biosensor-for-detection-antibiotic-resistant-staphylococcus

Biosensor for Detection of Antibiotic Resistant Staphylococcus Bacteria

A structurally transformed lytic bacteriophage having a broad host range of Staphylococcus aureus strains and a penicillin-binding protein (PBP 2a) ...

Keesler Air Force Base

The goals of this laboratory model were to evaluate the performance of the surgical team and endolaparoscopic techniques in the porcine model of infrarenal abdominal aortic repair.

A porcine model for endolaparoscopic abdominal aortic repair and endoscopic training.

Les objectifs de ce mod&egrave;le de laboratoire &eacute;taient d&#39;&eacute;valuer la performance de l&#39;&eacute;quipe et endolaparoscopic les techniques chirurgicales dans le mod&egrave;le porcin d&#39;an&eacute;vrisme abdominal aortique r&eacute;paration.

Un mod&egrave;le porcin de r&eacute;paration aortique abdominal d&#39;endolaparoscopic et de la formation endoscopique.

Sono stati gli obiettivi di questo modello di laboratorio per valutare le prestazioni delle tecniche chirurgiche team ed endolaparoscopic nel modello porcino di infrarenal riparazione dell&#39;aorta addominale.

Un modello porcino per la riparazione dell&#39;aorta addominale endolaparoscopic e formazione endoscopica.

To review recent advances in the diagnosis and treatment of extraesophageal reflux.

Contemporary diagnostic and management techniques for extraesophageal reflux disease.

D&#39;examiner les progr&egrave;s r&eacute;cents dans le diagnostic et le traitement du reflux extraoesophagiens.

Techniques de diagnostic et de gestion contemporaine pour la maladie de reflux extraoesophagiens.

Per esaminare i recenti progressi nella diagnosi e nel trattamento della malattia da reflusso extraesophageal.

Tecniche contemporanee di diagnostica e gestione per malattia da reflusso extraesophageal.

Abbiamo selezionato da sonde di libreria dei fagi il panorama che si legano preferenzialmente le cellule di typhimurium Salmonella confrontate con altre Enterobacteriaceae. La specificit&agrave; delle sonde dei fagi per S. typhimurium &egrave; stata analizzata il test dei fagi-acquisizione, l&#39;analisi enzima-collegata dell&#39;immunosorbente (ELISA) e il test di precipitazione. L&#39;interazione delle sonde rappresentante con S. typhimurium &egrave; stato caratterizzato da fluorescenza-attivato delle cellule ordinamento (FACS) e fluorescenti, ottica e microscopia elettronica. I risultati mostrano che la libreria dei fagi di paesaggio &egrave; una ricca fonte di sonde specifiche e robuste per la S. typhimurium adatto per uso a lungo termine in dispositivi di monitoraggio continui e biosorbents.

Il panorama dei fagi sonde per Salmonella typhimurium.

We selected from landscape phage library probes that bind preferentially Salmonella typhimurium cells compared with other Enterobacteriaceae. The specificity of the phage probes for S. typhimurium was analyzed by the phage-capture test, the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the precipitation test. Interaction of representative probes with S. typhimurium was characterized by fluorescence-activated cell sorting (FACS), and fluorescent, optical and electron microscopy. The results show that the landscape phage library is a rich source of specific and robust probes for S. typhimurium suitable for long-term use in continuous monitoring devices and biosorbents.

Landscape phage probes for Salmonella typhimurium.

Nous avons s&eacute;lectionn&eacute; des sondes de biblioth&egrave;que de phage paysage qui lient pr&eacute;f&eacute;rentiellement les cellules de Salmonella typhimurium par rapport aux autres Enterobacteriaceae. La sp&eacute;cificit&eacute; des sondes phage pour Salmonella typhimurium a &eacute;t&eacute; analys&eacute;e par le test de phage-capture, l&#39;enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) et le test de pr&eacute;cipitation. Interaction des sondes repr&eacute;sentatives &agrave; S. typhimurium a &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;e par tri cellulaire activ&eacute;s par fluorescence (FACS) et fluorescent, optique et microscopie &eacute;lectronique. Les r&eacute;sultats montrent que la biblioth&egrave;que de bact&eacute;riophage de paysage est une source riche de sondes sp&eacute;cifiques et robustes pour Salmonella typhimurium utilisable &agrave; long terme dans des dispositifs de surveillance continues et biosorbants.

Paysage les sondes de phage Salmonella typhimurium.

Proof-in-concept biosensors were prepared for the rapid detection of Salmonella typhimurium in solution, based on affinity-selected filamentous phage prepared as probes physically adsorbed to piezoelectric transducers. Quantitative deposition studies indicated that approximately 3 x 10(10)phage particles/cm(2) could be irreversibly adsorbed for 1 h at room temperature to prepare working biosensors. The quality of phage deposition was monitored by fluorescent microscopy. Specific-bacterial binding resulted in resonance frequency changes of prepared sensors, which were evaluated using linear regression analysis. Sensors possessed a rapid response time of <180 s, had a low-detection limit of 10(2)cells/ml and were linear over a range of 10(1)-10(7)cells/ml with a sensitivity of 10.9 Hz per order of magnitude of S. typhimurium concentration. Viscosity effects due to increasing bacterial concentration and non-specific binding were not significant to the piezoelectric platform as confirmed by dose-response analysis. Phage-bacterial binding was confirmed by fluorescence and scanning electron microscopy. Overall, phage may constitute effective bioreceptors for use with analytical platforms for detecting and monitoring bacterial agents, including use in food products and possibly biological warfare applications.

Affinity-selected filamentous bacteriophage as a probe for acoustic wave biodetectors of Salmonella typhimurium.

Validation de biocapteurs ont &eacute;t&eacute; pr&eacute;par&eacute;s pour la d&eacute;tection rapide de Salmonella typhimurium en solution, bas&eacute;e sur l&#39;affinit&eacute;-s&eacute;lectionn&eacute; le bact&eacute;riophage filamenteux pr&eacute;par&eacute; comme sondes transducteurs physiquement adsorb&eacute;es &agrave; pi&eacute;zo&eacute;lectrique. &Eacute;tudes des d&eacute;p&ocirc;ts quantitative a indiqu&eacute; qu&#39;environ 3 x 10 (10) phage particles/cm(2) pourrait &ecirc;tre adsorb&eacute; irr&eacute;versiblement pendant 1 h &agrave; temp&eacute;rature ambiante pour pr&eacute;parer le biocapteurs de travail. La qualit&eacute; des d&eacute;p&ocirc;ts de phage a &eacute;t&eacute; suivie par microscopie &agrave; fluorescence. Liaison bact&eacute;rienne sp&eacute;cifique a entra&icirc;n&eacute; des changements de fr&eacute;quence de r&eacute;sonance de capteurs dispos&eacute;s, qui ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;s &agrave; l&#39;aide d&#39;une analyse de r&eacute;gression lin&eacute;aire. Capteurs poss&eacute;daient un temps de r&eacute;ponse rapide de &lt; 180 s, avait une limite de d&eacute;tection de basse de 10 (2) les cellules/ml et sont lin&eacute;aires sur une plage de cellules/ml de 1-7 avec une sensibilit&eacute; de 10,9 Hz par ordre de grandeur de concentration de S. typhimurium. Les effets de viscosit&eacute; due &agrave; l&#39;augmentation de la concentration bact&eacute;rienne et non-sp&eacute;cifiques n&#39;&eacute;taient pas significatives &agrave; la plate-forme pi&eacute;zo&eacute;lectrique, tel que confirm&eacute; par l&#39;analyse de la relation dose-effet. Liaison de phage bact&eacute;rienne a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e par fluorescence et de la microscopie &eacute;lectronique &agrave; balayage. Dans l&#39;ensemble, le phage peut constituer bior&eacute;cepteurs efficace pour une utilisation avec des plateformes analytiques pour la d&eacute;tection et la surveillance des agents bact&eacute;riologiques, y compris l&#39;utilisation dans les produits alimentaires et, &eacute;ventuellement, des applications de guerre biologique.

