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Denaturing Urea Polyacrylamide Gel Electrophoresis (Urea PAGE)

Urea PAGE or denaturing urea polyacrylamide gel electrophoresis employs 6-8 M urea, which denatures secondary DNA or RNA structures and is used for their ...

Nanyang Technological University, Singapore - NTU

&#x53E4;&#x5BB6;&#x65CF;&#x65B0;&#x6210;&#x5458; AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x8D28; &#xFF08;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x4E09;&#xFF09; &#x89C1;&#x4E8E;&#x6240;&#x6709;&#x4EA7;&#x7532;&#x70F7;&#x53E4;&#x83CC;&#x548C;&#x786B;&#x9178;&#x76D0;&#x51CF;&#x901F;&#x673A; Archaeoglobus fulgidus&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x6B64;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;COG1223 &#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x9884;&#x8BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; AAA + &#x4E09;&#x5206;&#x7EC4;&#x3002;A.fulgidus &#x7801;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; 40 kDa &#x5355;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x6297;&#x539F;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x548C;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x540C;&#x8D28;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x73AF;&#x5F62;&#x914D;&#x5408; 125a &#x6761;&#x6240;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x7535;&#x955C;&#x7684;&#x76F4;&#x5F84;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6C89;&#x6DC0;&#x5E73;&#x8861;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x88C5;&#x914D;&#x5230; hexamers &#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x548C; ATP &#x7F3A;&#x4E4F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x3002;&#x540C;&#x6E90;&#x5230; AAA + &#x5BB6;&#x5EAD;&#x5176;&#x4ED6;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x590D;&#x6742;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; hydrolyzes &#x4E09;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x3002;&#x7C73;&#x6C0F;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x7684; 118 min(-1) k(cat) &#x548C; K(M) &#x7684; 1.4 &#x6BEB;&#x7C73;&#x5728; 78 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x3002;&#x6B64;&#x55DC;&#x70ED;&#x53E4;&#x83CC; ATPase &#x7A33;&#x5B9A;&#x81F3; 86 &#x5EA6; C &#x548C; ATPase &#x6D3B;&#x6027;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x6E29;&#x5EA6;&#x662F;&#x6700;&#x5927;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x6700;&#x540C;&#x6E90;&#x7684; FtsH &#x7684; AAA &#x57DF;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x800C; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x57DF;&#x663E;&#x793A;&#x9884;&#x6D4B;&#x7ED3;&#x6784;&#x540C;&#x6E90;&#x5230; AAA &#x86CB;&#x767D;&#x7684; CDC48 &#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x6B64;&#x65B0;&#x7684; AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x65B0; AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x4ECE;&#x53E4;&#x751F;&#x83CC;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

We investigated a new archaeal member of the AAA+ protein family (ATPases associated with various cellular activities) which is found in all methanogenic archaea and the sulphate-reducer Archaeoglobus fulgidus. These proteins cluster to COG1223 predicted to form a subgroup of the AAA+ ATPases. The gene from A. fulgidus codes for a protein of 40 kDa monomeric molecular weight, which we overexpressed in Escherichia coli and purified to homogeneity. The protein forms ring-shaped complexes with a diameter of 125A as determined by electron microscopy. Using sedimentation equilibrium analysis we demonstrate that it assembles into hexamers over a wide concentration range both in presence and absence of ATP. As suggested by homology to other members of the AAA+ family, the complex binds and hydrolyzes ATP. Michaelis-Menten analysis revealed a k(cat) of 118 min(-1) and a K(M) of 1.4 mM at 78 degrees C. This hyperthermophilic archaeal ATPase is stable to 86 degrees C and the ATPase activity is maximal at this temperature. The protein is most homologous to the AAA-domain of FtsH from bacteria, while the N-terminal domain shows predicted structural homology to members of the CDC48 family of AAA proteins. Possible roles of this new AAA+ protein are discussed.

Characterization of a new AAA+ protein from archaea.

Nous avons &eacute;tudi&eacute; un nouveau membre d&#39;archaeal de l&#39;AAA + famille de prot&eacute;ines (ATPases associ&eacute;s &agrave; diverses activit&eacute;s cellulaires) que l&#39;on trouve dans tous les methanogenic archaea et le sulfate-r&eacute;ducteur Archaeoglobus fulgidus. Ces grappes de prot&eacute;ines &agrave; COG1223 pr&eacute;dit pour former un sous-groupe de l&#39;AAA + ATPases. Le g&egrave;ne d&#39;a. fulgidus code pour une prot&eacute;ine de 40 kDa monom&egrave;re poids mol&eacute;culaire, qui nous surexprim&eacute; dans Escherichia coli et purifi&eacute;e jusqu&#39;&agrave; homog&eacute;n&eacute;it&eacute;. La prot&eacute;ine forme des complexes en forme d&#39;anneau d&#39;un diam&egrave;tre de 125 a, tel que d&eacute;termin&eacute; par microscopie &eacute;lectronique. &Agrave; l&#39;aide d&#39;analyse d&#39;&eacute;quilibre de s&eacute;dimentation, nous d&eacute;montrons qu&#39;il assemble en hexam&egrave;res sur une plage de la grande concentration en pr&eacute;sence et absence d&#39;ATP. Comme sugg&eacute;r&eacute; par homologie avec les autres membres de la famille AAA +, le complexe se lie et hydrolyse de l&#39;ATP. Analyse de Michaelis-Menten a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une k(cat) de 118 min(-1) et un K(M) de 1,4 mM &agrave; 78 &deg; C. Cette arch&eacute;es hyperthermophiles ATPase est stable &agrave; 86 degr&eacute;s C et l&#39;activit&eacute; de l&#39;ATPase est maximale &agrave; cette temp&eacute;rature. La prot&eacute;ine est plus homologue au AAA-domaine de FtsH des bact&eacute;ries, alors que le domaine N-terminal montre pr&eacute;dite homologie structurale aux membres de la famille de CDC48 des prot&eacute;ines de l&#39;AAA. Les auteurs discutent les r&ocirc;les possibles de cette nouvelle prot&eacute;ine AAA +.

Caract&eacute;risation d&#39;une nouvelle de AAA + prot&eacute;ine d&#39;archaea.

Wir untersuchten neuen Archaea Mitglied der AAA + Proteinfamilie (ATPasen verbunden mit verschiedenen zellul&auml;ren Aktivit&auml;ten), die in alle methanogenen Archaeen und die Sulfat-Reduktion Archaeoglobus Fulgidus gefunden wird. Diese Proteine Cluster COG1223 vorhergesagt um eine Untergruppe von AAA +-ATPases zu bilden. Das Gen von A. Fulgidus Codes f&uuml;r ein Protein 40 kDa Monomer Molekulargewicht, die wir Pleuramesotheliom in Escherichia coli und zur Homogenit&auml;t gereinigt. Das Protein bildet ringf&ouml;rmige komplexe mit einem Durchmesser von 125A festgelegt durch Elektronenmikroskopie. Mit Ablagerung Gleichgewicht-Analyse zeigen wir, dass es &uuml;ber einen weiten Konzentrationsbereich sowohl in Anwesenheit und Abwesenheit von ATP in Hexamers zusammenfasst. Wie von Homologie zu anderen Mitgliedern der Familie AAA + der Komplex bindet und Spalten ATP. Michaelis-Menten-Analyse ergab eine k(cat) von 118 min(-1) und ein K(M) von 1,4 mM bei 78 Grad C. Diese hyperthermophilen Archaea ATPase ist stabil bis 86 &deg; C und die ATPase-Aktivit&auml;t wird bei dieser Temperatur maximal. Das Protein ist die homologe der AAA-Dom&auml;ne von FtsH aus Bakterien, w&auml;hrend die N-terminalen Dom&auml;ne vorhergesagten strukturelle Homologie zu CDC48 Familienmitglieder AAA Proteine zeigt. M&ouml;gliche Rollen dieses neue AAA +-Proteins werden diskutiert.

Charakterisierung eines neuen AAA + Proteins aus Archaea.

Abbiamo studiato un nuovo membro di archaeal della AAA + proteina famiglia (ATPasi associata con varie attivit&agrave; cellulari) che si trova in tutti i metanogenica archaea e solfato-riduttore Archaeoglobus fulgidus. Questi cluster di proteine a COG1223 previsto per formare un sottogruppo di ATPases AAA +. Il gene da a. fulgidus codifica per una proteina di 40 kDa monomerico peso molecolare, che overexpressed in Escherichia coli e purificato per omogeneit&agrave;. La proteina forma complessi a forma di anello con un diametro di 125A come determinato da microscopia elettronica. Utilizzando l&#39;analisi di equilibrio di sedimentazione che dimostriamo che assembla in esameri sopra una gamma vasta concentrazione sia in presenza che assenza di ATP. Come suggerito da omologia ad altri membri della famiglia AAA +, il complesso si lega e idrolizza ATP. Analisi di Michaelis-Menten ha rivelato un k(cat) di 118 min(-1) e un K(M) di 1,4 mM a 78 gradi C. Questo archaeal furiosus ATPasi sono stabile fino a 86 &deg; C e l&#39;attivit&agrave; dell&#39;ATPasi &egrave; massima a questa temperatura. La proteina &egrave; pi&ugrave; omologa al dominio AAA del FtsH da batteri, mentre il dominio N-terminale Mostra omologia strutturale previsto ai membri della famiglia di proteine AAA CDC48. Vengono discussi i possibili ruoli di questa nuova proteina AAA +.

Caratterizzazione di una nuova proteina AAA + da archaea.

&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30E1;&#x30BF;&#x30F3;&#x751F;&#x6210;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x3068;&#x786B;&#x9178;&#x30EC;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5; &#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30A8;&#x30AA;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D6;&#x30B9;&#x5C5E; fulgidus &#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055; &#xFF08;Atpase &#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#xFF09;&#x3001;AAA + &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC; COG1223 &#x3059;&#x308B; AAA + Atpase &#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3002;A. fulgidus &#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E; 40 kDa &#x5358;&#x91CF;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x540C;&#x8CEA;&#x6027;&#x306B;&#x6D44;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5B9A;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B; 125 a &#x306E;&#x76F4;&#x5F84;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x74B0;&#x72B6;&#x932F;&#x4F53;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6C88;&#x964D;&#x5E73;&#x8861;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x4E0D;&#x5728;&#x306E; ATP &#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066; hexamers &#x306B;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092; AAA + &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;ATP &#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DF;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EA;&#x30B9;-&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x578B;&#x5206;&#x6790; 118 min(-1) &#x306E; k(cat) &#x3068; 1.4 &#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB; 78 &#x2103; &#x3067;&#x306E; K&#xFF08;M&#xFF09; &#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8D85;&#x597D;&#x71B1;&#x6027;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x306F; ATPase 86 &#x5EA6; C &#x306B;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3042;&#x308A; ATPase &#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x6700;&#x5927;&#x3067;&#x3059;&#x3002;N &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x4E88;&#x6E2C;&#x69CB;&#x9020;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC; AAA &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; CDC48 &#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; FtsH &#x306E; AAA &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x304B;&#x3089;&#x6700;&#x3082;&#x76F8;&#x540C;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; AAA + &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044; AAA + &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; archaeal &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0; AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (ATPases &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;) &#xBAA8;&#xB4E0; methanogenic archaea&#xC640; &#xD669;&#xC0B0;-&#xAC10;&#xC18D; &#xAE30; Archaeoglobus fulgidus&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xB294; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; COG1223 AAA + Atpases&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xC608;&#xC0C1;. 40 KDa monomeric &#xBD84;&#xC790;&#xB7C9;, &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0; overexpressed &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC131;&#xC744; &#xC815;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; A. fulgidus &#xCF54;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 125A &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xC9C1;&#xACBD;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBC18;&#xC9C0; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xBCF5;&#xD569;&#xBB3C;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB113;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC94;&#xC704; &#xBAA8;&#xB450; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; ATP&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; hexamers&#xB85C; &#xC870;&#xB9BD; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xCE68;&#xC804; &#xD3C9;&#xD615; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Homology AAA + &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC548;, &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; ATP&#xB97C; hydrolyzes. Michaelis Menten &#xBD84;&#xC11D; &#xBC1D;&#xD600; 118 min(-1) k(cat) 78&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; 1.4 m m K(M) &#xC774; hyperthermophilic archaeal Atpase&#xB294; 86 &#xC12D;&#xC528; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC548;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; ATPase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC740;&#xC774; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD5C;&#xB300;. &#xBC18;&#xBA74; N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; AAA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; CDC48 &#xC81C;&#xD488;&#xAD70;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; &#xAD6C;&#xC870; homology&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; Ftsh&#xC758; AAA &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xB3D9;&#xC885;. &#xC774; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACE0;&#xC138;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; AAA + &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

