&#39;attivit&agrave; dell&#39;apparato locomotore di &alpha;-synuclein-esprimendo mosche. Benefici simili sono stati osservati su interferenza RNA-mediata downregulation del primo inibitore Nrf2, Keap1, cos&igrave; come in condizioni di eterozigosi keap1. Coerentemente, la perdita di Neuroni dopaminergici &alpha;-synuclein-indotta &egrave; soppressa dal eterozigosi iperespressione o keap1 Maf-S. I nostri dati convalidano il upregulation sostenuta del percorso Nrf2 come strategia neuroprotective contro il PD. Questo modello fornisce un sistema geneticamente accessibile in vivo in cui valutare il potenziale dei componenti aggiuntivi di pathway Nrf2 e regolatori come bersagli terapeutici.

Attivazione genetica di Nrf2 segnalazione &egrave; sufficiente a migliorare neurodegenerative fenotipi in un modello di Drosophila del morbo di Parkinson.

Enfermedad de Parkinson (EP) es el trastorno de movimiento m&aacute;s frecuente de neurodegenerativas. El estr&eacute;s oxidativo ha sido asociado con la etiolog&iacute;a de las formas espor&aacute;dicas y monog&eacute;nicas de PD. El factor de transcripci&oacute;n Nrf2, un regulador global conservado de respuestas antioxidante celular, se ha implicado en la neuroprotecci&oacute;n contra patolog&iacute;a PD. Sin embargo, evidencia directa que upregulation de la v&iacute;a de la Nrf2 es suficiente para conferir carece de neuroprotecci&oacute;n en modelos gen&eacute;ticos de la EP. Expresi&oacute;n del gen ligado PD codificaci&oacute;n &alpha;-sinucle&iacute;na en las neuronas dopamin&eacute;rgicas de Drosophila resulta en la disminuci&oacute;n de la actividad locomotriz y p&eacute;rdida neuronal selectiva de una manera progresiva de dependientes de la edad, proporcionando un modelo gen&eacute;tico accesible de la EP. A continuaci&oacute;n os mostramos esa regulaci&oacute;n al alza de la v&iacute;a de la Nrf2 por Nrf2 sobreexpresando o su socio de dimerizaci&oacute;n de uni&oacute;n al ADN, Maf-S, restaura la actividad locomotriz de &alpha;-sinucle&iacute;na-expresando moscas. Se observan beneficios similares a mediada por la interferencia del RNA downregulation del primer inhibidor de la Nrf2, Keap1, as&iacute; como en condiciones de keap1 heterocigoto. Consecuentemente, la p&eacute;rdida de neuronas dopamin&eacute;rgicas inducido por &alpha;-sinucle&iacute;na es suprimida por el heterocigoto sobreexpresi&oacute;n o keap1 Maf-S. Nuestros datos validar la regulaci&oacute;n al alza sostenida de la v&iacute;a de la Nrf2 como estrategia neuroprotectora contra PD. Este modelo proporciona un sistema gen&eacute;ticamente accesible in vivo para evaluar el potencial de los componentes adicionales de camino de Nrf2 y reguladores como dianas terap&eacute;uticas.

Activaci&oacute;n gen&eacute;tica de Nrf2 se&ntilde;alizaci&oacute;n es suficiente para mejorar neurodegenerativas fenotipos en un modelo de Drosophila de la enfermedad de Parkinson.

Article	Year
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Targeting hypoxia-inducible factor (HIF) as a therapeutic strategy for CNS disorders. Current drug targets. CNS and neurological disorders\| PubMed ID: 15723616	2005
A shortcut to mitochondrial signaling and pathology: a commentary on "Nonenzymatic formation of succinate in mitochondria under oxidative stress". Free radical biology & medicine\| PubMed ID: 16781451	2006
Pin1 promotes cell death in NGF-dependent neurons through a mechanism requiring c-Jun activity. Journal of neurochemistry\| PubMed ID: 18419764	2008
Genetic activation of Nrf2 signaling is sufficient to ameliorate neurodegenerative phenotypes in a Drosophila model of Parkinson's disease. Disease models & mechanisms\| PubMed ID: 21719443	2011

Maria Cecilia Barone

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