Bact&eacute;riophage filamenteux &agrave; affinit&eacute;-s&eacute;lectionn&eacute; comme sonde pour cha&icirc;ne acoustic wave biod&eacute;tecteurs de Salmonella typhimurium.

Biosensori in prova sono stati preparati per la rilevazione rapida di Salmonella typhimurium in soluzione, basata su affinit&agrave;-selezionato di fago filamentoso preparato come sonde fisicamente adsorbiti a piezoelettrico trasduttori. Studi quantitativi deposizione indicato che circa 3 x 10 (10) particles/cm(2) dei fagi potrebbe essere irreversibilmente adsorbita per 1 h a temperatura ambiente per preparare il lavoro biosensori. La qualit&agrave; di deposizione dei fagi &egrave; stata monitorata da microscopia di fluorescenza. Associazione batterica specifica ha provocato cambiamenti di frequenza di risonanza dei sensori pronti, che sono stati valutati mediante analisi di regressione lineare. Sensori ha posseduto un tempo di risposta rapido &lt; 180 s, aveva un limite basso-10 (2) cellule/ml e sono stati lineari in un intervallo di 1-7 cellule/ml con una sensibilit&agrave; di 10,9 Hz per ordine di grandezza della concentrazione di S. typhimurium. Gli effetti di viscosit&agrave; a causa della crescente concentrazione batterica e legame non specifico non erano significativi alla piattaforma piezoelettrica, come confermato dalle analisi dose-risposta. Associazione batterica dei fagi &egrave; stata confermata da fluorescenza e microscopia elettronica a scansione. In generale, dei fagi possono costituire bioreceptors efficace per l&#39;uso con piattaforme analitiche per la rilevazione e il monitoraggio di agenti batterici, compreso l&#39;uso in prodotti alimentari e, eventualmente, applicazioni di guerra biologica.

Affinit&agrave;-selezionato filamentosa batteriofago come una sonda per biodetectors onda acustica di Salmonella typhimurium.

Staphylococcus aureus (S. aureus)-specific bacteriophage was used as a probe for detection of methicillin-resistant S. aureus (MRSA) in aqueous solution using a novel optical method. Biorecognition phage monolayers transferred to glass substrates using Langmuir-Blodgett (LB) technique were exposed individually to MRSA in solution at logarithmic concentrations ranging from 10(6) to 10(9)cfu/ml, and observed for real-time binding using a CytoViva optical light microscope system. Results indicate that LB monolayers possessed high levels of elasticity (K), measuring 22 and 29 mN/m for 10(9) and 10(11)pfu/ml phage concentrations, respectively. Near-instantaneous MRSA-phage binding produced 33+/-5%, 10+/-1%, 1.1+/-0.1%, and 0.09+/-0.01% coverage of the substrate that directly correlated to a decrease in MRSA concentrations of 10(9), 10(8), 10(7), and 10(6)cfu/ml. The exclusive selectivity of phage monolayers was verified with Salmonella enterica subsp. enterica serovar typhimurium (S. typhimurium) and Bacillus subtilis.

Real-time optical detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using lytic phage probes.

Staphylocoque dor&eacute; (Staphylococcus aureus)-bact&eacute;riophage sp&eacute;cifique a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; comme une sonde pour la d&eacute;tection de m&eacute;thicilline S. aureus (SARM) en solution aqueuse &agrave; l&#39;aide d&#39;une m&eacute;thode optique originale. Monocouches de phage bioreconnaissance transf&eacute;r&eacute;s &agrave; des substrats de verre &agrave; l&#39;aide de la technique de Langmuir-Blodgett (LB) ont &eacute;t&eacute; expos&eacute;s individuellement au SARM en solution &agrave; logarithmiques concentrations allant de 10 (6) &agrave; 10 (9) UFC/ml et observ&eacute;s pour la liaison en temps r&eacute;el &agrave; l&#39;aide d&#39;un syst&egrave;me de microscopie optique CytoViva. Les r&eacute;sultats indiquent que LB monocouches poss&egrave;dent des niveaux &eacute;lev&eacute;s d&#39;&eacute;lasticit&eacute; (K), 22 et 29 mN/m pour 10 9 et 10 (11) de la mesure des concentrations de phage UFP/ml, respectivement. Liaison quasi instantan&eacute;e de SARM-phage produit 33 +/-5 %, 10 &plusmn; 1 %, 1,1 +/-0,1 % et la couverture de 0.09+/-0.01% du substrat qui directement corr&eacute;l&eacute;e &agrave; une diminution des concentrations de SARM de 10 (9), 10 (8), 10 (7) et 10 (6) UFC/ml. La s&eacute;lectivit&eacute; exclusive de monocouches phage a &eacute;t&eacute; v&eacute;rifi&eacute;e avec Salmonella enterica subsp. enterica serovar typhimurium (Salmonella typhimurium) et de Bacillus subtilis.

Sondes de d&eacute;tection optique en temps r&eacute;el de Staphylococcus aureus m&eacute;thicilline-r&eacute;sistant en utilisant un phage lytique.

Staphylococcus aureus (S. aureus)-specifico batteriofago era usata come una sonda per il rilevamento di meticillino-resistenti Staphylococcus aureus (MRSA) in soluzione acquosa mediante un metodo ottico romanzo. Monostrati di fago Biorecognition trasferiti a substrati di vetro utilizzando la tecnica di Langmuir-Blodgett (LB) esposti singolarmente per MRSA in soluzione a concentrazioni logaritmiche che vanno da 10 a 10 (9) cfu/ml e fu osservate per l&#39;associazione in tempo reale utilizzando un sistema ottico del microscopio CytoViva. I risultati indicano che LB monostrati possedevano alti livelli di elasticit&agrave; (K), 22 e 29 mN/m per arrecavano e 10 (11) di misura concentrazioni dei fagi pfu/ml, rispettivamente. Associazione di MRSA-fago immediato prodotto 33 + 5%, 10 + /-1%, 1,1 + /-0,1% e la copertura 0.09+/-0.01% del substrato che direttamente correlate ad una diminuzione della concentrazione di MRSA di riesami, 10, paragrafo 8, 10 e 10 (6) cfu/ml. La selettivit&agrave; esclusiva di monostrati dei fagi &egrave; stata verificata con Salmonella enterica subsp. enterica sierotipo typhimurium (S. typhimurium) e Bacillus subtilis.

Sonde di rilevamento ottico in tempo reale di Staphylococcus aureus meticillino-resistente utilizzando dei fagi litici.

We demonstrate a rapid method for enzyme immobilization directly on a waveguide surface by encapsulation in a silica matrix. Organophosphate hydrolase (OPH), an enzyme that catalytically hydrolyzes organophosphates, was used as a model enzyme to demonstrate the utility of lysozyme-mediated silica formation for enzyme stabilization. Silica morphology and the efficiency of OPH encapsulation were directly influenced by the precursor choice used in silica formation. Covalent attachment of the lysozyme template directly to the waveguide surface provided a stable basis for silica formation and significantly increased the surface area for OPH encapsulation. OPH conjugated to a pH-responsive fluorophore was encapsulated in silica and patterned to a waveguide surface to demonstrate the immobilization strategy for the development of an organophosphate array biodetector. Silica-encapsulated OPH retained its catalytic activity for nearly 60 days with a detection limit of paraoxon of approximately 35 microM. The encapsulation technique provides a potentially versatile tool with specific application to biosensor development.

Lysozyme-mediated formation of protein-silica nano-composites for biosensing applications.