Investigamos a archaeal nuevo miembro de la AAA + familia de prote&iacute;nas (ATPasas asociadas con diversas actividades celulares) que se encuentra en todos methanogenic archaea y el sulfato-reductor de Archaeoglobus. Estos cl&uacute;ster prote&iacute;nas COG1223 predijo para formar un subgrupo de la AAA + ATPases. El gen de a. fulgidus codifica para una prote&iacute;na de 40 kDa monom&eacute;rica peso molecular que sobreexpresa en Escherichia coli y purificado a homogeneidad. La prote&iacute;na forma complejos en forma de anillo con un di&aacute;metro de 125A seg&uacute;n lo determinado por microscopia electr&oacute;nica. Mediante el an&aacute;lisis del equilibrio de sedimentaci&oacute;n demostramos que ensambla en hexamers sobre una gama amplia de concentraci&oacute;n tanto en presencia y ausencia de ATP. Seg&uacute;n lo sugerido por homolog&iacute;a a otros miembros de la familia de AAA +, el complejo se une e hidroliza ATP. An&aacute;lisis de Michaelis-Menten revel&oacute; un k(cat) de minuto 118 y una k de 1,4 mM a 78 grados C. Este archaeal hyperthermophilic ATPasa es estable a 86 grados C y la actividad de la ATPasa es m&aacute;xima a esta temperatura. La prote&iacute;na es m&aacute;s hom&oacute;loga al AAA-dominio de FtsH de bacterias, mientras que el dominio N-terminal muestra homolog&iacute;a estructural prevista a los miembros de la familia de CDC48 de las prote&iacute;nas de la AAA. Se discuten los posibles papeles de esta nueva prote&iacute;na AAA +.

Caracterizaci&oacute;n de una nueva AAA + prote&iacute;na de archaea.

&#x80F0;&#x5C9B;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x591A;&#x80BD; (&#x6CAA;) &#x964D;&#x9499;&#x7D20;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x3001; 37-&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x9178;&#x6027;&#x591A;&#x80BD;&#x6FC0;&#x7D20;&#x662F; colocalized &#x548C; cosecreted &#x4E0E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x6CAA;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88C5;&#x914D;&#x6210;&#x6709;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x548C;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x3001; 2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x7684;&#x4E00;&#x5927;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x9897;&#x7C92;&#x5242;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x53EF;&#x80FD;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F4E;&#x805A;&#x7CD6;&#x548C;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x6CAA;&#xFF0C;&#x514D;&#x8D39;&#x5728;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x7559;&#x5269;&#x4F59;&#x7684;&#x4E8C;&#x7EA7;&#x7ED3;&#x6784;&#x5143;&#x7D20;&#x3002;&#x6838;&#x78C1;&#x5171;&#x632F;&#x5316;&#x5B66;&#x73ED;&#x548C; (15) N &#x5F1B;&#x8C6B;&#x6570;&#x636E;&#x4EE5;&#x53CA; 49 ns &#x526F;&#x672C;&#x4EA4;&#x6362;&#x5206;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x6A21;&#x62DF;&#x8868;&#x660E;&#x4E2D;&#x6B8B;&#x7559; 11 18 &#x7684;&#x6682;&#x6001;&#x586B;&#x5145;&#x87BA;&#x65CB;&#x7ED3;&#x6784;&#x662F;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x4E0E;&#x4E92;&#x52A8;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x76D0;&#x6865;&#x6881;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6B63;&#x7535;&#x8377;&#x6B8B;&#x7559; Arg11 &#x6216; Arg18 &#x7684;&#x5927;&#x9F20;&#x6CAA;&#x548C; Glu13 &#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20; B &#x94FE;&#x548C;&#x758F;&#x6C34;&#x4FA7;&#x7FFC;&#x76D0;&#x7684;&#x6865;&#x6881;&#x3002;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x533A;&#x57DF;&#x7531; amyloidogenic &#x4E2D;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x7EC4;&#x6210;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6CAA;&#x548C;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x5927;&#x9F20;&#x6CAA; &#xFF08;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x4F8B;&#x5916;&#x7684;&#x4ED6;/Arg-18&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7684;&#x540C;&#x4E00;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x4ED6;/Arg-18 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x4EB2;&#x548C;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x4E0E;&#x5927;&#x9F20;&#x6CAA;&#x6CAA;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x4F53;&#x5171;&#x632F;&#x751F;&#x7269;&#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x5206;&#x6790;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5B83;&#x3002;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x7684;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x5F62;&#x5F0F;&#x7684;&#x6CAA;&#x4E0E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x5728;&#x9632;&#x6B62;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6CAA;&#x9F50;&#x805A;&#x7684;&#x63CF;&#x8FF0;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x6B8B;&#x4F59;&#x7ED3;&#x6784;&#x5728;&#x80F0;&#x5C9B;&#x6DC0;&#x7C89;&#x6837;&#x591A;&#x80BD;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

Islet amyloid polypeptide (IAPP), a 37-amino acid polypeptide hormone of the calcitonin family, is colocalized and cosecreted with insulin in secretory granules of pancreatic islet beta cells. IAPP can assemble into toxic oligomers and amyloid fibrils, a hallmark of type 2 diabetes. Its interactions with insulin in the secretory granules might influence the formation of cytotoxic oligomers and amyloid fibrils. Presented NMR analysis shows that IAPP, free in solution and in complex with insulin, retains elements of residual secondary structure. NMR chemical shifts and (15)N relaxation data as well as 49 ns replica exchange molecular dynamic simulations indicate that the transiently populated helical structure in residues 11-18 is essential for interactions with insulin. These interactions are mediated by salt bridges between positively charged residues Arg11 or Arg18 of rat IAPP and Glu13 of insulin B chain as well as by hydrophobic interactions flanking the salt bridges. The insulin binding region is composed of the same amino acids in amyloidogenic human IAPP and soluble rat IAPP (with the sole exception of His/Arg-18), implying the same binding mode for both hormones. This His/Arg-18 mutation results in reduced affinity binding of human IAPP to insulin in comparison to rat IAPP as it is detected by surface plasmon resonance biosensor analysis. Implications of the described interactions between soluble forms of IAPP and insulin in preventing oligomerization of human IAPP are discussed.

Residual structure in islet amyloid polypeptide mediates its interactions with soluble insulin.

&Icirc;lot amylo&iuml;de polypeptide (IAPP), une hormone polypeptidique acides amin&eacute;s 37 de la famille de la calcitonine, est &eacute;pididymaire et cosecreted avec de l&#39;insuline dans les granules de s&eacute;cr&eacute;tion des cellules b&ecirc;ta des &icirc;lots pancr&eacute;atiques. IAPP peut assembler en oligom&egrave;res toxiques et de fibrilles amylo&iuml;des, une caract&eacute;ristique du diab&egrave;te de type 2. Ses interactions avec l&#39;insuline dans les granules de s&eacute;cr&eacute;tion pourraient influer sur la formation d&#39;oligom&egrave;res cytotoxiques et de fibrilles amylo&iuml;des. Pr&eacute;sentation analyse RMN montre que IAPP, libre en solution et en complexe avec l&#39;insuline, conserve des &eacute;l&eacute;ments de structure secondaire r&eacute;siduelle. D&eacute;placements chimiques RMN et donn&eacute;es de relaxation (15) N ainsi que 49 ns r&eacute;plique &eacute;change dynamique simulations mol&eacute;culaires indiquent que la structure h&eacute;lico&iuml;dale transitoirement peupl&eacute;e en r&eacute;sidus 11-18 est essentielle pour les interactions avec l&#39;insuline. Ces interactions sont m&eacute;di&eacute;es par des ponts salins entre les r&eacute;sidus charg&eacute;s positivement Arg11 ou Arg18 de rat IAPP et Glu13 de la cha&icirc;ne de l&#39;insuline B, ainsi que par des interactions hydrophobes flanquant les ponts salins. La r&eacute;gion de liaison de l&#39;insuline est compos&eacute;e des acides amin&eacute;s m&ecirc;mes amylo&iuml;dog&egrave;ne IAPP humaine et soluble rat IAPP (&agrave; la seule exception de His/Arg-18), ce qui implique le m&ecirc;me mode de liaison pour les deux hormones. Cette mutation His/Arg-18 r&eacute;sultats en affinit&eacute; r&eacute;duite la liaison de l&#39;IAPP humaine &agrave; l&#39;insuline par rapport &agrave; rat IAPP tel qu&#39;il est d&eacute;tect&eacute; par l&#39;analyse de biocapteur de r&eacute;sonance plasmonique de surface. Les auteurs discutent les implications des interactions entre les formes solubles de l&#39;IAPP et d&#39;insuline dans la pr&eacute;vention de l&#39;oligom&eacute;risation de IAPP humaine d&eacute;crites.

La structure r&eacute;siduelle dans l&#39;islet amyloid polypeptide intervient dans ses interactions avec l&#39;insuline soluble.

Inselchen Amyloid Polypeptid (IAPP), 37-amino Acid Polypeptid Hormon Calcitonin-Familie ist colocalized und cosecreted mit Insulin in sekretorisches Granulat von pankreatischen Inselzellen Beta. IAPP kann in giftigen Oligomere und Amyloid-Fibrillen, ein Markenzeichen von Typ 2 Diabetes einbauen. Seine Interaktionen mit Insulin in der sekretorischen Granulat k&ouml;nnen die Bildung von zytotoxischen Oligomere und Amyloid-Fibrillen beeinflussen. Vorgestellten NMR-Analyse zeigt, dass die IAPP, frei in L&ouml;sung und im Komplex mit Insulin, Elemente der Sekund&auml;rstruktur Restzucker beh&auml;lt. NMR-chemische Verschiebung und (15) N-Entspannung-Daten sowie 49 ns Replikat Austausch Molekulare dynamische Simulationen zeigen, dass die vor&uuml;bergehend besiedelte spiralf&ouml;rmige Struktur in R&uuml;ckst&auml;nde 11-18 f&uuml;r Wechselwirkungen mit Insulin wichtig. Diese Interaktionen werden vermittelt durch Salz Br&uuml;cken zwischen positiv geladenen R&uuml;ckst&auml;nde Arg11 oder Arg18 der Ratte IAPP und Glu13 von Insulin B Kette sowie durch hydrophobe Wechselwirkungen flankierenden Salzen Br&uuml;cken. Die Insulin-Bindung-Region besteht aus den gleichen Aminos&auml;uren in Amyloidogenic menschlichen IAPP und l&ouml;slichen Ratte IAPP (mit Ausnahme von His/Arg-18), impliziert den gleichen Bindungsmodus f&uuml;r beide Hormone. His/Arg-18 die Mutation f&uuml;hrt zu geringeren Affinit&auml;t Binden von menschlichen IAPP auf Insulin im Vergleich zu Ratte IAPP wie es vom Surface Plasmon Resonance Biosensor Analyse erkannt wird. Auswirkungen der beschriebenen Interaktionen zwischen l&ouml;slichen Formen der IAPP und Insulin verhindert Oligomerisierung von menschlichen IAPP werden diskutiert.

Residual Struktur in Ilet Amyloid Polypeptid vermittelt seine Interaktionen mit l&ouml;sliches Insulin.