Nous d&eacute;montrons une m&eacute;thode rapide pour l&#39;immobilisation d&#39;enzymes directement sur une surface de guide d&#39;ondes par encapsulation dans une matrice de silice. Organophosphor&eacute;s hydrolase (OPH), une enzyme qui hydrolyse catalytiquement organophosphates, servait une enzyme mod&egrave;le pour d&eacute;montrer l&#39;utilit&eacute; de la formation pour la stabilisation de l&#39;enzyme induite par le lysozyme de silice. Morphologie de la silice et l&#39;efficacit&eacute; de l&#39;encapsulation OPH ont &eacute;t&eacute; directement influenc&eacute;s par le choix de pr&eacute;curseurs utilis&eacute; dans la formation de silice. Covalente du mod&egrave;le lysozyme directement sur la surface de guide d&#39;ondes a fourni une base stable pour la formation de silice et augment&eacute; de fa&ccedil;on significative la surface pour l&#39;encapsulation de l&#39;OPH. OPH conjugu&eacute; &agrave; un fluorophore sensibles aux pH a &eacute;t&eacute; encapsul&eacute; en silice et model&eacute; sur une surface de guide d&#39;ondes pour d&eacute;montrer la strat&eacute;gie de l&#39;immobilisation pour l&#39;&eacute;laboration d&#39;un tableau organophosphor&eacute;s biod&eacute;tecteur. OPH de silice encapsul&eacute; conserv&eacute; son activit&eacute; catalytique pour pr&egrave;s de 60 jours avec une limite de d&eacute;tection de paraoxon d&#39;environ 35 microM. La technique d&#39;encapsulation fournit un outil potentiellement polyvalent avec une application sp&eacute;cifique au d&eacute;veloppement de biocapteur.

Formation induite par le lysozyme de prot&eacute;ine-silice nano-composites pour des applications de biod&eacute;tection.

Mostriamo un metodo rapido per l&#39;immobilizzazione di enzimi direttamente su una superficie di guida d&#39;onda di incapsulamento in una matrice di silice. Organofosfati idrolasi (OPH), un enzima che idrolizza cataliticamente organofosfati, &egrave; stato usato come un enzima modello per dimostrare l&#39;utilit&agrave; della formazione di silice lisozima-mediato per la stabilizzazione dell&#39;enzima. Morfologia di silice e l&#39;efficienza dell&#39;incapsulamento OPH erano direttamente influenzati dalla scelta precursore usata nella formazione di silice. Attacco covalente del modello lisozima direttamente alla superficie di guida d&#39;onda fornito una base stabile per la formazione di silice e significativamente aumentato la superficie per incapsulamento OPH. OPH coniugato a un fluoroforo pH-sensibile &egrave; stato incapsulato in silice e modellata su una superficie di guida d&#39;onda per illustrare la strategia di immobilizzazione per lo sviluppo di una matrice organofosfati biodetector. Incapsulato in silice OPH mantenne la sua attivit&agrave; catalitica per quasi 60 giorni con un limite di rilevazione di paraoxon di microM circa 35. La tecnica dell&#39;incapsulamento fornisce uno strumento potenzialmente versatile con applicazione specifica per lo sviluppo di biosensori.

Lisozima-mediata la formazione di proteine-silice nano-materiali compositi per applicazioni di biosensori.

A new inexpensive and simple method for preserving microorganisms has been developed. Natural polymers of acacia gum and pullulan were used to preserve model bacteria Escherichia coli and Bacillus subtilis via immobilization and storage under various conditions. Formulation of E. coli and B. subtilis in acacia gum significantly increased the viability of both cultures during desiccation at 40 degrees C as well as during the storage at various temperatures and relative humidity. In the ranges of temperatures and humidity used in experiments, the high humidity affected the viability of E. coli more than high temperature. Thermodynamic parameters for E. coli thermal degradation were used for quantification of results and characterization of the preservation process. Viability of B. subtilis in acacia gum polymer was not significantly changed during the storage in the temperature and humidity experiments. The number of viable B. subtilis recovered after storage in pullulan, and in PBS under various humidity conditions was 1-2 logs less in comparison with the number of cells before storage. It was found that acacia gum provides better protection than pullulan for both bacteria during the preservation process.

Preservation of bacteria in natural polymers.

Une nouvelle m&eacute;thode simple et peu co&ucirc;teuse pour pr&eacute;server les microorganismes a &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;e. Polym&egrave;res naturels de gomme d&#39;acacia et de pullulan servaient &agrave; pr&eacute;server le mod&egrave;le bact&eacute;ries Escherichia coli et Bacillus subtilis via immobilisation et stockage dans des conditions diff&eacute;rentes. Formulation d&#39;e. coli et B. subtilis en gomme arabique a significativement augment&eacute; la viabilit&eacute; des deux cultures pendant la dessiccation &agrave; 40 degr&eacute;s C, ainsi que lors du stockage &agrave; diff&eacute;rentes temp&eacute;ratures et humidit&eacute; relative. Dans les gammes de temp&eacute;ratures et d&#39;humidit&eacute; utilis&eacute;s dans des exp&eacute;riences, la forte humidit&eacute; touch&eacute;s la viabilit&eacute; d&#39;Escherichia coli &agrave; plus haute temp&eacute;rature. Param&egrave;tres thermodynamiques de la d&eacute;gradation thermique d&#39;e. coli ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour la quantification des r&eacute;sultats et de la caract&eacute;risation du processus de pr&eacute;servation. Viabilit&eacute; de b. subtilis en acacia &agrave; gomme polym&egrave;re ne varia pas significativement durant le stockage dans les exp&eacute;riences de temp&eacute;rature et d&#39;humidit&eacute;. Le nombre de viable b. subtilis r&eacute;cup&eacute;r&eacute; apr&egrave;s stockage dans pullulane et dans du PBS sous diverses conditions d&#39;humidit&eacute; &eacute;tait de 1-2 billes de moins par rapport au nombre de cellules avant du ranger. Il a &eacute;t&eacute; constat&eacute; que gomme d&#39;acacia prot&egrave;ge mieux que pullulane pour ces deux bact&eacute;ries pendant le processus de pr&eacute;servation.

Conservation des bact&eacute;ries en polym&egrave;res naturels.

&Egrave; stato sviluppato un nuovo metodo semplice e poco costoso per conservazione microrganismi. Polimeri naturali di gomma di acacia e di pullulan erano usati per conservare il modello batteri Escherichia coli e Bacillus subtilis mediante immobilizzazione e archiviazione in varie condizioni. Formulazione di e. coli e B. subtilis in gomma di acacia aumentato significativamente la sopravvivenza di entrambe le culture durante l&#39;essiccazione a 40 gradi C, cos&igrave; come durante l&#39;immagazzinaggio a varie temperature e umidit&agrave; relativa. Nelle gamme di temperature e umidit&agrave; usato negli esperimenti, l&#39;alta umidit&agrave; colpite la vitalit&agrave; di e. coli pi&ugrave; che ad alta temperatura. Parametri termodinamici per degradazione termica di e. coli sono stati utilizzati per la quantificazione dei risultati e la caratterizzazione del processo di conservazione. Redditivit&agrave; di b. subtilis in polimero di gomma di acacia non &egrave; stato significativamente modificato durante l&#39;immagazzinaggio in esperimenti di temperatura e umidit&agrave;. Il numero di b. subtilis vitali recuperato dopo immagazzinaggio di pullulan e in PBS in diverse condizioni di umidit&agrave; era 1-2 tronchi in meno rispetto al numero di cellule prima dell&#39;immagazzinamento. Si scopr&igrave; che la gomma d&#39;acacia fornisce maggiore protezione rispetto pullulan per entrambi batteri durante il processo di conservazione.

Conservazione dei batteri in polimeri naturali.

Salmonella enterica subsp. enterica serotypes are leading etiological agents of food-borne gastroenteritis. Traditional identification is laborious and time intensive. Faster molecular methods may allow early identification in contaminated food products. We developed a real-time, fluorescence resonance energy transfer hybridization probe polymerase chain reaction (PCR) assay for S. enterica serotypes on the basis of the exclusive presence of the apeE gene in Salmonella Typhimurium. Assay sensitivity for 12 S. enterica serotypes was as low as 1.87 x 10(2) genomic equivalents per milliliter. PCR efficiency was 94% and the dynamic range was linear over six orders of magnitude from 10(0) to 10(6) copies. The lower limit of detection for 12 different food matrices was between 1.5 x 10(2) and 1.5 x 10(5) CFU/mL without pre-enrichment. When combined with high-throughput automated DNA extraction, 32 food specimens were processed and assayed in less than 2 hours, allowing rapid, specific, sensitive detection of S. enterica serotypes in food products.

Real-time FRET PCR assay for Salmonella enterica serotype detection in food.

Enterica s&eacute;rotypes de Salmonella enterica subsp sont les principaux agents &eacute;tiologiques de la gastro-ent&eacute;rite d&#39;origine alimentaire. Identification traditionnelle est laborieuse et temps de forte intensit&eacute;. Plus vite les m&eacute;thodes mol&eacute;culaires peuvent permettre l&#39;identification pr&eacute;coce dans les produits alimentaires contamin&eacute;s. Nous avons d&eacute;velopp&eacute; a en temps r&eacute;el, fluorescence resonance &eacute;nergie transfert hybridation sonde polym&eacute;rase chain reaction (PCR) assay for s&eacute;rotypes de S. enterica sur la base de la pr&eacute;sence exclusive du g&egrave;ne apeE chez Salmonella Typhimurium. Sensibilit&eacute; de l&#39;&eacute;ssai pour 12 s&eacute;rotypes de S. enterica &eacute;tait aussi basses que 1,87 x 10 (2) g&eacute;nomique &eacute;quivalents par millilitre. Efficacit&eacute; de la PCR &eacute;tait de 94 % et la gamme dynamique est lin&eacute;aires sur six ordres de grandeur de 10(0) &agrave; 10 (6) copies. La limite inf&eacute;rieure de d&eacute;tection pour les 12 matrices alimentaires diff&eacute;rents &eacute;tait de 1,5 x 10 (2) &agrave; 1,5 x 10 5 UFC/mL sans pr&eacute;enrichissement. Lorsqu&#39;il est combin&eacute; avec l&#39;extraction de l&#39;ADN haut d&eacute;bit automatis&eacute;e, 32 &eacute;chantillons de nourriture ont &eacute;t&eacute; trait&eacute;es et analys&eacute;es en moins de 2 heures, permettant &agrave; rapide, d&eacute;tection sp&eacute;cifique et sensible de s&eacute;rotypes de S. enterica dans les produits alimentaires.

Ne vous inqui&eacute;tez PCR en temps r&eacute;el pour Salmonella enterica s&eacute;rotype d&eacute;tection dans les aliments.

Sierotipi di Salmonella enterica subsp. enterica sono principali agenti eziologici di gastroenterite tossinfezioni alimentari. Identificazione tradizionale &egrave; ad alta intensit&agrave; di tempo e laborioso. Metodi molecolare pi&ugrave; veloce possono consentire identificazione precoce nei prodotti alimentari contaminati. Abbiamo sviluppato un in tempo reale, fluorescenza risonanza energia trasferimento ibridazione sonda polymerase chain reaction (PCR) dosaggio per sierotipi di S. enterica in base all&#39;esclusiva presenza del gene apeE in Salmonella Typhimurium. Sensibilit&agrave; del dosaggio per 12 sierotipi di S. enterica era pi&ugrave; basso di 1,87 x paragrafo genomica equivalenti per millilitro. L&#39;efficienza PCR &egrave; stato di 94% e la gamma dinamica &egrave; stata lineari in sei ordini di grandezza da 10(0) a 10 copie. Il limite inferiore di rilevamento per 12 matrici alimentari diverse era tra 1,5 x 10, paragrafo 2 e 1,5 x 5 CFU/mL senza pre-enrichment. Quando combinato con estrazione del DNA automatizzati high-throughput, 32 campioni di cibo sono stati elaborati e analizzati in meno di 2 ore, consentendo rapidi, specifico e sensibile, rilevazione dei sierotipi di S. enterica nei prodotti alimentari.

Dosaggio di FRET PCR in tempo reale per rilevamento di Salmonella enterica sierotipo in cibo.

Presenza di neoplasia lobulare intraepiteliale (LIN) non &egrave; regolarmente segnalata come parte della valutazione del margine nella terapia di conservazione del seno (BCT) come nel carcinoma duttale in situ (DCIS). Con nuove prove emergenti di LIN come lesione possibile precursore, l&#39;ipotesi &egrave; che LIN al margine pu&ograve; aumentare il rischio di recidiva locale con BCT. L&#39;obiettivo &egrave; di determinare se vi &egrave; un aumento dell&#39;incidenza di recidiva quando LIN si trova ai margini chirurgici sul BCT.

Significato di neoplasia intraepiteliale lobulare ai margini dei campioni di conservazione del seno: un rapporto di 38 casi e revisione della letteratura.

Presence of lobular intraepithelial neoplasia (LIN) is not routinely reported as part of margin assessment in breast conservation therapy (BCT) as in ductal carcinoma in situ (DCIS). With new emerging evidence of LIN as possible precursor lesion, the hypothesis is that LIN at the margin may increase the risk of local recurrence with BCT. The aim is to determine whether there is an increase incidence of recurrence when LIN is found at surgical margins on BCT.

Significance of lobular intraepithelial neoplasia at margins of breast conservation specimens: a report of 38 cases and literature review.

Pr&eacute;sence de n&eacute;oplasie intra-&eacute;pith&eacute;liale lobulaire (LIN) n&#39;est pas syst&eacute;matiquement signal&eacute;e dans le cadre de l&#39;&eacute;valuation de la marge dans le traitement de conservation du sein (BCT) que dans le carcinome canalaire in situ (CCIS). Avec les nouvelles preuves &eacute;mergent de LIN comme l&eacute;sion pr&eacute;curseur possible, l&#39;hypoth&egrave;se est que le LIN &agrave; la marge peut augmenter le risque de r&eacute;cidive locale avec BCT. Le but est de d&eacute;terminer s&#39;il y a une augmentation de l&#39;incidence de r&eacute;cidive lorsque LIN est d&eacute;tect&eacute;e &agrave; marges chirurgicales sur BCT.

Importance de la n&eacute;oplasie intra-&eacute;pith&eacute;liale lobulaire aux marges des &eacute;chantillons de conservation du sein : un rapport de 38 cas et revue de la litt&eacute;rature.

Emergency departments (EDs) across the country become increasingly crowded. Methods to improve patient satisfaction are becoming increasingly important.

Patient satisfaction in the emergency department and the use of business cards by physicians.

Services d&#39;urgence (EDs) &agrave; travers le pays deviennent de plus en plus encombr&eacute;. M&eacute;thodes pour am&eacute;liorer la satisfaction des patients deviennent de plus en plus importants.

Satisfaction des patients &agrave; l&#39;urgence et l&#39;utilisation des cartes de visite par les m&eacute;decins.

Reparti di emergenza (EDs) in tutto il paese diventano sempre pi&ugrave; affollati. Metodi per migliorare la soddisfazione dei pazienti stanno diventando sempre pi&ugrave; importante.

Soddisfazione del paziente nel reparto di emergenza e l&#39;utilizzo di biglietti da visita dai medici.

Stable, insoluble Langmuir monolayer films composed of Staphylococcus aureus-specific lytic bacteriophage were formed at an air-water interface and characterized. The phage monolayer was very strong, withstanding a surface pressure of âˆ¼40 mN/m at 20 Â°C. The surface pressure-area (Î -A) isotherm possessed a shoulder at âˆ¼7 Ã— 10(4)nm(2)/phage particle, attributed to a change in phage orientation at the air-water interface from horizontal to vertical capsid-down/tail-up orientation as surface pressure was increased. The Î -A-dependence was accurately described using the Volmer equation of state, assuming horizontal orientation to an air-water interface at low surface pressures with an excluded area per phage particle of 4.6 Ã— 10(4)nm(2). At high pressures phage particles followed the space-filling densely packed disks model with a specific area of 8.5 Ã— 10(3)nm(2)/phage particle. Lytic phage monolayers were transferred onto gold-coated silica substrates from the air-water interface at a constant surface pressure of 18 mN/m by Langmuir-Blodgett method, then dried and analyzed by scanning electron microscopy (SEM) and ellipsometry. Phage specific adsorption (Î“) in Langmuir-Blodgett (LB) films measured by SEM was consistent with that calculated independently from Î -A isotherms at the transfer surface pressure of 18 mN/m (Î“=23 phage particles/Î¼m(2)). The 50 nm-thickness of phage monolayer measured by ellipsometer agreed well with the horizontal phage average size estimated by SEM. Surface properties of phage Langmuir monolayer compare well with other monolayers formed from nano- and micro-particles at the air-water interface and similar to that of classic amphiphiles 1,2-diphytanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (phospholipid) and stearic acid.