Polipeptide amiloide isolotto (IAPP), un ormone polipeptide 37-amino acido della famiglia della calcitonina, &egrave; colocalized e cosecreted con insulina nei granuli secretori delle cellule beta del pancreas isolotto. IAPP pu&ograve; assemblare in tossici oligomeri e fibrille amiloidi, una caratteristica del diabete di tipo 2. Sue interazioni con insulina nei granuli secretori potrebbero influenzare la formazione di oligomeri citotossici e fibrille amiloidi. Presentato l&#39;analisi NMR Mostra che IAPP, libero in soluzione e nel complesso con insulina, conserva elementi della struttura secondaria residua. Spostamenti chimici NMR e dati di rilassamento (15) N cos&igrave; come 49 ns replica scambio molecolare simulazioni dinamiche indicano che la struttura elicoidale transitoriamente popolata in residui 11-18 &egrave; essenziale per le interazioni con l&#39;insulina. Queste interazioni sono mediate dal sale ponti tra residui carichi positivamente Arg11 o Arg18 di ratto IAPP e Glu13 della catena di insulina B nonch&eacute; da interazioni idrofobiche che fiancheggiano i ponti sali. La regione di associazione di insulina &egrave; composta da amminoacidi stessi in amiloidogeniche IAPP umana e solubile ratto IAPP (con la sola eccezione del suo/Arg-18), che implica la stessa modalit&agrave; di associazione per entrambi gli ormoni. Questa mutazione His/Arg-18 risultati nella ridotta affinit&agrave; di associazione di IAPP umano all&#39;insulina rispetto al ratto IAPP come viene rilevato da analisi di biosensore risonanza plasmonica di superficie. Vengono discusse le implicazioni delle descritte interazioni tra forme solubili di IAPP e insulina nella prevenzione di oligomerizzazione di IAPP umana.

Struttura residua nel polipeptide amiloide isolotto media le interazioni con l&#39;insulina solubile.

&#x81B5;&#x5CF6;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; (IAPP) 37 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30C8;&#x30CB;&#x30F3;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x9846;&#x7C92;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6; &beta; &#x7D30;&#x80DE;&#x3092; cosecreted &#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;IAPP &#x306F;&#x3001;&#x6709;&#x6BD2;&#x306A;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;, 2 &#x578B;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x7ACB;&#x3066;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x9846;&#x7C92;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7D30;&#x80DE;&#x50B7;&#x5BB3;&#x6027;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F; NMR &#x89E3;&#x6790; IAPP&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x7121;&#x6599;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x6B8B;&#x7559;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;NMR &#x5316;&#x5B66;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;49 ns &#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30AB;&#x4EA4;&#x63DB;&#x5206;&#x5B50;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B; (15) N &#x7DE9;&#x548C;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x6B8B;&#x7559; 11 18 &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x4F4F;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x30D8;&#x30EA;&#x30AB;&#x30EB;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x6B63;&#x8377;&#x96FB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E; Arg11 &#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5869;&#x6A4B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x307E;&#x305F;&#x306F; Arg18 &#x306E;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; IAPP &#x3068;&#x5869;&#x6A4B;&#x306B;&#x4E26;&#x3076;&#x758E;&#x6C34;&#x6027;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3; B &#x9396;&#x306E; Glu13&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x9818;&#x57DF;&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3067;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; IAPP &#x3068;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; IAPP (&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x4F8B;&#x5916;&#x3067;&#x5F7C;/Arg-18&#xFF09;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5F7C;/Arg 18 &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8868;&#x9762;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E2;&#x30F3;&#x5171;&#x9CF4;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x5206;&#x6790;&#x691C;&#x51FA;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3; &#x30E9;&#x30C3;&#x30C8; IAPP &#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x4EBA;&#x9593; IAPP &#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x30A2;&#x30D5;&#x30A3;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;IAPP &#x306E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; IAPP &#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30DF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30DD;&#x30EA;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B8B;&#x7559;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC791;&#xC740; &#xC12C; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; polypeptide (IAPP) &#xB2CC; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; 37 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178; &#xC0B0; polypeptide &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; colocalized &#xC774;&#xBA70; &#xBD84;&#xACFC; &#xB9BD; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xACFC; cosecreted. IAPP &#xB3C5;&#xC131; &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC18C;, &#xC81C; 2 &#xD615; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xACFC; &#xB9BD;&#xC5D0;&#xB294; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xACFC;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; cytotoxic &#xC62C;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; &#xC18C;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC2DC; NMR &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; IAPP, &#xBB34;&#xB8CC; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;, &#xC794;&#xC5EC; &#xBCF4;&#xC870; &#xAD6C;&#xC870;&#xCCB4;&#xC758; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. NMR &#xD654;&#xD559; &#xAD50;&#xB300;&#xC640; 49 ns &#xBCF5;&#xC81C; exchange &#xBD84;&#xC790; &#xB3D9;&#xC801; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC73C;&#xB85C; (15) N &#xD734;&#xC2DD; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 11 &#xC6D4; 18 &#xC77C;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; transiently &#xCC44;&#xC6CC;&#xC9C4;&#xB41C; &#xB098;&#xC120;&#xD615; &#xAD6C;&#xC870; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xACFC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC740; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCDA9;&#xC804;&#xB41C; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; Arg11 &#xC0AC;&#xC774; &#xC18C;&#xAE08; &#xB2E4;&#xB9AC; &#xC911;&#xC7AC; &#xB610;&#xB294; arg18&#xC758; &#xC950; IAPP&#xC640; &#xC18C;&#xAE08; &#xB2E4;&#xB9AC; &#xCE21;&#xBA74; &#xC18C;&#xC218; &#xC131; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; B &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; Glu13. &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; amyloidogenic &#xAC19;&#xC740; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC778;&#xAC04; IAPP (&#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC608;&#xC678;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xADF8; &#xC758;/Arg-18), &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xC950; IAPP &#xC554;&#xC2DC; &#xB450; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xC640;. &#xC774; &#xADF8; &#xC758;/Arg 18 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD45C;&#xBA74; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4;&#xBAAC; &#xACF5;&#xBA85; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xC13C;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; IAPP IAPP &#xC950;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. IAPP&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; IAPP oligomerization &#xBC29;&#xC9C0;&#xB294; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC04;&#xC758; &#xC124;&#xBA85;&#xB41C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC758;&#xBBF8;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; &#xC12C; &#xB179;&#xB9D0; &#xCCB4; polypeptide &#xC794;&#xC5EC; &#xAD6C;&#xC870; &#xC911;&#xC7AC; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xACFC;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;.

Islote polip&eacute;ptido amiloide (IAPP), una hormona polip&eacute;ptido 37 amino&aacute;cidos de la familia de la calcitonina, es colocalized y cosecreted con insulina en gr&aacute;nulos secretores de las c&eacute;lulas beta de los islotes pancre&aacute;ticos. IAPP puede montar en olig&oacute;meros t&oacute;xicos y fibrillas amiloideas, un rasgo distintivo de la diabetes tipo 2. Sus interacciones con la insulina en los gr&aacute;nulos secretores pueden influir en la formaci&oacute;n de olig&oacute;meros citot&oacute;xicos y fibrillas amiloideas. An&aacute;lisis de NMR presentado muestran que IAPP, libre en soluci&oacute;n y en conjunto con la insulina, conserva elementos de estructura secundaria residual. Cambios qu&iacute;micos NMR y datos de relajaci&oacute;n de N (15) as&iacute; como 49 ns r&eacute;plica intercambio molecular simulaciones indican que la estructura helicoidal transitoriamente poblada en residuos 11-18 es esencial para las interacciones con la insulina. Estas interacciones est&aacute;n mediadas por puentes de sal entre residuos cargados positivamente Arg11 o Arg18 de rata IAPP y Glu13 de cadena de insulina B, as&iacute; como por interacciones hidrof&oacute;bicas que flanqueaban los puentes de sal. La regi&oacute;n de uni&oacute;n de la insulina est&aacute; compuesta por los mismos amino&aacute;cidos en amyloidogenic IAPP humana y la rata soluble IAPP (con la &uacute;nica excepci&oacute;n de su/Arg-18), lo que implica el mismo modo vinculante para ambas hormonas. Esta mutaci&oacute;n de su/Arg-18 resultados en afinidad reducida vinculantes de IAPP humano a la insulina en comparaci&oacute;n con ratas IAPP, ya que es detectada por an&aacute;lisis de biosensor de resonancia de plasmones. Se discuten las implicaciones de las interacciones descritas entre formas solubles de IAPP e insulina en la prevenci&oacute;n de Oligomerizaci&oacute;n de IAPP humana.

Estructura residual polip&eacute;ptido amiloide islote interviene en sus interacciones con la insulina soluble.

HMGA &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E2D;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x8FC7;&#x6765;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x9AD8;&#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x764C;&#x3002;&#x7262;&#x56FA;&#x5730;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86;&#x6076;&#x6027;&#x80BF;&#x7624;&#x75C5;&#x4EBA;&#x9884;&#x540E;&#x6307;&#x6570;&#x3001; HMGA &#x6C34;&#x5E73;&#x5EA6;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;&#x8010;&#x4EBA;&#x5BFB;&#x5473;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;HMGA2 &#x4E5F;&#x662F;&#x5728;&#x53D1;&#x73B0;&#x7F55;&#x89C1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x5316;&#x7597;&#x6709;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; HMGA1a/b &#x548C; HMGA2 &#x62E5;&#x6709;&#x5185;&#x5728; dRP &#x548C; AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x5288;&#x88C2;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x548C; lysines &#x548C; arginines &#x5728;&#x94A9; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4EB2;&#x6838;&#x8BD5;&#x5242;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x4ECE;&#x65E0;&#x5230;&#x6709;&#x5730;&#x70B9;&#xFF0C;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x56F0; HMGA2&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5229;&#x7528;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5316;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8BC1;&#x636E;&#x5173;&#x8054;&#x88C2;&#x89E3;&#x9176;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x62B5;&#x6297;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x5207;&#x9664;&#x7684; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x4FEE;&#x590D;&#x901A;&#x8DEF; (BER)&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4E0E; HMGA2 &#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x5173;&#x8054;&#x8D77;&#x6765;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5C55;&#x793A;&#x4EBA;&#x7C7B; AP &#x6838;&#x9178;&#x5185;&#x5207;&#x9176; 1 &#x548C; HMGA2 &#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5B83;&#x652F;&#x6301;&#x6211;&#x4EEC; HMGA2 &#x53EF;&#x4EE5;&#x7EB3;&#x5165;&#x8702;&#x7A9D; BER &#x673A;&#x68B0;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4ECE;&#x800C;&#x4E3A; HMGA2 &#x6807;&#x8BC6;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x5728;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x610F;&#x4E49;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x3002;

HMGA2 &#x5C55;&#x54C1; dRP/AP &#x7AD9;&#x70B9;&#x5288;&#x88C2;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x5316;&#x7597;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4ECE; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x4FDD;&#x62A4;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

HMGA proteins are not translated in normal human somatic cells, but are present in high copy numbers in pluripotent embryonic stem cells and most neoplasias. Correlations between the degree of malignancy, patient prognostic index and HMGA levels have been firmly established. Intriguingly, HMGA2 is also found in rare tumor-inducing cells which are resistant to chemotherapy. Here, we demonstrate that HMGA1a/b and HMGA2 possess intrinsic dRP and AP site cleavage activities, and that lysines and arginines in the AT-hook DNA-binding domains function as nucleophiles. We also show that HMGA2 can be covalently trapped at genomic abasic sites in cancer cells. By employing a variety of cell-based assays, we provide evidence that the associated lyase activities promote cellular resistance against DNA damage that is targeted by base excision repair (BER) pathways, and that this protection directly correlates with the level of HMGA2 expression. In addition, we demonstrate an interaction between human AP endonuclease 1 and HMGA2 in cancer cells, which supports our conclusion that HMGA2 can be incorporated into the cellular BER machinery. Our study thus identifies an unexpected role for HMGA2 in DNA repair in cancer cells which has important clinical implications for disease diagnosis and therapy.

HMGA2 exhibits dRP/AP site cleavage activity and protects cancer cells from DNA-damage-induced cytotoxicity during chemotherapy.

Prot&eacute;ines HMGA ne sont pas traduits dans les cellules somatiques humaines normales, mais sont pr&eacute;sents en nombre &eacute;lev&eacute; de copies dans les cellules souches embryonnaires pluripotentes et la plupart des n&eacute;oplasies. Corr&eacute;lations entre le degr&eacute; de malignit&eacute;, patient index pronostique et niveaux HMGA ont &eacute;t&eacute; fermement &eacute;tablies. Curieusement, HMGA2 est &eacute;galement trouv&eacute;e dans rare tumeur induisant des cellules qui sont r&eacute;sistantes &agrave; la chimioth&eacute;rapie. Ici, nous d&eacute;montrons que HMGA1a/b et HMGA2 poss&egrave;dent dRP intrins&egrave;que et les activit&eacute;s de clivage du site AP, et que les lysines et arginines dans les domaines de liaison &agrave; l&#39;ADN AT-crochet fonctionnent comme des nucl&eacute;ophiles. Nous montrons &eacute;galement que HMGA2 peut &ecirc;tre pi&eacute;g&eacute; par liaison covalente &agrave; des sites abasiques g&eacute;nomiques dans les cellules canc&eacute;reuses. En utilisant une vari&eacute;t&eacute; d&#39;analyses cellulaires, nous fournir la preuve que les activit&eacute;s connexes lyase promouvoir la r&eacute;sistance cellulaire contre les dommages &agrave; l&#39;ADN qui sont cibl&eacute; par excision de base de r&eacute;paration des voies (BER), et que cette protection est directement en corr&eacute;lation avec le niveau d&#39;expression HMGA2. En outre, nous avons d&eacute;montr&eacute; une interaction entre l&#39;humain endonucl&eacute;ase AP 1 et HMGA2 dans les cellules canc&eacute;reuses, qui soutient notre conclusion que HMGA2 peut &ecirc;tre incorpor&eacute; &agrave; la machinerie cellulaire de BER. Notre &eacute;tude identifie ainsi un r&ocirc;le inattendu pour HMGA2 dans la r&eacute;paration de l&#39;ADN dans les cellules canc&eacute;reuses qui a d&#39;importantes implications cliniques pour le diagnostic et la th&eacute;rapie.

HMGA2 pr&eacute;sente une activit&eacute; de clivage site dRP/AP et prot&egrave;ge les cellules canc&eacute;reuses de cytotoxicit&eacute; induite par l&#39;ADN-dommages pendant la chimioth&eacute;rapie.

HMGA Proteine werden nicht in normalen menschlichen K&ouml;rperzellen &uuml;bersetzt, aber in hohen Kopie Zahlen in pluripotenten embryonalen Stammzellen und die meisten Neoplasias vertreten sind. Korrelationen zwischen den Grad der B&ouml;sartigkeit, geduldig prognostischer Index und HMGA Ebenen haben fest etabliert. Interessanterweise ist HMGA2 auch gefunden in seltenen Tumor ausl&ouml;sende Zellen die gegen Chemotherapie resistent sind. Hier zeigen wir, dass HMGA1a/b und HMGA2 systeminterne dRP und AP Spaltung Aktivit&auml;ten besitzen und Lysin und Arginines in den AT-Haken DNA-bindenden Dom&auml;nen als Nukleophiler fungieren. Wir zeigen auch, dass HMGA2 kovalent an genomischer abasic Standorten in Krebszellen abgefangen werden k&ouml;nnen. Durch den Einsatz verschiedener zellbasierte Assays, bieten wir Beweise daf&uuml;r, dass die F&ouml;rderung der zugeordneten Lyase-Aktivit&auml;ten zellul&auml;re Widerstand gegen DNA-Sch&auml;den, die durch base Exzision ausgerichtet ist (BER) Wege zu reparieren, und, dass dieser Schutz korreliert direkt mit dem Niveau der HMGA2 Ausdruck. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir eine Interaktion zwischen menschlichen AP Endonuklease 1 und HMGA2 in Krebszellen, die unsere Schlussfolgerung st&uuml;tzt, dass HMGA2 in der zellul&auml;ren BER-Maschinen integriert werden k&ouml;nnen. Unsere Studie identifiziert somit eine unerwartete Rolle f&uuml;r HMGA2 in DNA-Reparatur in Krebszellen die wichtige klinische Implikationen f&uuml;r Krankheit-Diagnose und Therapie hat.

HMGA2 Exponate dRP/AP Website Schneidefunktion und sch&uuml;tzt Krebszellen vor DNA-Sch&auml;den-induzierte Zytotoxizit&auml;t w&auml;hrend einer Chemotherapie.

Le proteine HMGA non vengono tradotti in normali cellule somatiche umane, ma sono presenti in numero di copie elevato nelle cellule staminali embrionali pluripotenti e la maggior parte delle neoplasie. Correlazioni tra il grado di malignit&agrave;, indice prognostico paziente e HMGA livelli sono state stabilite saldamente. Curiosamente, HMGA2 &egrave; anche che trovato nel raro tumore induce le cellule che sono resistenti alla chemioterapia. Qui, noi dimostrare che HMGA1a/b e HMGA2 possiedono intrinseche dRP e AP sito attivit&agrave; delle scissione, e che Lisine e ARGININE nei domini AT-gancio DNA-binding funzionano come nucleofili. Mostriamo anche che HMGA2 pu&ograve; essere intrappolata in covalenza presso siti abasic genomici nelle cellule tumorali. Impiegando una variet&agrave; di cell-based assays, forniamo prove che le attivit&agrave; associate liasi promuovono la resistenza cellulare contro il danno al DNA che &egrave; mirato da base escissione riparazione percorsi (BER), e che questa protezione si correla direttamente con il livello di espressione HMGA2. Inoltre, ci dimostrano un&#39;interazione tra umani endonucleasi AP 1 e HMGA2 nelle cellule tumorali, che sostiene la nostra conclusione che HMGA2 possono essere incorporati nel macchinario cellulare BER. Il nostro studio identifica quindi un ruolo inatteso per HMGA2 nella riparazione del DNA nelle cellule tumorali che ha importanti implicazioni cliniche per la diagnosi della malattia e terapia.

HMGA2 esibisce attivit&agrave; di scissione del sito dRP/AP e protegge le cellule tumorali da citotossicit&agrave; indotta da danno del DNA durante la chemioterapia.

HMGA &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x5024;&#x3068;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x764C;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x3001;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x4E88;&#x5F8C;&#x4E88;&#x6E2C;&#x6307;&#x6570;&#x3068; HMGA &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x306F;&#x3057;&#x3063;&#x304B;&#x308A;&#x3068;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Lrad HMGA2 &#x3082;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x73CD;&#x3057;&#x3044;&#x816B;&#x760D;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306F;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; HMGA1a/b &#x3068; HMGA2 &#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F; dRP &#x3068; AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x958B;&#x88C2;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3; AT &#x30D5;&#x30C3;&#x30AF; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6C42;&#x6838;&#x8A66;&#x85AC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F; HMGA2 &#x306B;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x8131;&#x5869;&#x57FA;&#x90E8;&#x4F4D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;.&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5869;&#x57FA;&#x9664;&#x53BB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x76EE;&#x6A19;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B; DNA &#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0; (BER) &#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4FDD;&#x8B77;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5; HMGA2 &#x5F0F;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; AP &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 1 &#x3068; HMGA2 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E; BER &#x6A5F;&#x68B0;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3092;&#x652F;&#x3048;&#x308B; HMGA2 &#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x306E;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x81E8;&#x5E8A;&#x542B;&#x610F;&#x3092;&#x6301;&#x3064; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x306B;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4E88;&#x60F3;&#x5916;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E; HMGA2 &#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

HMGA2 dRP/AP &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x958B;&#x88C2;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x304C;&#x3093;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x8A98;&#x767A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x5316;&#x5B66;&#x7642;&#x6CD5;&#x4E2D;&#x306B;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

HMGA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB294; &#xBC88;&#xC5ED; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xC0AC;&#xBCF8; &#xC22B;&#xC790;&#xC640; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD615;&#xC131;. &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;, &#xD658;&#xC790; &#xC804;&#xC870; &#xC778;&#xB371;&#xC2A4; &#xBC0F; HMGA &#xC218;&#xC900; &#xC815;&#xB3C4; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4; &#xD655;&#xACE0; &#xD558; &#xAC8C; &#xC124;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE00;&#xC5D0;, hmga2&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCFC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB4DC;&#xBB38; &#xC885;&#xC591; &#xC720;&#xB3C4; &#xD654;&#xD559; &#xC694;&#xBC95;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xB610;&#xD55C; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, HMGA1a/b&#xC640; HMGA2 &#xB0B4;&#xC7A5; Drp&#xC640; AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD65C;&#xB3D9;, &#xBCF4;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; lysines &#xBC0F; arginines AT &#xD6C4;&#xD06C; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560; nucleophiles&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; HMGA2 &#x70AD; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; abasic &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xAC07;&#xD600; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC81C;&#xACF5; &#xC99D;&#xAC70; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; lyase &#xD65C;&#xB3D9; &#xD64D;&#xBCF4; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xD558; &#xC5EC; &#xD0C0;&#xAC9F; DNA &#xC190;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC800;&#xD56D; (BER) &#xACBD;&#xB85C; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;&#xC774; &#xBCF4;&#xD638; &#xC9C1;&#xC811; HMGA2 &#xC2DD;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; AP endonuclease 1 &#xBC0F; HMGA2 &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; BER &#xAE30;&#xACC4;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xB860;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; HMGA2 &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC784;&#xC0C1; &#xC554;&#xC2DC;&#xB294; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; DNA &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; hmga2&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xC0C1;&#xCE58; &#xBABB;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

HMGA2 dRP/AP &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBD84;&#xC5F4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xD654;&#xD559; &#xC694;&#xBC95; &#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; DNA &#xC190;&#xC0C1; &#xC720;&#xBC1C; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD55C;&#xB2E4;.

Prote&iacute;nas HMGA no se traducen en c&eacute;lulas som&aacute;ticas humanas normales, pero est&aacute;n presentes en n&uacute;meros de copia alta en las c&eacute;lulas madre embrionarias pluripotenciales y mayor&iacute;a de neoplasias. Correlaciones entre el grado de malignidad, paciente &iacute;ndice pron&oacute;stico y niveles HMGA se han establecido firmemente. Curiosamente, HMGA2 tambi&eacute;n es encontrado en raro tumor-inducir c&eacute;lulas que son resistentes a la quimioterapia. Aqu&iacute;, demostramos que HMGA1a/b y HMGA2 poseen dRP intr&iacute;nseca y AP sitio escote actividades, y que lisinas y arginines en los dominios de uni&oacute;n al ADN en gancho funcionan como nucle&oacute;filos. Tambi&eacute;n mostramos que HMGA2 pueden quedar atrapados covalente en gen&oacute;micos un sitios en las c&eacute;lulas cancerosas. Empleando una variedad de ensayos celulares, Proporcionamos evidencia que las actividades asociadas liasa promoci&oacute;n la resistencia celular contra da&ntilde;os en el ADN que est&aacute; dirigido por la supresi&oacute;n de base reparar caminos (BER), y que esta protecci&oacute;n se correlaciona directamente con el nivel de expresi&oacute;n HMGA2. Adem&aacute;s, demostramos una interacci&oacute;n entre humanos AP endonucleasa 1 y HMGA2 en las c&eacute;lulas cancerosas, que apoya nuestra conclusi&oacute;n que HMGA2 puede ser incorporado en la maquinaria celular de BER. As&iacute;, nuestro estudio identifica un papel inesperado para HMGA2 en la reparaci&oacute;n del ADN en las c&eacute;lulas cancerosas que tiene importantes implicaciones cl&iacute;nicas para el diagn&oacute;stico de la enfermedad y terapia.

HMGA2 exhibe actividad dRP/AP de la hendidura del sitio y protege a las c&eacute;lulas cancerosas de citotoxicidad inducida por ADN-da&ntilde;os durante la quimioterapia.