Phage Langmuir monolayers and Langmuir-Blodgett films.

Films de monocouche de Langmuir stables, insolubles compos&eacute; de Staphylococcus aureus sp&eacute;cifiques bact&eacute;riophage lytique ont &eacute;t&eacute; form&eacute;es &agrave; l&#39;interface air-eau et caract&eacute;ris&eacute;s. La monocouche phage a &eacute;t&eacute; tr&egrave;s solide, r&eacute;sistant &agrave; une pression de surface de &sim;40 mN/m &agrave; 20 &deg; C. L&#39;isotherme de pression-superficie (&Pi;-A) poss&eacute;dait un &eacute;paulement &agrave; environ 7 &times; 4 nm 2/phage particule attribu&eacute; &agrave; un changement dans l&#39;orientation du phage &agrave; l&#39;interface air-eau d&#39;horizontal &agrave; orientation verticale de capside-down/queue-up comme pression de surface a &eacute;t&eacute; augment&eacute;e. La &Pi;-A-d&eacute;pendance a &eacute;t&eacute; d&eacute;crite avec pr&eacute;cision &agrave; l&#39;aide de l&#39;&eacute;quation d&#39;&Eacute;tat, en supposant une orientation horizontale &agrave; une interface air-eau &agrave; basse pression de surface avec une superficie exclue par particule phage de 4,6 &times; 10(4)nm(2) de Volmer. &Agrave; des pressions &eacute;lev&eacute;es particules phagiques a suivi le mod&egrave;le de disques dense remplissant l&#39;espace avec une zone sp&eacute;cifique de particule de 2/phage 8,5 &times; 3 nm. Monocouches de bact&eacute;riophages lytiques ont &eacute;t&eacute; transf&eacute;r&eacute;s sur des substrats de silice or-enduits de l&#39;interface air-eau &agrave; une pression de surface constante de 18 mN/m par m&eacute;thode de Langmuir-Blodgett, puis s&eacute;ch&eacute; et analys&eacute;s par electron microscope &agrave; balayage (SEM) et ellipsom&eacute;trie. Adsorption sp&eacute;cifique de phage (&Gamma;) dans les films de Langmuir-Blodgett (LB) mesur&eacute;e par SEM &eacute;tait conforme &agrave; celle calcul&eacute;e ind&eacute;pendamment de &Pi;-a isothermes &agrave; la pression de surface de transfert de 18 mN/m (&Gamma; = 23 phage particles/&mu;m(2)). Les 50 nm-&eacute;paisseur de monocouche phage mesur&eacute;e par ellipsom&egrave;tre concordent bien avec la taille moyenne de phage horizontal, estim&eacute;e par les propri&eacute;t&eacute;s de Surface SEM. du phage monocouche de Langmuir compare bien avec les autres monocouches form&eacute;s de nano - et micro-particules &agrave; l&#39;interface air-eau et semblables &agrave; celle de 1,2-diphytanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine classique amphiphiles (phospholipides) et l&#39;acide st&eacute;arique.

Les monocouches de Langmuir phage et films de Langmuir-Blodgett.

Film di monostrati di Langmuir stabile, insolubile &egrave; composta da Staphylococcus aureus specifico batteriofago litico erano formate a un&#39;interfaccia aria-acqua e caratterizzata. Il monostrato dei fagi &egrave; stata molto forte, resistere ad una pressione superficiale di &sim;40 mN/m a 20 &deg; C. L&#39;isoterma di pressione-superficie (&Pi;-A) ha posseduto una spalla a &sim;7 &times; 4 particella nm 2/fago, attribuita ad un cambiamento nell&#39;orientamento dei fagi all&#39;interfaccia aria-acqua da orizzontale a orientamento verticale del capside-gi&ugrave;/coda-su come &egrave; stata aumentata la pressione di superficie. &Pi;-A-dipendenza &egrave; stato accuratamente descritto utilizzando l&#39;equazione di stato, assumendo un orientamento orizzontale a un&#39;interfaccia aria-acqua a basse pressioni superficiali con un&#39;area esclusa per particelle dei fagi di 4,6 &times; 10(4)nm(2) Volmer. Alle alte pressioni particelle dei fagi seguirono modello space-filling densamente dischi con una specifica area di particelle di legno 8,5 &times; 3 nm 2/fago. Monostrati dei fagi litici sono stati trasferiti su substrati di silicio rivestito in oro dall&#39;interfaccia aria-acqua ad una pressione di superficie costante di 18 mN/m dal metodo di Langmuir-Blodgett, poi essiccati e analizzato da analisi di microscopia elettronica (SEM) ed ellipsometry. Adsorbimento specifico dei fagi (&Gamma;) nel film di Langmuir-Blodgett (LB) misurata da SEM &egrave; stato coerenza con quello calcolato indipendentemente da isoterme &Pi;-alla pressione di superficie di trasferimento di 18 mN/m (&Gamma; = 23 particles/&mu;m(2)) dei fagi. 50 Nm-spessore del monostrato di fago misurata da ellipsometer concordato anche con la dimensione media dei fagi orizzontale stimata dalle propriet&agrave; SEM. superficie del fago monostrati di Langmuir confrontare bene con altri strati monomolecolari formate da nano - e micro-particelle all&#39;interfaccia aria-acqua e simile a quella del classico anfifili 1,2-diphytanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (fosfolipidi) e acido stearico.

Film Langmuir-Blodgett e monostrati di Langmuir dei fagi.

A novel, easily renewable nanocomposite interface based on layer-by-layer (LbL) assembled cationic/anionic layers of carbon nanotubes customized with biopolymers is reported. A simple approach is proposed to fabricate a nanoscale structure composed of alternating layers of oxidized multiwalled carbon nanotubes upon which is immobilized either the cationic enzyme organophosphorus hydrolase (OPH; MWNT-OPH) or the anionic DNA (MWNT-DNA). The presence of carbon nanotubes with large surface area, high aspect ratio and excellent conductivity provides reliable immobilization of enzyme at the interface and promotes better electron transfer rates. The oxidized MWNTs were characterized by thermogravimetric analysis and Raman spectroscopy. Fourier transform infrared spectroscopy showed the surface functionalization of the MWNTs and successful immobilization of OPH on the MWNTs. Scanning electron microscopy images revealed that MWNTs were shortened during sonication and that LbL of the MWNT/biopolymer conjugates resulted in a continuous surface with a layered structure. The catalytic activity of the biopolymer layers was characterized using absorption spectroscopy and electrochemical analysis. Experimental results show that this approach yields an easily fabricated catalytic multilayer with well-defined structures and properties for biosensing applications whose interface can be reactivated via a simple procedure. In addition, this approach results in a biosensor with excellent sensitivity, a reliable calibration profile, and stable electrochemical response.

Renewable nanocomposite layer-by-layer assembled catalytic interfaces for biosensing applications.

Un roman, interface de nanocomposites facilement renouvelable bas&eacute;e sur couche par couche (LbL) assembl&eacute; cationique/anionique couches de carbone nanotubes personnalis&eacute; avec les biopolym&egrave;res est signal&eacute;e. Une approche simple est propos&eacute;e pour fabriquer une structure nanom&eacute;trique compos&eacute;e d&#39;une alternance de couches de nanotubes de carbone multiparois oxyd&eacute;s sur lequel est immobilis&eacute; soit l&#39;enzyme cationique organophosphor&eacute;s hydrolase (OPH ; MWNT-OPH) ou l&#39;ADN anionique (ADN-MWNT). La pr&eacute;sence de nanotubes de carbone avec grande surface, grand allongement et excellente conductivit&eacute; fournit une immobilisation fiable de l&#39;enzyme &agrave; l&#39;interface et favorise de meilleurs taux de transfert d&#39;&eacute;lectron. Les MWNTs oxyd&eacute;s sont caract&eacute;risaient par analyse thermogravim&eacute;trique et spectroscopie Raman. Spectroscopie infrarouge &agrave; transform&eacute;e de Fourier ont montr&eacute; la fonctionnalisation de surface des MWNTs et immobilisation r&eacute;ussie de OPH sur la MWNTs., a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les MWNTs ont &eacute;t&eacute; raccourcies au cours de la sonication et que LbL des conjugu&eacute;s MWNT/biopolym&egrave;res r&eacute;sulte en une surface continue avec une structure en couches des images de microscopie &eacute;lectronique &agrave; balayage. L&#39;activit&eacute; catalytique des couches biopolym&egrave;re a &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;e &agrave; l&#39;aide de la spectroscopie d&#39;absorption et d&#39;analyse &eacute;lectrochimique. Les r&eacute;sultats exp&eacute;rimentaux montrent que cette approche donne un multicouche catalytique facilement fabriqu&eacute; avec des structures bien d&eacute;finies et des propri&eacute;t&eacute;s pour les applications de biod&eacute;tection dont l&#39;interface peut &ecirc;tre r&eacute;activ&eacute; via une proc&eacute;dure simple. En outre, cette approche donne un biocapteur avec excellente sensibilit&eacute;, un profil de calibration fiable et stable r&eacute;action &eacute;lectrochimique.