&#x5C0F;&#x3001; &#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x76F8;&#x8FDE;&#x7684; HMGA &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5305;&#x542B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#xFF0C;&#x6240;&#x8C13;&#x5728;&#x94A9;&#xFF0C;&#x4F18;&#x5148;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5728;&#x5BCC;&#x77ED;&#x5E8F;&#x5217;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x4E30;&#x5BCC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72; (ES) &#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6700;&#x6076;&#x6027;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x53EF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x6B63;&#x5E38;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x884C;&#x4E8B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6D3B;&#x5316;&#x5242;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x963B;&#x904F;&#x7269;&#x548C;&#x6700;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x6240;&#x9009;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x57DF;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4FC3;&#x8FDB; DNA &#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x66F4;&#x6539;&#x3002;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;HMGA2 &#x88AB;&#x53C2;&#x4E0E;&#x67D0;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x80BF;&#x7624;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5176;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x7624;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11; HMGA &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5982;&#x4F55;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6253;&#x5305;&#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7684; DNA&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5C06;&#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x5728;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x89C4;&#x6A21;&#x3002;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E; HMGA2 &#x6625;&#x98CE;&#x5F97;&#x610F;&#x7684;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H1 &#x5728;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x53D8; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x57DF;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7F51;&#x7EDC;&#x4F5C;&#x51FA;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;HMGA2 &#x4F3C;&#x4E4E;&#x4E5F;&#x80FD;&#x591F;&#x62DB;&#x52DF;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x4FEE;&#x9970;&#x6765;&#x89E6;&#x53D1;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x76F4;&#x63A5;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x9176;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6240;&#x793A;&#x591A;&#x4E2A; HMGA2 &#x5206;&#x5B50;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x5C0F;&#x4F53;&#x6838;&#x5FC3;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; HMGA2 &#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8BC4;&#x6CE8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; HMGA2&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x548C;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x7EF4;&#x62A4;&#x3002;

&#x9AD8;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7387;&#x65CF;&#x86CB;&#x767D; HMGA2&#xFF1A; co-regulator &#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x591A;&#x6F5C;&#x80FD;&#x5417;&#xFF1F;

The small, chromatin-associated HMGA proteins contain three separate DNA binding domains, so-called AT hooks, which bind preferentially to short AT-rich sequences. These proteins are abundant in pluripotent embryonic stem (ES) cells and most malignant human tumors, but are not detectable in normal somatic cells. They act both as activator and repressor of gene expression, and most likely facilitate DNA architectural changes during formation of specialized nucleoprotein structures at selected promoter regions. For example, HMGA2 is involved in transcriptional activation of certain cell proliferation genes, which likely contributes to its well-established oncogenic potential during tumor formation. However, surprisingly little is known about how HMGA proteins bind DNA packaged in chromatin and how this affects the chromatin structure at a larger scale. Experimental evidence suggests that HMGA2 competes with binding of histone H1 in the chromatin fiber. This could substantially alter chromatin domain structures in ES cells and contribute to the activation of certain transcription networks. HMGA2 also seems capable of recruiting enzymes directly involved in histone modifications to trigger gene expression. Furthermore, it was shown that multiple HMGA2 molecules bind stably to a single nucleosome core particle whose structure is known. How these features of HMGA2 impinge on chromatin organization inside a living cell is unknown. In this commentary, we propose that HMGA2, through the action of three independent DNA binding domains, substantially contributes to the plasticity of ES cell chromatin and is involved in the maintenance of a un-differentiated cell state.

The high mobility group protein HMGA2: a co-regulator of chromatin structure and pluripotency in stem cells?

Les prot&eacute;ines HMGA petits, associ&eacute;e &agrave; la chromatine contiennent trois ADN liant domaines distincts, ce que l&#39;on appelle &agrave; crochets, qui lient pr&eacute;f&eacute;rentiellement &agrave; courtes s&eacute;quences riches en AT. Ces prot&eacute;ines sont abondantes dans les cellules souches embryonnaires (ES) pluripotentes et plus malins tumeurs humaines, mais ne sont pas d&eacute;tectables dans les cellules somatiques normales. Ils agissent comme activateur et r&eacute;presseur de l&#39;expression g&eacute;nique et tr&egrave;s probablement facilitent les changements architectes de l&#39;ADN au cours de la formation de structures sp&eacute;cialis&eacute;es nucl&eacute;oprot&eacute;ine &agrave; r&eacute;gions promotrices s&eacute;lectionn&eacute;s. Par exemple, HMGA2 est impliqu&eacute; dans l&#39;activation de la transcription de certains g&egrave;nes de la prolif&eacute;ration cellulaire, qui contribue probablement &agrave; son potentiel oncog&egrave;ne bien &eacute;tablie au cours de la formation de tumeurs. Cependant, &eacute;tonnamment on conna&icirc;t comment les prot&eacute;ines HMGA liaison ADN emball&eacute;e dans la chromatine et comment cela influe sur la structure de la chromatine &agrave; plus grande &eacute;chelle. L&#39;&eacute;vidence exp&eacute;rimentale sugg&egrave;re que HMGA2 rivalise avec la liaison de l&#39;histone H1 dans la fibre de chromatine. Cela pourrait consid&eacute;rablement modifier la structure de domaines de la chromatine dans les cellules ES et contribuer &agrave; l&#39;activation de certains r&eacute;seaux de transcription. HMGA2 semble aussi capable de recruter directement impliqu&eacute;s dans les modifications d&#39;histone pour d&eacute;clencher l&#39;expression des g&egrave;nes d&#39;enzymes. En outre, il a &eacute;t&eacute; d&eacute;montr&eacute; que plusieurs mol&eacute;cules HMGA2 lient solidement &agrave; une particule de noyau nucleosome unique dont la structure est connue. Comment ces fonctionnalit&eacute;s de HMGA2 empi&egrave;tent sur l&#39;organisation de la chromatine &agrave; l&#39;int&eacute;rieur d&#39;une cellule vivante est inconnue. Dans ce commentaire, nous proposons HMGA2, sous l&#39;action des trois domaines de liaison ADN ind&eacute;pendantes, substantiellement contribue &agrave; la plasticit&eacute; de la chromatine cellules ES et est impliqu&eacute; dans le maintien d&#39;un &eacute;tat des cellules.

La prot&eacute;ine de groupe haute mobilit&eacute; HMGA2 : un cor&eacute;gulateur de structure de la chromatine et la pluripotence dans les cellules souches ?

Die kleine, Chromatin-assoziierten HMGA Proteine enthalten drei separate DNA-Bindung Dom&auml;nen sogenannte am Haken, die vorzugsweise an kurze AT-reichen Sequenzen zu binden. Diese Proteine sind reichlich vorhanden in pluripotenten embryonalen Stammzellen (ES) und die meisten b&ouml;sartigen menschlichen Tumoren, aber sind nicht in normalen K&ouml;rperzellen nachweisbar. Sie fungieren sowohl als Aktivator und Hemmer der Genexpression und h&ouml;chstwahrscheinlich Architektur&auml;nderungen DNA w&auml;hrend der Bildung von spezialisierten Nukleoprotein Strukturen auf ausgew&auml;hlten Projekttr&auml;ger Regionen erleichtern. Beispielsweise ist HMGA2 transkriptionelle Aktivierung bestimmter Zelle Verbreitung Gene beteiligt, und tr&auml;gt wahrscheinlich zu seinem bew&auml;hrten Onkogene Potential w&auml;hrend der Tumorbildung. Jedoch ist &uuml;berraschend wenig bekannt &uuml;ber wie HMGA Proteine binden DNA im Chromatin verpackt und wie dies die Chromatin-Struktur im gr&ouml;&szlig;eren Ma&szlig;stab beeinflusst. Experimentelle Hinweise darauf, dass HMGA2 mit Bindung von Histon H1 in der Chromatin Faser konkurriert. Dies k&ouml;nnte wesentlich Chromatin Dom&auml;nenstrukturen in ES-Zellen ver&auml;ndern und dazu beitragen, die Aktivierung von bestimmten Transkription-Netzen. HMGA2 scheint auch f&auml;hig zu rekrutieren Enzyme, die unmittelbar mit Histon-Modifikationen Genexpression ausl&ouml;sen. Dar&uuml;ber hinaus konnte gezeigt werden, dass mehrere HMGA2-Molek&uuml;le zu einem einzigen Nukleosom Kern Teilchen stabil gebunden deren Struktur bekannt ist. Es ist unbekannt, wie diese Features von HMGA2 in Chromatin Organisation innerhalb einer lebenden Zelle eingreifen. In diesem Kommentar schlagen wir vor, dass HMGA2, durch die T&auml;tigkeit der drei unabh&auml;ngige DNA-Bindung-Dom&auml;nen, wesentlich, die Plastizit&auml;t der ES Zelle Chromatin beitr&auml;gt und engagiert sich in der Pflege eines Staates un-differentiated Zelle.

Die hohe Mobilit&auml;t Gruppe Protein HMGA2: eine Co-regulator der Chromatin Struktur und Pluripotenz in Stammzellen?

Le proteine HMGA piccole, cromatina associata contengono tre DNA binding domini separati, cosiddetti a ganci, che si legano preferenzialmente a brevi sequenze ricche di AT. Queste proteine sono abbondanti nelle cellule pluripotenti staminali embrionali (ES) e i tumori pi&ugrave; maligni umani, ma non sono rilevabili in normali cellule somatiche. Agiscono sia come attivatore e repressore dell&#39;espressione genica e molto probabilmente facilitare cambiamenti architettonici del DNA durante la formazione di strutture specializzate nucleoproteina presso regioni promoter selezionati. Ad esempio, HMGA2 &egrave; coinvolto nell&#39;attivazione trascrizionale di certi geni di proliferazione delle cellule, che probabilmente contribuisce al suo potenziale oncogenico consolidata durante la formazione del tumore. Tuttavia, sorprendentemente poco &egrave; conosciuto circa come le proteine HMGA legano il DNA impaccato nella cromatina e come questo influenzi la struttura della cromatina a scala pi&ugrave; ampia. Prove sperimentali suggeriscono che HMGA2 compete con il legame dell&#39;istone H1 in fibra di cromatina. Questo sostanzialmente potrebbe alterare le strutture di dominio della cromatina in cellule ES e contribuiscono all&#39;attivazione di alcune reti di trascrizione. HMGA2 sembra anche in grado di reclutare direttamente coinvolti nelle modifiche dell&#39;istone di attivare l&#39;espressione genica di enzimi. Inoltre, &egrave; stato dimostrato che pi&ugrave; HMGA2 molecole si legano stabilmente a cui la struttura &egrave; conosciuta una particella del nucleo singolo nucleosoma. Come queste caratteristiche di HMGA2 incidano sull&#39;organizzazione della cromatina all&#39;interno di una cellula vivente &egrave; sconosciuto. In questo commento, proponiamo che HMGA2, attraverso l&#39;azione di tre domini di legame del DNA indipendente, sostanzialmente contribuisce alla plasticit&agrave; della cromatina delle cellule ES &egrave; coinvolto nel mantenimento di uno stato di cellule indifferenziato.

Proteina high mobility group HMGA2: un coregolatore della struttura della cromatina e pluripotenza in cellule staminali?

&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;, &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023; HMGA &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x306F; 3 &#x3064;&#x500B;&#x5225; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x3044;&#x308F;&#x3086;&#x308B;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x77ED;&#x3044; AT-&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; &#x30D5;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79; &#xFF08;ES&#xFF09; &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x60AA;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x3067;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x30EA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x6700;&#x3082;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044; DNA &#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x4E0A;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x5C02;&#x9580;&#x6838;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x904E;&#x7A0B;&#x3002;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;HMGA2 &#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x305D;&#x306E;&#x5B9A;&#x8A55;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x5B9A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x5C11;&#x3057;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3067;&#x30D1;&#x30C3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B8;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F; DNA &#x306E; HMGA &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;&#x3053;&#x308C;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0; HMGA2 &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; H1 &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x7AF6;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HMGA2 &#x307E;&#x305F;&#x9175;&#x7D20;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x30FC;&#x3059;&#x308B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x52DF;&#x96C6;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E; HMGA2 &#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30B3;&#x30A2;&#x7C92;&#x5B50;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B; HMGA2 &#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x59A8;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D44;&#x7E54;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x89E3;&#x8AAC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E; HMGA2 &#x304C;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3001;un-differentiated &#x7D30;&#x80DE;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;.

&#x9AD8;&#x79FB;&#x52D5;&#x5EA6;&#x7FA4;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; HMGA2: &#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x69CB;&#x9020;&#x3068;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x304B;&#x3002;

&#xC791;&#xC740;, chromatin &#xAD00;&#xB828; HMGA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD3EC;&#xD568; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xBCC4;&#xB3C4; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;, &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9E7;&#xC740; AT &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; &#xAC08;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xC704;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC545;&#xC131; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBAA8;&#xB450; &#xD65C;&#xC131; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC9C4;&#xC555;&#xC73C;&#xB85C; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; DNA &#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xC120;&#xD0DD;&#xD55C; &#xBAA8;&#xD130; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD654; &#xB41C; nucleoprotein &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, hmga2&#xC740; &#xC885;&#xC591; &#xD615;&#xC131; &#xB3D9;&#xC548; &#xC798; &#xC124;&#xB9BD; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; transcriptional &#xD2B9;&#xC815; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4; &#xC791;&#xC740; HMGA &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD328;&#xD0A4;&#xC9C0;&#xB85C; chromatin DNA&#xB97C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xD558; &#xACE0; &#xD070; &#xADDC;&#xBAA8;&#xC5D0;&#xC11C; chromatin &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801; &#xC99D;&#xAC70;&#xAC00; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4; HMGA2 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; chromatin &#xC12C;&#xC720;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; h 1&#xC758;&#xC640; &#xACBD;&#xC7C1; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; chromatin &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xACE0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC804;&#xC0AC; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. HMGA2 &#xD6A8;&#xC18C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xAD00;&#xC5EC;&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD560; &#xC218; &#xAC83; &#xAC19;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC5EC;&#xB7EC; HMGA2 &#xBD84;&#xC790; &#xAD6C;&#xC870; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xB2E8;&#xC77C; nucleosome &#xCF54;&#xC5B4; &#xC785;&#xC790;&#xC5D0; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. Hmga2&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; chromatin &#xC870;&#xC9C1; &#xC0DD;&#xD65C; &#xC140; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xB3CC; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB17C;&#xD3C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; HMGA2, 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; ES &#xC138;&#xD3EC; chromatin&#xC758; &#xC18C;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; un-differentiated &#xC140; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB192;&#xC740; &#xAE30;&#xB3D9;&#xC131; &#xADF8;&#xB8F9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; HMGA2: chromatin &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; pluripotency co-regulator?

Las prote&iacute;nas HMGA peque&ntilde;as, cromatina asociada contienen tres ADN vinculante dominios separados, llamados en los ganchos, que se unen preferentemente a secuencias cortas de AT-ricos. Estas prote&iacute;nas son abundantes en c&eacute;lulas madre embrionarias (ES) pluripotentes y m&aacute;s malignos tumores humanos, pero no son detectables en las c&eacute;lulas som&aacute;ticas normales. Act&uacute;an como activador y represor de la expresi&oacute;n g&eacute;nica y probablemente facilitar cambios arquitect&oacute;nicos de ADN durante la formaci&oacute;n de estructuras especializadas de la nucleoprote&iacute;na en regiones promotoras seleccionadas. Por ejemplo, HMGA2 participa en la activaci&oacute;n transcripcional de ciertos genes de proliferaci&oacute;n celular, que probablemente contribuye a su potencial oncog&eacute;nico establecida durante la formaci&oacute;n del tumor. Sin embargo, es sorprendente que poco se sabe sobre c&oacute;mo las prote&iacute;nas HMGA enlazar ADN en cromatina y c&oacute;mo esto afecta a la estructura de la cromatina a una escala mayor. La evidencia experimental sugiere que HMGA2 compite con el atascamiento de la histona H1 en la fibra de cromatina. Substancialmente podr&iacute;a alterar las estructuras de dominio de la cromatina en c&eacute;lulas madre embrionarias y contribuir a la activaci&oacute;n de ciertas redes de transcripci&oacute;n. HMGA2 tambi&eacute;n parecen capaces de reclutar directamente involucradas en las modificaciones de las histonas para activar la expresi&oacute;n g&eacute;nica de las enzimas. Adem&aacute;s, se comprob&oacute; que m&uacute;ltiples mol&eacute;culas HMGA2 enlazar estable a una part&iacute;cula de n&uacute;cleo &uacute;nico nucleosoma cuya estructura es conocida. Se desconoce c&oacute;mo estas caracter&iacute;sticas de HMGA2 inciden en la organizaci&oacute;n de la cromatina dentro de una c&eacute;lula viva. En este comentario, proponemos que HMGA2, a trav&eacute;s de la acci&oacute;n de tres independientes dominios de uni&oacute;n a ADN, substancialmente contribuye a la plasticidad de la cromatina de la c&eacute;lula ES y participa en el mantenimiento de un estado de c&eacute;lulas expresan.

&iquest;La prote&iacute;na del grupo de alta movilidad HMGA2: un co-regulator de la estructura de la cromatina y la pluripotencia de c&eacute;lulas madre?

&#x4F34;&#x4FA3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x8D1F;&#x8D23;&#x845B;&#x7834;&#x88C2;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x3001; &#x53E4;&#x83CC;&#x548C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x662F;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x886C;&#x91CC;&#x4E0A;&#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5185;&#x90E8;&#x7684;&#x5706;&#x7B52;&#x5F62;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5FC3;&#x5C16;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4E24;&#x4FA7;&#x4EE5;&#x63A7;&#x5236;&#x57FA;&#x677F;&#x6761;&#x76EE;&#x7684; ATPase &#x73AF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x63A2;&#x6D4B;&#x4F34;&#x4FA3;-&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x886C;&#x5E95;&#x5C55;&#x5F00;&#xFF0C;&#x79FB;&#x4F4D;&#x5230;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x548C;&#x9000;&#x5316;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x5468;&#x671F;&#x5B9E;&#x65F6;&#x57FA;&#x4E8E;&#x97F3;&#x54C1;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x663E;&#x793A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x66FF;&#x4EE3;&#x6027;&#x7EC6;&#x83CC; ClpAP &#x548C; ClpXP &#x914D;&#x5408;&#x5171;&#x4EAB;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF1A; &#x521D;&#x59CB;&#x6807;&#x8BB0;&#x8BC6;&#x522B;&#xFF0C;&#x5FEB;&#x901F;&#x5C55;&#x5F00;&#x7684;&#x57FA;&#x677F;&#x53D1;&#x751F;&#x540E;&#x4E00;&#x81F4;&#x4E0E;&#x4F34;&#x4FA3;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EBF;&#x7A0B;&#x5904;&#x7406;&#x3002;&#x8D70;&#x8FDB;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5546;&#x4F1A;&#x968F;&#x540E;&#x7F13;&#x6162;&#x57FA;&#x677F;&#x6613;&#x4F4D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E2D;&#x95F4;&#x5927;&#x6982;&#x63A5;&#x8FD1;&#x4F34;&#x4FA3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x754C;&#x9762;&#x77AC;&#x6001;&#x7D27;&#x51D1;&#x886C;&#x5E95;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x4E3A; ClpX &#x548C; ClpA &#x652F;&#x6301;&#x673A;&#x68B0;&#x5C55;&#x5F00;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4F34;&#x4FA3;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;&#x97F3;&#x54C1;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x9002;&#x7528;&#x6027;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x53E6;&#x5916;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6CDB;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x53E4;&#x5EFA;&#x7B51;&#x7FA4;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x66F4;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x771F;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x3002;

&#x5B66;&#x4E60;&#x4F34;&#x4FA3;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x97F3;&#x54C1;&#x7684;&#x5B9E;&#x65F6;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

Chaperone-proteases are responsible for the processive breakdown of proteins in eukaryotic, archaeal and bacterial cells. They are composed of a cylinder-shaped protease lined on the interior with proteolytic sites and of ATPase rings that bind to the apical sides of the protease to control substrate entry. We present a real-time FRET-based method for probing the reaction cycle of chaperone-proteases, which consists of substrate unfolding, translocation into the protease and degradation. Using this system we show that the two alternative bacterial ClpAP and ClpXP complexes share the same mechanism: after initial tag recognition, fast unfolding of substrate occurs coinciding with threading through the chaperone. Subsequent slow substrate translocation into the protease chamber leads to formation of a transient compact substrate intermediate presumably close to the chaperone-protease interface. Our data for ClpX and ClpA support the mechanical unfolding mode of action proposed for these chaperones. The general applicability of the designed FRET system is demonstrated here using in addition an archaeal PAN-proteasome complex as model for the more complex eukaryotic proteasome.

Studying chaperone-proteases using a real-time approach based on FRET.

Chaperon-prot&eacute;ases sont responsables de la d&eacute;gradation processive des prot&eacute;ines dans les cellules eucaryotes, arch&eacute;es et bact&eacute;ries. Ils sont compos&eacute;s d&#39;une prot&eacute;ase cylindrique rev&ecirc;tu &agrave; l&#39;int&eacute;rieur avec des sites prot&eacute;olytiques et des anneaux d&#39;ATPase qui se lient aux c&ocirc;t&eacute;s apicales de la prot&eacute;ase pour contr&ocirc;ler l&#39;entr&eacute;e du substrat. Nous pr&eacute;sentons une m&eacute;thode ax&eacute;e sur la frette en temps r&eacute;el pour sonder le cycle de la r&eacute;action du Chaperon-prot&eacute;ases, qui se compose d&#39;un substrat qui se d&eacute;roulent, translocation dans la prot&eacute;ase et la d&eacute;gradation. Gr&acirc;ce &agrave; ce syst&egrave;me, nous montrons que les deux alternatives bact&eacute;riennes ClpAP ClpXP complexes et partagent le m&ecirc;me m&eacute;canisme : apr&egrave;s la comptabilisation initiale de balise, un d&eacute;roulement rapide du substrat se produit co&iuml;ncidant avec filetage par le biais de l&#39;escorte. Translocation de substrat lente ult&eacute;rieures dans la chambre de prot&eacute;ase conduit &agrave; la formation d&#39;un substrat compact transitoire interm&eacute;diaire sans doute proche de l&#39;interface de chaperon-prot&eacute;ase. Nos donn&eacute;es pour ClpX et LRCECA en charge le mode m&eacute;canique qui se d&eacute;roule d&#39;action propos&eacute; pour ces accompagnateurs. L&#39;applicabilit&eacute; g&eacute;n&eacute;rale du syst&egrave;me con&ccedil;u frette est d&eacute;montr&eacute;e ici avec en outre un complexe archaeal PAN-prot&eacute;asome comme mod&egrave;le pour le prot&eacute;asome eucaryote plus complex.

&Eacute;tudier le chaperon-prot&eacute;ases en utilisant une approche en temps r&eacute;el bas&eacute;e sur la frette.

Chaperon-Proteasen sind f&uuml;r den prozessualen Abbau von Proteinen in eukaryotischen, Archaea und bakteriellen Zellen verantwortlich. Sie bestehen aus einer zylinderf&ouml;rmigen Protease ausgekleidet auf der Innenseite mit proteolytische Aufstellungsorte und der ATPase-Ringe, die die apikalen Seiten der Protease binden, Substrat-Eintrag zu steuern. Wir pr&auml;sentieren Ihnen eine Echtzeit-FRET-basierte Methode zur Sondierung des Reaktion-Zyklus der Chaperon-Proteasen, bestehend aus Substrat entfaltet, Translokation in die Protease und Abbau. Mit diesem System zeigen wir, dass die zwei alternative bakterielle ClpAP und ClpXP komplexe den gleichen Mechanismus Teilen: nach anf&auml;nglichen Tag Anerkennung, schnelle Entfaltung Substrat auftritt Koinzidenz mit threading durch das Chaperone. Nachfolgende langsame Substrat Translokation in die Protease-Kammer f&uuml;hrt zur Bildung von Transienten kompakte Substrat Mittelstufe vermutlich in der N&auml;he der Chaperon-Protease-Schnittstelle. Unsere Daten f&uuml;r ClpX und ClpA unterst&uuml;tzen die mechanische entfaltende Wirkungsweise f&uuml;r diese Chaperone vorgeschlagen. Die allgemeine Anwendbarkeit des entworfenen FRET-Systems wird hier demonstriert mit zus&auml;tzlich einen reitenden PAN-Proteasom-Komplex als Modell f&uuml;r die komplexere eukaryotischen Proteasom.