Nanocomposites renouvelables-par-couche assembl&eacute; catalytiques interfaces pour des applications de biod&eacute;tection.

Un romanzo, facilmente rinnovabile nanocompositi interfaccia basata su strato dopo strato (LbL) assemblati anionici/cationici strati di carbonio, nanotubi personalizzato con biopolimeri sono segnalato. Viene proposto un approccio semplice per fabbricare una struttura su scala nanometrica composta di strati alternati di nanotubi di carbonio ossidato multiparete su cui &egrave; immobilizzato o l&#39;enzima cationico organofosforici idrolasi (OPH; MWNT-OPH) o il DNA anionico (MWNT-DNA). La presenza di nanotubi di carbonio con ampia superficie, alto allungamento e ottima conducibilit&agrave; affidabile immobilizzazione dell&#39;enzima a livello di interfaccia e promuove la migliore velocit&agrave; di trasferimento di elettroni. Il MWNTs ossidato furono caratterizzati dalla spettroscopia Raman e analisi termogravimetrica. Fourier transform spettroscopia infrarossa ha mostrata la funzionalizzazione superficiale del MWNTs e successo immobilizzazione di OPH su MWNTs. scansione di immagini di microscopia elettronica ha rivelati che MWNTs sono stati ridotti durante la sonicazione e che LbL dei coniugati MWNT/biopolimero ha portato a una superficie continua con una struttura stratificata. L&#39;attivit&agrave; catalitica degli strati biopolimero &egrave; stato caratterizzato mediante spettroscopia di assorbimento e analisi elettrochimica. I risultati sperimentali mostrano che questo approccio produce un multistrato catalitico facilmente fabbricato con strutture ben definite e le propriet&agrave; per le applicazioni di biosensori cui interfaccia pu&ograve; essere riattivato tramite una semplice procedura. Inoltre, questo approccio si traduce in un biosensore con eccellente sensibilit&agrave;, un profilo di calibrazione affidabile e stabile risposta elettrochimica.

Nanocompositi rinnovabili strato dopo strato assemblata catalitiche interfacce per le applicazioni di biosensori.

Stability of microbial cultures during sampling and storage is a vital issue in various fields of medicine, biotechnology, food science, and forensics. We have developed a unique bacterial preservation process involving a non-toxic, water-soluble acacia gum polymer that eliminates the need for refrigerated storage of samples. The main goal of this study is to characterize the efficacy of acacia gum polymer for preservation of pathogenic bacteria (Bacillus anthracis and methicillin-resistant Staphylococcus aureus-MRSA) on different materials, used for swabbing and filtration: cotton, wool, polyester, rayon, charcoal cloth, and Whatman paper. Acacia gum polymer used for preservation of two pathogens has been shown to significantly protect bacteria during dehydration and storage in all tested samples at the range of temperatures (5-45Â°C for MRSA and 40-90Â°C for B. anthracis). Our results showed higher recovery as well as higher viability during the storage of both bacteria in all materials with acacia gum. Addition of acacia gum polymer to swabbing materials or filters will increase efficacy of sample collection and identification of pathogenic bacteria from locations such as hospitals or the environment. Proposed approach can also be used for long-term storage of culture collections, since acacia gum contributes to viability and stability of bacterial cultures.

Natural biopolymer for preservation of microorganisms during sampling and storage.

Stabilit&eacute; des cultures microbiennes au cours de l&#39;&eacute;chantillonnage et stockage est une question vitale dans divers domaines de la m&eacute;decine, biotechnologie, agronomie et m&eacute;decine l&eacute;gale. Nous avons d&eacute;velopp&eacute; un proc&eacute;d&eacute; de pr&eacute;servation bact&eacute;rienne unique impliquant un polym&egrave;re de gomme d&#39;acacia non toxique, soluble dans l&#39;eau qui &eacute;limine le besoin de stockage r&eacute;frig&eacute;r&eacute; des &eacute;chantillons. L&#39;objectif principal de cette &eacute;tude est de caract&eacute;riser l&#39;efficacit&eacute; d&#39;acacia &agrave; gomme polym&egrave;re pour la pr&eacute;servation des bact&eacute;ries pathog&egrave;nes (Bacillus anthracis et methicillin-resistant Staphylococcus aureus-SARM) sur diff&eacute;rents mat&eacute;riaux, utilis&eacute;s pour le pistonnage et filtration : coton, laine, polyester, rayonne, tissu charbon de bois et papier Whatman. Polym&egrave;re de gomme Acacia utilis&eacute;e pour la pr&eacute;servation de deux agents pathog&egrave;nes a &eacute;t&eacute; &eacute;tabli pour prot&eacute;ger les bact&eacute;ries significativement au cours de la d&eacute;shydratation et le stockage dans tous les &eacute;chantillons test&eacute;s &agrave; la plage de temp&eacute;ratures (5-45&deg; C pour les SARM et 40-90&deg; C pour le b. anthracis). Nos r&eacute;sultats ont montr&eacute; la plus forte reprise ainsi que la viabilit&eacute; sup&eacute;rieure lors du stockage de ces deux bact&eacute;ries dans toutes les mati&egrave;res avec la gomme d&#39;acacia. Ajout de polym&egrave;re Gomme acacia d&#39;&eacute;couvillonnage des mat&eacute;riaux ou des filtres augmentera l&#39;efficacit&eacute; du pr&eacute;l&egrave;vement d&#39;&eacute;chantillons et l&#39;identification des bact&eacute;ries pathog&egrave;nes de lieux tels que les h&ocirc;pitaux ou l&#39;environnement. L&#39;approche propos&eacute;e permet &eacute;galement pour la conservation &agrave; long terme des collections de cultures, &eacute;tant donn&eacute; que la gomme d&#39;acacia contribue &agrave; la viabilit&eacute; et la stabilit&eacute; des cultures bact&eacute;riennes.

Biopolym&egrave;re naturel pour la conservation des micro-organismes pendant l&#39;&eacute;chantillonnage et stockage.

Stabilit&agrave; delle colture microbiche durante il prelievo e stoccaggio &egrave; una questione vitale in vari campi della medicina, biotecnologie, scienza alimentare e medicina forense. Abbiamo sviluppato un processo unico di conservazione batterica che coinvolge un polimero di gomma d&#39;acacia non tossico, solubile in acqua che elimina la necessit&agrave; di conservazione refrigerata dei campioni. L&#39;obiettivo principale di questo studio &egrave; di caratterizzare l&#39;efficacia del polimero gomma d&#39;acacia per la conservazione dei batteri patogeni (Bacillus anthracis e meticillino-resistente Staphylococcus aureus-MRSA) su diversi materiali, utilizzati per strofinare e filtrazione: cotone, lana, poliestere, rayon, panno di carbone di legna e Carta Whatman. Polimero di gomma di acacia utilizzato per la conservazione di due agenti patogeni ha dimostrato di proteggere in modo significativo batteri durante la disidratazione e lo stoccaggio in tutti i campioni testati presso la gamma di temperature (5-45&deg; C per MRSA e 40-90&deg; C per b. anthracis). I nostri risultati hanno mostrato recupero superiore cos&igrave; come la maggiore redditivit&agrave; durante l&#39;immagazzinaggio di entrambi batteri in tutti i materiali con gomma di acacia. Aggiunta di polimero gomma d&#39;acacia a strofinare materiali o filtri aumenter&agrave; efficacia della raccolta del campione e identificazione dei batteri patogeni da luoghi come ospedali o per l&#39;ambiente. Approccio proposto utilizzabile anche per l&#39;archiviazione a lungo termine delle collezioni di cultura, dato che la gomma di acacia contribuisce alla vitalit&agrave; e alla stabilit&agrave; delle colture batteriche.