Chaperon-Proteasen mit einem Echtzeit-Ansatz auf der Grundlage von Bund zu studieren.

Chaperone-proteasi sono responsabili per la ripartizione delle proteine in cellule eucariotiche, archaeal e batterica processive. Sono composti di una proteasi a forma di cilindro foderato all&#39;interno con siti proteolitici e degli anelli di ATPasi che si legano ai lati apicali della proteasi per controllare l&#39;ingresso del substrato. Vi presentiamo un metodo basato su FRET in tempo reale per sondare il ciclo di reazione di chaperone-proteasi, che consiste di substrato dispiegarsi, traslocazione nella proteasi e degrado. Utilizzando questo sistema ci mostra che le due alternativi batterici ClpAP ClpXP complessi e condividono lo stesso meccanismo: dopo il riconoscimento iniziale di tag, rapido spiegamento di substrato si verifica coincidenza con threading attraverso il chaperone. Traslocazione successive substrato lento nella camera di proteasi porta alla formazione di un substrato compatto transitorio intermedio presumibilmente vicino l&#39;interfaccia chaperone-proteasi. I nostri dati per ClpX e ClpA supportano la modalit&agrave; di svolgimento meccanica d&#39;azione proposto per questi accompagnatori. L&#39;applicabilit&agrave; generale del sistema progettato FRET &egrave; dimostrato qui utilizzando inoltre un complesso di archaeal PAN-proteasoma come modello per il proteasoma eucarioti pi&ugrave; complesso.

Studiando chaperone-proteasi utilizzando un approccio in tempo reale basato sul tasto.

&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30C3;&#x30B7;&#x30D6;&#x6545;&#x969C;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3001;&#x53E4;&#x7D30;&#x83CC;&#x3068;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x89E3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306B;&#x4E26;&#x3076;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;&#x5F62;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9802;&#x7AEF;&#x306E;&#x4E21;&#x5074;&#x306B;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; ATPase &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x52A3;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x5C55;&#x958B;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB; &#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; &#x30D5;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8; &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x79C1;&#x9054;&#x306F; 2 &#x3064;&#x4EE3;&#x66FF;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E; ClpAP &#x3068; ClpXP &#x306E;&#x932F;&#x4F53;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x4ED5;&#x7D44;&#x307F;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;: &#x521D;&#x671F;&#x30BF;&#x30B0;&#x8A8D;&#x8B58;&#x5F8C;&#x3092;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x9AD8;&#x901F;&#x5C55;&#x958B;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; &#x30B9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;&#x51E6;&#x7406;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x57FA;&#x677F;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x5BA4;&#x3078;&#x904E;&#x6E21;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x30C8;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x8FD1;&#x3044;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x4E2D;&#x9593;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; ClpX &#x3068; ClpA &#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x30A2;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30E2;&#x30FC;&#x30C9; &#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x63D0;&#x6848;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x30D5;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C8; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x9069;&#x7528;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x307E;&#x305F;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30A2; &#x30D1;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3088;&#x308A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30B7;&#x30E3;&#x30DA;&#x30ED;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; FRET &#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002; &#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;

&#xBCF4;&#xD638;&#xC790;-&#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xC81C;&#xB294; &#xC9C4; &#xD575;, archaeal &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; processive &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640; &#xC778;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xC904;&#xC9C0;&#xC5B4; &#xC2E4;&#xB9B0;&#xB354; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xACE0; &#xAE30;&#xD310; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xBA74;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; ATPase &#xBC18;&#xC9C0;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC120;&#xBB3C;&#xC774; &#xD3BC;&#xCCD0;&#xC9C0;&#xACE0;, protease&#xC640; &#xC800;&#xD558;&#xB85C; &#xC804; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xB294; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; &#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544;&#xC758; &#xBC18;&#xC751; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074; &#xD504;&#xB85C; &#xBE59;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xAE30;&#xBC18; &#xBC29;&#xBC95;. &#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB300;&#xCCB4; &#xC138;&#xADE0; ClpAP &#xBC0F; ClpXP &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xACF5;&#xC720; &#xD45C;&#xC2DC;: &#xCD08;&#xAE30; &#xD0DC;&#xADF8; &#xC778;&#xC2DD; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2A4;&#xB808;&#xB529; &#xB9DE;&#xC740; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xBE60;&#xB978; &#xC804;&#xAC1C;. Protease &#xCC54;&#xBC84;&#xB85C; &#xD6C4;&#xC18D; &#xB290;&#xB9B0; &#xAE30;&#xD310; &#xC804; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790; protease &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xC911;&#xAC04; &#xACFC;&#xB3C4; &#xC18C;&#xD615; &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C;. ClpX &#xBC0F; ClpA &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCF4;&#xD638;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xC548; &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC804;&#xAC1C; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC124;&#xACC4; &#xB41C; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC801;&#xC6A9; &#xC5EC;&#xAE30;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB610;&#xD55C; archaeal &#xD32C; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC9C4; &#xD575; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xC5F0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCF4;&#xD638;&#xC790;-&#xD504;&#xB85C; &#xD14C;&#xC544; &#xBB34;&#xC11C; &#xC6CC; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xBD80; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Acompa&ntilde;ante-proteasas son responsables de la descomposici&oacute;n procesual de prote&iacute;nas en las c&eacute;lulas eucariotas, de archaeal y bacteriana. Se componen de una proteasa en forma de cilindro forrado en el interior con sitios proteol&iacute;ticos y anillos de ATPasa que unen a los lados apicales de la proteasa para controlar la entrada de sustrato. Presentamos un m&eacute;todo en tiempo real basado en traste para sondear el ciclo de reacci&oacute;n de acompa&ntilde;ante-proteasas, que consiste en desplegar, desplazamiento en la proteasa y la degradaci&oacute;n del sustrato. Mediante este sistema se muestra que los dos alternativos bacterianos ClpAP ClpXP complejos y comparten el mismo mecanismo: despu&eacute;s del reconocimiento inicial de la etiqueta, despliegue r&aacute;pido del sustrato se produce coincidiendo con rosca a trav&eacute;s de the chaperone. Desplazamiento posterior sustrato lento en la c&aacute;mara de la proteasa conduce a la formaci&oacute;n de un substrato compacto transitoria intermedio probablemente cerca de la interfaz de acompa&ntilde;ante-proteasa. Nuestros datos para ClpX y ClpA apoyan el modo de despliegue mec&aacute;nico de acci&oacute;n propuesto para estos acompa&ntilde;antes. La aplicabilidad general del sistema dise&ntilde;ado de traste se demuestra aqu&iacute; utilizando adem&aacute;s un complejo de archaeal PAN-proteasoma como modelo para el proteasoma eucariota m&aacute;s complejo.

Estudiar acompa&ntilde;ante-proteasas usando un acercamiento en tiempo real basado en el traste.

&#x7ED3;&#x6838;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x653E;&#x7EBF;&#x83CC;&#xFF0C;&#x7A9D;&#x85CF; proteasomes &#x4EE5;&#x53CA;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x964D;&#x89E3;&#x7269;&#x4E00;&#x822C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6C47;&#x8F91; &#x300B;&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x4E2D;&#x6CDB;&#xFF0C;&#x886C;&#x5E95;&#x90FD;&#x88AB;&#x6807;&#x8BB0;&#x4E3A;&#x539F;&#x6838;&#x6CDB;&#x7D20;&#x6837;&#x86CB;&#x767D; (Pup) &#x516C;&#x8BA4;&#x7684; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x76D8;&#x7ED5;&#x7EBF;&#x5708;&#x57DF; &#xFF08;&#x4E5F;&#x79F0;&#x4E3A;&#x5F27;&#xFF09; &#x7684; ATPase Mpa &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x5EFA;&#x6574;&#x4E2A;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684; pupylated &#x57FA;&#x677F;&#x548C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x5176;&#x673A;&#x68B0;&#x529F;&#x80FD;&#x5728;&#x57FA;&#x677F;&#x62DB;&#x8058;&#x3001; &#x5C55;&#x5F00;&#x548C;&#x9000;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; Mpa-&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x5C55;&#x5F00;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F1A;&#x964D;&#x4F4E; Pup &#x6807;&#x8BB0;&#x86CB;&#x767D;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x9879;&#x6D3B;&#x52A8;&#x9700;&#x8981; ATPase &#x4E0E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7684;&#x7269;&#x7406;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x7ACB; Pup &#x7684; N-&#x672B;&#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#x4F5C;&#x4E3A; pupylated &#x57FA;&#x677F;&#x5230; Mpa &#x5B54;&#x9699;&#x7684;&#x53C2;&#x4E0E;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5143;&#x7D20;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7CBE;&#x795E;&#x521B;&#x4F24;&#x548C;&#x75DB;&#x82E6;&#x62C9;&#x4E0A; Pup &#x542F;&#x52A8;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x6298;&#x53E0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06;&#x5B83;&#x4EEC;&#x62D6;&#x5411;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x5206;&#x5EAD;&#x3002;&#x4E0E;&#x771F;&#x6838;&#x6CDB;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C; Pup &#x4E0D;&#x662F;&#x5FAA;&#x73AF;&#x518D;&#x7528;&#x800C;&#x9000;&#x5316;&#x4E0E;&#x57FA;&#x677F;&#x3002;&#x8FD9;&#x8D4B;&#x4E88;&#x53CC;&#x91CD;&#x529F;&#x80FD; Pup &#x4F5C;&#x4E3A; Mpa &#x8BC6;&#x522B;&#x5143;&#x7D20;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7EBF;&#x7A0B;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;

Mpa-&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x5206;&#x679D;&#x5C55;&#x5F00;&#xFF0C;&#x5E76;&#x964D;&#x4F4E; pupylated &#x57FA;&#x677F;&#x8FDB;&#x884C; Pup &#x7684; N &#x603B;&#x7AD9;&#x3002;

Mycobacterium tuberculosis, along with other actinobacteria, harbours proteasomes in addition to members of the general bacterial repertoire of degradation complexes. In analogy to ubiquitination in eukaryotes, substrates are tagged for proteasomal degradation with prokaryotic ubiquitin-like protein (Pup) that is recognized by the N-terminal coiled-coil domain of the ATPase Mpa (also called ARC). Here, we reconstitute the entire mycobacterial proteasome degradation system for pupylated substrates and establish its mechanistic features with respect to substrate recruitment, unfolding and degradation. We show that the Mpa-proteasome complex unfolds and degrades Pup-tagged proteins and that this activity requires physical interaction of the ATPase with the proteasome. Furthermore, we establish the N-terminal region of Pup as the structural element required for engagement of pupylated substrates into the Mpa pore. In this process, Mpa pulls on Pup to initiate unfolding of substrate proteins and to drag them toward the proteasome chamber. Unlike the eukaryotic ubiquitin, Pup is not recycled but degraded with the substrate. This assigns a dual function to Pup as both the Mpa recognition element as well as the threading determinant.

The mycobacterial Mpa-proteasome unfolds and degrades pupylated substrates by engaging Pup's N-terminus.

Mycobacterium tuberculosis, ainsi que d&#39;autre actinobacteria, abrite des prot&eacute;asomes, outre les membres du r&eacute;pertoire des complexes de la d&eacute;gradation bact&eacute;rien g&eacute;n&eacute;ral. Par analogie avec l&#39;ubiquitination chez les eucaryotes, les substrats sont marqu&eacute;es pour la d&eacute;gradation de proteasome avec procaryote ubiquitin-like protein (Pup) qui est reconnu par le domaine N-terminal de coiled-coil de l&#39;ATPase Mpa (&eacute;galement appel&eacute; ARC). Ici, nous reconstituer le syst&egrave;me prot&eacute;asome mycobact&eacute;rienne enti&egrave;re de d&eacute;gradation pour substrats pupylated et &eacute;tablir ses caract&eacute;ristiques m&eacute;caniques en ce qui concerne le recrutement de substrat, le d&eacute;roulement et la d&eacute;gradation. Nous montrons que le complexe prot&eacute;asome-Mpa se d&eacute;ploie et d&eacute;grade les prot&eacute;ines marqu&eacute;es Pup et que cette activit&eacute; n&eacute;cessite une interaction physique de l&#39;ATPase avec le prot&eacute;asome. En outre, nous &eacute;tablissons la r&eacute;gion N-terminale de Pup comme l&#39;&eacute;l&eacute;ment structurel requise pour l&#39;engagement des substrats pupylated dans le pore de la Mpa. Dans ce processus, Mpa tire sur le chiot pour lancer le d&eacute;roulement des substrats prot&eacute;iques et faites-les glisser vers la chambre du prot&eacute;asome. Contrairement &agrave; l&#39;ubiquitine eucaryote, chiot n&#39;est pas recycl&eacute; mais d&eacute;grad&eacute; avec le substrat. Cela affecte une double fonction &agrave; chiot comme tant l&#39;&eacute;l&eacute;ment de reconnaissance Mpa que le d&eacute;terminant de thread.

Mpa-prot&eacute;asome mycobact&eacute;riens se d&eacute;ploie et d&eacute;grade les substrats pupylated en engageant amin&eacute;e du Pup.

Mycobacterium Tuberculosis, zusammen mit anderen Actinobacteria H&auml;fen Proteasomes neben Mitgliedern der allgemeine bakterielle Repertoire der Abbau-komplexe. In Analogie zum Ubiquitination in Eukaryoten sind Substrate f&uuml;r Proteasomal Verschlechterung mit prokaryotischen Ubiquitin-wie Protein (Pup) gekennzeichnet, die von der N-terminalen gewickelt-umwickeltes der ATPase-MPa (auch ARC genannt) erkannt wird. Hier wir das gesamte mykobakterieller Proteasom-Abbau-System f&uuml;r Pupylated Untergr&uuml;nde wiederherzustellen und seine mechanistische Features in Bezug auf Substrat-Rekrutierung, Entfaltung und Erniedrigung. Wir zeigen, dass der Mpa-Proteasom-Komplex entfaltet und beeintr&auml;chtigt die Pup-etikettierten Proteine und diese T&auml;tigkeit k&ouml;rperliche Interaktion von der ATPase mit dem Proteasom erfordert. Dar&uuml;ber hinaus schaffen wir die N-terminalen Region PUP als strukturelle Element ben&ouml;tigt, f&uuml;r das Engagement der Pupylated Substrate in der Mpa-Pore. In diesem Prozess zieht Mpa am Pup, Entfaltung der Substrat-Proteine zu initiieren und ziehen diese in Richtung der Proteasom-Kammer. Im Gegensatz zu den eukaryotischen Ubiquitin Pup nicht recycelt sondern mit dem Substrat degradiert. Dies weist eine Doppelfunktion als das Mpa-Anerkennung-Element sowie die threading Determinante Pup.

Die mykobakterieller Mpa-Proteasom entfaltet und beeintr&auml;chtigt die Pupylated Substraten durch die Gewinnung von PUPs N-Terminus.

Mycobacterium tuberculosis, insieme ad altri actinobacteria, porti i proteasomi oltre ai membri del repertorio dei complessi di degradazione batterico generale. In analogia a ubiquitination negli eucarioti, substrati sono contrassegnati per degradazione proteosomale con proteina di ubiquitin-like procariota (Pup) che &egrave; riconosciuta dal dominio N-terminale coiled-coil del Mpa ATPasi (chiamato anche arco). Qui, noi di ricostituire il sistema di degradazione del proteasoma micobatterica intero per substrati pupylated e stabilire le sue caratteristiche meccanicistiche rispetto al reclutamento di substrato, svolgimento e degrado. Dimostriamo che il complesso del proteasoma Mpa si dispiega e degrada le proteine etichettate Pup e che questa attivit&agrave; richiede interazione fisica dell&#39;ATPasi con il proteasoma. Inoltre, stabiliamo la regione N-terminale del Pup come elemento strutturale necessaria per l&#39;impegno di substrati pupylated in poro Mpa. In questo processo, Mpa tira su Pup per avviare unfolding delle proteine substrato e li trascina verso la camera del proteasoma. A differenza di ubiquitin di eucarioti, Pup non &egrave; riciclata ma degradato con il substrato. Questo assegna una duplice funzione Pup come l&#39;elemento di riconoscimento Mpa cos&igrave; come il determinante di threading.

Mpa-proteasoma micobatterica si dispiega e degrada pupylated substrati impegnandosi N-terminus di Pup.

&#x7D50;&#x6838;&#x83CC;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E; actinobacteria &#x3068;&#x5171;&#x306B;&#x52A3;&#x5316;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7D30;&#x83CC;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x6E2F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x30A2;&#x30CA;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x52A3;&#x5316; ATPase (&#x30A2;&#x30FC;&#x30AF;&#x3068;&#x3082;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;) Mpa &#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x30B3;&#x30A4;&#x30EB;&#x30C9; &#x30B3;&#x30A4;&#x30EB; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x539F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (Pup) &#x3067;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x6297;&#x9178;&#x83CC;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x52A3;&#x5316;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x7528; pupylated &#x57FA;&#x677F;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x57FA;&#x677F;&#x63A1;&#x7528;&#x3001;&#x5C55;&#x958B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x52A3;&#x5316;&#x306B;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Mpa &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; &#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x304C;&#x7E70;&#x308A;&#x5E83;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x5B50;&#x72AC;&#x304C;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; ATPase &#x306E;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;pupylated &#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x5A5A;&#x7D04; Mpa &#x9593;&#x9699;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B50;&#x72AC;&#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Mpa &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x30C9;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x57FA;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B50;&#x72AC;&#x3092;&#x30D7;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;&#x5B50;&#x72AC;&#x3092;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30EA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x52A3;&#x5316;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5B50;&#x72AC;&#x306B; Mpa &#x8A8D;&#x8B58;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B9;&#x30EC;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x884C;&#x5217;&#x5F0F;&#x3092;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6297;&#x9178;&#x83CC;&#x306E; Mpa &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5C55;&#x958B;&#x3057;&#x3001;&#x306E; pupylated &#x57FA;&#x677F;&#x5B50;&#x72AC;&#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x5F93;&#x4E8B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xACB0;&#xD575;&#xADE0;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; actinobacteria &#xD568;&#xAED8; proteasomes &#xC800;&#xD558; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18; &#xC138;&#xADE0; &#xB808; &#xD37C; &#xD1A0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBA64;&#xBC84; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xD56D;&#xB9CC;. &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; ubiquitination&#xC5D0; &#xBE44;&#xC720;, &#xAE30;&#xD310; prokaryotic &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xAC15;&#xC544;&#xC9C0;) (&#xD638; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4; &#xD568;) ATPase Mpa&#xC758; N &#xB2E8;&#xC790;&#xC5D0; &#xCF54;&#xC77C; &#xCF54;&#xC77C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xB294; proteasomal &#xC800;&#xD558;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0DC;&#xADF8;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; pupylated &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; mycobacterial &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC800;&#xD558; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; reconstitute &#xAE30;&#xD310; &#xCC44;&#xC6A9;, &#xC804;&#xAC1C; &#xBC0F; &#xC800;&#xD558; &#xAE30;&#xACC4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Mpa &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD3BC;&#xCCD0;&#xC9C4;&#xB2E4; &#xACE0; &#xAC15;&#xC544;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC800;&#xD558; &#xACE0;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9; &#xD544;&#xC694;&#xB294; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC740; Atpase&#xC758; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; Mpa &#xAE30; &#xACF5;&#xC5D0; pupylated &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xCC38;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xC694;&#xC18C;&#xB85C; &#xAC15;&#xC544;&#xC9C0;&#xC758; N &#xB2E8;&#xC790; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; Mpa&#xC5D0; &#xAC15;&#xC544;&#xC9C0; &#xAE30;&#xC9C8; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC804;&#xAC1C;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558; &#xACE0; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xCC54;&#xBC84; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB04C;&#xC5B4; &#xB2F9;&#xAE34; &#xB2E4;. &#xC9C4; &#xD575; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xAC15;&#xC544;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC7AC;&#xD65C;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xD310;&#xC73C;&#xB85C; &#xC800;&#xD558;. &#xC774;&#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; Mpa &#xC778;&#xC2DD; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xC2A4;&#xB808;&#xB529; &#xD589;&#xB82C;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC15;&#xC544;&#xC9C0;&#xB97C; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD560;&#xB2F9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mycobacterial Mpa &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xD3BC;&#xCCD0;&#xC9C4;&#xB2E4; &#xACE0; pupylated &#xAE30;&#xD310; &#xAC15;&#xC544;&#xC9C0;&#xC758; N-&#xB9D0;&#xB2E8; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC131;&#xB2A5;&#xC774; &#xC800;&#xD558; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Mycobacterium tuberculosis, junto con otro actinobacteria, puertos proteasomas adem&aacute;s miembros del repertorio de complejos de degradaci&oacute;n bacteriano general. En analog&iacute;a a la ubiquitinaci&oacute;n en eucariotas, sustratos est&aacute;n etiquetados para degradaci&oacute;n proteasomal con procariota prote&iacute;na ubiquitina-como (Pup) que es reconocida por el dominio N-terminal de coiled-coil de la ATPasa de Mpa (tambi&eacute;n llamado ARC). Aqu&iacute;, nos reconstituir el sistema de degradaci&oacute;n proteasome micobacterias toda pupylated sustratos y establecer sus caracter&iacute;sticas mec&aacute;nicas con respecto a la contrataci&oacute;n de sustrato, el despliegue y la degradaci&oacute;n. Mostramos que el complejo Mpa-proteasoma se desarrolla y degrada prote&iacute;nas Pup-etiquetado y que esta actividad requiere la interacci&oacute;n f&iacute;sica de la ATPasa con el proteasoma. Adem&aacute;s, establecemos la regi&oacute;n N-terminal de cachorro como el elemento estructural necesario para la participaci&oacute;n de pupylated sustratos en el poro de la Mpa. En este proceso, Mpa tira de cachorro para iniciar el desdoblamiento de las prote&iacute;nas sustrato y arrastrarlos hacia la c&aacute;mara del proteasoma. A diferencia de la ubiquitina eucariota, Pup no es reciclado pero degradado con el sustrato. Asigna una funci&oacute;n dual al cachorro como tanto el elemento de reconocimiento del Mpa como el determinante de la roscado.

Article	Year
Characterization of a new AAA+ protein from archaea. Journal of structural biology\| PubMed ID: 16584891	2006
Residual structure in islet amyloid polypeptide mediates its interactions with soluble insulin. Biochemistry\| PubMed ID: 19146426	2009
HMGA2 exhibits dRP/AP site cleavage activity and protects cancer cells from DNA-damage-induced cytotoxicity during chemotherapy. Nucleic acids research\| PubMed ID: 19465398	2009
The high mobility group protein HMGA2: a co-regulator of chromatin structure and pluripotency in stem cells? Stem cell reviews\| PubMed ID: 19551524	2009
Studying chaperone-proteases using a real-time approach based on FRET. Journal of structural biology\| PubMed ID: 19591940	2009
The mycobacterial Mpa-proteasome unfolds and degrades pupylated substrates by engaging Pup's N-terminus. The EMBO journal\| PubMed ID: 20203624	2010

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