Biopolimero naturale per la conservazione dei microrganismi durante il prelievo e stoccaggio.

In carcinogenicity studies, pregabalin increased hemangiosarcoma incidence in mice but not in rats. Investigative studies, ranging in length from 24 h to 12 months, were conducted in mice (1000 or 5000 mg/kg) and rats (900 mg/kg) to evaluate a potential mode-of-action scheme for tumor formation. Three areas were evaluated: (1) hematopoiesis (because endothelial and hematopoietic cells arise from the same precursor and hemangiosarcomas are primarily located in mouse hematopoietic tissues), (2) angiogenic growth factors (because increased angiogenic growth factors may stimulate vascular tumors), and (3) pulmonary/blood gas parameters (because hypoxia is a known driver for endothelial cell proliferation). In mice, pregabalin rapidly increased platelet and megakaryocyte counts, activated platelets and bone marrow erythrophages, decreased the myeloid-to-erythroid (M:E) ratio (49%), and produced bone marrow and splenic congestion and extramedullary hematopoiesis (EMH). Vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor immunohistochemical staining were also increased in mouse bone marrow and spleen and vascular endothelial growth factor receptor 2 immunolabeling was increased in liver. Serum bicarbonate was increased within 24 h of pregabalin administration, persisted over time, and was accompanied by decreased respiratory rate (up to 34%) and increased partial pressure of carbon dioxide (pCO(2)), resulting in sustained metabolic alkalosis and elevated blood pH in mice. In contrast, in rats, pregabalin decreased overall bone marrow cellularity, including decreased number of megakaryocytes (24%) with no evidence of erythrophages, no change in M:E ratio, no EMH, and no increase in angiogenic growth factors or blood pH. Persistent alterations in serum bicarbonate, respiratory function, and blood gas parameters in mice, without adequate compensatory mechanisms, has the potential to create chronic tissue hypoxia, an accepted driver of endothelial cell proliferation.

Key components of the mode of action for hemangiosarcoma induction in pregabalin-treated mice: evidence of increased bicarbonate, dysregulated erythropoiesis, macrophage activation, and increased angiogenic growth factors in mice but not in rats.

Dans les &eacute;tudes de canc&eacute;rog&eacute;nicit&eacute;, pr&eacute;gabaline a augment&eacute; le nombre de hemangiosarcoma chez les souris, mais pas chez les rats. &Eacute;tudes d&#39;investigation, longueurs allant de 24h &agrave; 12 mois, ont &eacute;t&eacute; men&eacute;es chez des souris (1000 ou 5000 mg/kg) et les rats (900 mg/kg) pour &eacute;valuer un &eacute;ventuel r&eacute;gime mode d&#39;action pour la formation de tumeurs. Trois zones ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;es: (1) l&#39;h&eacute;matopo&iuml;&egrave;se (parce que les cellules endoth&eacute;liales et h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques d&eacute;coulent de la m&ecirc;me pr&eacute;curseur et h&eacute;mangiosarcomes sont trouvent principalement dans les tissus h&eacute;matopo&iuml;&eacute;tiques de souris), les facteurs de croissance angiog&eacute;niques (2) (parce que les facteurs de croissance angiog&eacute;niques accrue peut stimuler les tumeurs vasculaires), et param&egrave;tres de gaz (3) pulmonaire/sang (hypoxie &eacute;tant un pilote connu pour la prolif&eacute;ration des cellules endoth&eacute;liales). Chez les souris, pr&eacute;gabaline a rapidement augment&eacute; plaquettaire et m&eacute;gacaryocyte compte activ&eacute; de plaquettes et moelle osseuse erythrophages, diminu&eacute; le ratio my&eacute;lo&iuml;de-&agrave;-&eacute;rythro&iuml;des (M:E) (49 %) et produit la moelle osseuse et l&#39;h&eacute;matopo&iuml;&egrave;se extram&eacute;dullaire et de congestion spl&eacute;nique (EMH). Facteur de croissance endoth&eacute;lial vasculaire (VEGF) et marquage d&#39;immunohistochimique de facteur de croissance basique des fibroblastes ont &eacute;galement augment&eacute;s dans la moelle osseuse de souris et de la rate et vascular endothelial growth factor receptor 2 immunomarquage a &eacute;t&eacute; augment&eacute;e dans le foie. Taux s&eacute;rique de bicarbonate a &eacute;t&eacute; augment&eacute;e dans les 24h de l&#39;administration de la pr&eacute;gabaline, a persist&eacute; au fil du temps et &eacute;tait accompagn&eacute;e d&#39;une diminution du taux respiratoire (jusqu&#39;&agrave; 34 %) et augmentation de la pression partielle de dioxyde de carbone (pCO(2)), entra&icirc;nant une alcalose m&eacute;tabolique soutenue et pH sanguin &eacute;lev&eacute; chez la souris. En revanche, chez les rats, pr&eacute;gabaline a diminu&eacute; la cellularit&eacute; m&eacute;dullaire globale, notamment une diminution du nombre de m&eacute;gacaryocytes (24 %) avec aucun signe d&#39;erythrophages, pas de changement en M:E rapport, aucun EMH et aucune augmentation des facteurs de croissance angiog&eacute;niques ou le pH du sang. Alt&eacute;rations persistantes s&eacute;rique de bicarbonate, fonction respiratoire et param&egrave;tres de gaz du sang chez les souris, sans m&eacute;canismes compensatoires ad&eacute;quats, a le potentiel pour cr&eacute;er l&#39;hypoxie tissulaire chronique, un pilote accept&eacute; de la prolif&eacute;ration des cellules endoth&eacute;liales.

&Eacute;l&eacute;ments essentiels de la mode d&#39;action pour l&#39;h&eacute;mangiosarcome induction chez les souris trait&eacute;es &agrave; la pr&eacute;gabaline : preuve de bicarbonate accrue, dysr&eacute;gulation &eacute;rythropo&iuml;&egrave;se, activation des macrophages et facteurs de croissance angiog&eacute;niques accrue chez les souris, mais pas chez les rats.

Negli studi di cancerogenicit&agrave;, pregabalin aumentata incidenza hemangiosarcoma nei topi ma non nei ratti. Sono stati condotti studi investigativi, che variano in lunghezza da 24 h a 12 mesi, nei topi (1000 o 5000 mg/kg) e ratti (900 mg/kg) per valutare un potenziale regime modalit&agrave; d&#39;azione per la formazione di tumori. Tre aree sono state valutate: (1) ematopoiesi (perch&eacute; le cellule endoteliali ed ematopoietiche sorgono dal precursore stesso e hemangiosarcomas sono localizzati principalmente nei tessuti ematopoietici del mouse), crescita (2) angiogenic fattori (perch&eacute; i fattori di crescita aumentata angiogenesi pu&ograve; stimolare tumori vascolari), e i parametri del gas (3) polmonare/sangue (perch&eacute; l&#39;ipossia &egrave; un driver noto per la proliferazione delle cellule endoteliali). Nei topi, pregabalin aument&ograve; rapidamente delle piastrine e dei megacariociti conta, attiva le piastrine e midollo osseo erythrophages, diminuito il rapporto mieloide-a-eritroidi (M:E) (49%) e prodotto del midollo osseo e l&#39;ematopoiesi, congestione ed extramidollare splenica (EMH). Fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) e la colorazione immunoistochimica di base dei fibroblasti fattore di crescita sono stati aumentati anche nel midollo osseo di topo e della milza e vascular endothelial growth factor receptor 2 immunomarcatura era aumentato nel fegato. Bicarbonato del siero &egrave; stato aumentato entro 24 h dalla amministrazione pregabalin, persistenti nel tempo e fu accompagnata da diminuzione frequenza respiratoria (fino al 34%) e aumento della pressione parziale di anidride carbonica (pCO(2)), con conseguente alcalosi metabolica sostenuta e pH del sangue elevati nei topi. Al contrario, nei ratti, pregabalin ridotta cellularit&agrave; globale del midollo osseo, tra cui la riduzione del numero dei megacariociti (24%) con nessuna evidenza di erythrophages, nessun cambiamento nel rapporto M:E, no EMH e nessun aumento di fattori di crescita angiogenetici o pH del sangue. Alterazioni persistenti nel siero bicarbonato, funzione respiratoria e i parametri di gas del sangue in topi, senza adeguati meccanismi di compensazione, ha il potenziale per creare ipossia tissutale cronica, un driver accettato di proliferazione delle cellule endoteliali.

Principali componenti della modalit&agrave; di azione per l&#39;induzione di angiosarcoma nei topi trattati con pregabalin: prove di bicarbonato maggiore, eritropoiesi, attivazione dei macrofagi e aumentato angiogenic fattori di crescita nei topi ma non nei ratti.

Discrimination of methicillin resistant (MRSA) and sensitive (MSSA) strains of Staphylococcus aureus, was achieved by the specially selected lytic bacteriophage with a wide host range of S. aureus strains and a penicillin-binding protein (PBP 2a) specific antibody. A quartz crystal microbalance with dissipation monitoring (QCM-D) was employed to analyze bacteria-phage interactions. The lytic phages were transformed into phage spheroids by exposure to water-chloroform interface. Phage spheroid monolayers were transferred onto QCM-D sensors by Langmuir-Blodgett (LB) technique. Biosensors were tested in the flow mode with bacterial water suspensions, while collecting frequency and energy dissipation changes. Bacteria-spheroid interactions resulted in decreased resonance frequency and an increase in dissipation energy for both MRSA and MSSA strains. Following the bacterial binding, these sensors were further exposed to a flow of the penicillin-binding protein (PBP 2a) specific antibody conjugated latex beads. Sensors tested with MRSA responded to PBP 2a antibody beads; while sensors examined with MSSA gave no response. This experimental difference establishes an unambiguous discrimination between methicillin resistant and sensitive S. aureus strains. Both free and immobilized bacteriophages strongly inhibit bacterial growth on solid/air interfaces and in water suspensions. After lytic phages are transformed into spheroids, they retain their strong lytic activity and demonstrate high bacterial capture efficiency. The phage and phage spheroids can be used for screening and disinfection of antibiotic resistant bacteria. Other applications may include use on biosensors, bacteriophage therapy, and antimicrobial surfaces.

Detection and identification of methicillin resistant and sensitive strains of Staphylococcus aureus using tandem measurements.

Discrimination de r&eacute;sistant &agrave; la m&eacute;thicilline (SARM) et des souches sensibles (MSSA) de Staphylococcus aureus, a &eacute;t&eacute; atteint par le bact&eacute;riophage lytique sp&eacute;cialement s&eacute;lectionn&eacute; avec une gamme de S. aureus souches de gamme d&#39;h&ocirc;tes et un anticorps sp&eacute;cifique de la p&eacute;nicilline-liaison prot&eacute;ique (PBP 2 a). Une microbalance &agrave; cristal de quartz avec dissipation surveillance (QCM-D) a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour analyser les interactions bact&eacute;riophages-bact&eacute;ries. Les phages lytiques sont transform&eacute;es en sph&eacute;ro&iuml;des phage par l&#39;exposition &agrave; l&#39;interface eau-chloroforme. Monocouches sph&eacute;ro&iuml;de phage ont &eacute;t&eacute; transf&eacute;r&eacute;s sur des capteurs de QCM-D par la technique de Langmuir-Blodgett (LB). Biocapteurs ont &eacute;t&eacute; test&eacute;s sous le mode avec des suspensions bact&eacute;riennes de l&#39;eau, tout en collectant des changements de dissipation de fr&eacute;quence et de l&#39;&eacute;nergie. Interactions bact&eacute;ries-sph&eacute;ro&iuml;de a abouti &agrave; la fr&eacute;quence de r&eacute;sonance une diminution et une augmentation de l&#39;&eacute;nergie de dissipation pour les souches de SARM et de MSSA. Suite &agrave; la liaison bact&eacute;rienne, ces capteurs ont &eacute;t&eacute; davantage expos&eacute;s &agrave; un flux des prot&eacute;ine se liant &agrave; la p&eacute;nicilline (PBP 2 a) anticorps sp&eacute;cifique conjugu&eacute; billes de latex. Capteurs test&eacute; par SARM a r&eacute;pondu aux perles d&#39;anticorps PBP 2 a ; pendant l&#39;examen de capteurs avec MSSA a donn&eacute; aucune r&eacute;ponse. Cette diff&eacute;rence exp&eacute;rimentale &eacute;tablit une discrimination sans ambigu&iuml;t&eacute; entre r&eacute;sistants &agrave; la m&eacute;thicilline et sensibles S. aureus souches. Les bact&eacute;riophages libres et immobilis&eacute;es inhibent fortement la croissance bact&eacute;rienne sur des interfaces solide/air et dans des suspensions de l&#39;eau. Apr&egrave;s que les phages lytiques sont transform&eacute;s en sph&eacute;ro&iuml;des, ils conservent leur forte activit&eacute; lytique et d&eacute;montrent l&#39;efficacit&eacute; de captage bact&eacute;rienne &eacute;lev&eacute;e. Le phage et sph&eacute;ro&iuml;des phage peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;s pour le d&eacute;pistage et la d&eacute;sinfection de bact&eacute;ries r&eacute;sistantes aux antibiotiques. Autres applications peuvent inclure l&#39;utilisation sur surfaces antimicrobiennes, th&eacute;rapie bact&eacute;riophage et biocapteurs.

D&eacute;tection et identification des souches sensibles et r&eacute;sistantes &agrave; la m&eacute;thicilline de Staphylococcus aureus en utilisant des mesures en tandem.

Discriminazione di meticillino-resistente (MRSA) e sensibile (MSSA) ceppi di Staphylococcus aureus, fu raggiunto da batteriofago litico appositamente selezionato con un host vasta gamma di S. aureus ceppi e un anticorpo specifico penicillina-binding protein di (PBP 2a). Una microbilancia al quarzo cristallo con dissipazione di monitoraggio (QCM-D) &egrave; stato impiegato per analizzare le interazioni dei fagi batteri. I fagi litici furono trasformati in sferoidi fago da esposizione all&#39;interfaccia acqua-cloroformio. Monostrati sferoide dei fagi sono stati trasferiti su sensori QCM-D da tecnica di Langmuir-Blodgett (LB). Biosensori sono stati testati in modalit&agrave; flusso con sospensioni batteriche dell&#39;acqua, mentre la raccolta modifiche di dissipazione di energia e frequenza. Interazioni batteri-sferoide portato a frequenza di risonanza &egrave; diminuito e un aumento di energia di dissipazione per i ceppi MRSA sia MSSA. Seguendo l&#39;associazione batterica, questi sensori sono stati ulteriormente esposti ad un flusso di penicillina-binding protein (PBP 2a) specifico anticorpo coniugato con lattice perline. Sensori testati con MRSA ha risposto alle perle di PBP 2a dell&#39;anticorpo; mentre sensori esaminati con MSSA ha dato alcuna risposta. Questa differenza sperimentale stabilisce una discriminazione univoca tra i ceppi meticillino resistente e sensibile S. aureus. Entrambi gratuiti e immobilizzati batteriofagi fortemente inibiscono la crescita batterica su interfacce solido/aria e nelle sospensioni di acqua. Dopo fagi litici vengono trasformati in sferoidi, essi conservano la loro forte attivit&agrave; litico e dimostrare acquisizione batterica ad alta efficienza. Il fago e sferoidi fago possono essere utilizzati per lo screening e la disinfezione dei batteri resistenti agli antibiotici. Altre applicazioni possono includere utilizzo su superfici antimicrobiche, terapia del batteriofago e biosensori.

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