in-vivo-imaging-of-deep-cortical-layers-using-a-microprism

<em>In vivo</em> Imaging of Deep Cortical Layers using a Microprism

We present a protocol for in vivo imaging of cortical tissue using a deep-brain imaging probe in the shape of a microprism.  Microprisms are 1-mm in size ...

Yale University

&#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x6210;&#x50CF; (FLIM) &#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63ED;&#x793A;&#x5C40;&#x90E8;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;NADH&#xFF0C;&#x56FA;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x5B50;&#x548C;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x8F85;&#x9176;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x90FD;&#x5F3A;&#x70C8;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x9176;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x539F;&#x6599;&#x8367;&#x5149;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x548C;&#x632F;&#x5E45;&#x6570;&#x636E;&#xFF0C;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x5728;&#x5927;&#x9F20;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x5207;&#x7247;&#x663E;&#x793A;&#x7A7A;&#x95F4;&#x72EC;&#x7279;&#x7684; NADH &#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x81EA;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x5904;&#x7406;&#x7B97;&#x6CD5;&#x3002;NADH &#x80F6;&#x7247;&#x56FE;&#x50CF;&#x63A7;&#x5236;&#x3001; &#x766B;&#x75EB;&#x5927;&#x9F20;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6536;&#x96C6;&#x4E86;&#x3002;&#x7A7A;&#x95F4;&#x683C;&#x5C40;&#x7684; NADH &#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5047;&#x8BBE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x652F;&#x6301;&#xFF0C;NADH &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5E76;&#x56E0;&#x6B64;&#x4EE3;&#x8C22;&#x80FD;&#x529B;&#x3001; &#x7EC4;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x533A;&#x522B;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x4F9B;&#x8D44;&#x6599;&#xFF0C;&#x8BF4;&#x660E;&#x5728;&#x75C5;&#x7406;&#x7269;&#x8D28;&#x4EE3;&#x8C22;&#x56FD;&#x5BB6;&#x3002;

&#x5728;&#x4EBA;&#x6743;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x5927;&#x9F20;&#x8111;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x6210;&#x50CF;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x7A7A;&#x95F4;&#x72EC;&#x7279;&#x7684; NADH &#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;

Two-photon fluorescence lifetime imaging (FLIM) of molecules can reveal important information on the local microenvironment. NADH, an intrinsic fluorescent molecule and ubiquitous metabolic co-enzyme, has a lifetime that depends strongly on enzymatic binding. We present a custom image-processing algorithm for raw fluorescence lifetime and amplitude data that produces an image showing spatially distinct NADH fluorescence lifetimes in slices of rat and human brain. NADH FLIM images were collected in control and epileptic rat tissue. Differences in spatial patterns of NADH lifetimes support the hypothesis that NADH binding, and thus metabolic capacity, is significantly different between groups. This type of analysis can provide information on metabolic states in pathological material.

Multiphoton fluorescence lifetime imaging of intrinsic fluorescence in human and rat brain tissue reveals spatially distinct NADH binding.

Imagerie biphotonique de vie de fluorescence (FLIM) de mol&#xE9;cules peuvent r&#xE9;v&#xE9;ler des informations importantes sur le microenvironnement local. NADH, une mol&#xE9;cule fluorescente intrins&#xE8;que et omnipr&#xE9;sent m&#xE9;tabolique co-enzyme, a une dur&#xE9;e de vie qui d&#xE9;pend fortement de liaison enzymatique. Nous pr&#xE9;sentons une coutume de traitement d&#x26;#39;image algorithme de vie de fluorescence brute et les donn&#xE9;es d&#x26;#39;amplitude qui produit une image montrant spatialement distinctes NADH de vie de fluorescence dans des tranches de cerveau du rat et l&#x26;#39;homme. Images FLIM NADH ont &#xE9;t&#xE9; recueillies dans le contr&#xF4;le et les tissus du rat &#xE9;pileptique. Les diff&#xE9;rences dans la r&#xE9;partition spatiale de la dur&#xE9;e de vie NADH soutiennent l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que le NADH contraignant, et la capacit&#xE9; ainsi m&#xE9;tabolique, est significativement diff&#xE9;rente entre les groupes. Ce type d&#x26;#39;analyse peut fournir des informations sur les &#xE9;tats m&#xE9;taboliques en mat&#xE9;riel pathologique.

Imagerie multiphotonique de vie de fluorescence de la fluorescence intrins&#xE8;que des tissus c&#xE9;r&#xE9;braux humains et de rat r&#xE9;v&#xE8;le NADH spatialement distinctes reliure

Zwei-Photonen-Fluoreszenz-Lebensdauer-imaging (FLIM) Molek&uuml;le kann wichtige Informationen &uuml;ber die lokalen Mikromilieu enth&uuml;llen. NADH, eine systeminterne fluoreszierende Molek&uuml;l und allgegenw&auml;rtigen metabolische Coenzym, hat eine Lebensdauer, die enzymatische Bindung stark abh&auml;ngt. Wir pr&auml;sentieren einen benutzerdefinierten Bildverarbeitungs-Algorithmus f&uuml;r rohe Fluoreszenz-Lebensdauer und Amplitude-Daten, die erzeugt ein Bild r&auml;umlich unterschiedliche G&uuml;ltigkeitsdauer der NADH-Fluoreszenz in Scheiben Ratte und menschliche Gehirn zeigen. NADH FLIM Bilder wurden in der Kontrolle und epileptische Ratte Gewebe gesammelt. Unterschiede in der r&auml;umlichen Muster von NADH Lebenszeiten unterst&uuml;tzen der Hypothese, dass NADH-Bindung und somit metabolischen Kapazit&auml;t, unterscheidet sich erheblich zwischen den Gruppen. Diese Art der Analyse kann &uuml;ber metabolische Zust&auml;nde in pathologischen Material informieren.

Multiphoton Fluoreszenz-Lebensdauer-Bildgebung der intrinsische Fluoreszenz in Mensch und Ratte Hirngewebe zeigt r&auml;umlich unterschiedliche NADH-Bindung.

Durata due-fotone di fluorescenza (FLIM) di imaging di molecole pu&ograve; rivelare informazioni importanti sul microambiente locale. NADH, una molecola fluorescente intrinseca e onnipresente co-enzima metabolico, ha una durata che dipende fortemente dall&#39;associazione enzimatica. Vi presentiamo un algoritmo di elaborazione immagini personalizzato per durata e ampiezza dati di fluorescenza crudo che produce un&#39;immagine che mostra spazialmente distinte durate di fluorescenza di NADH in fette del cervello umano e del ratto. NADH FLIM immagini furono raccolte nel controllo e nel tessuto ratto epilettico. Differenze nei modelli spaziali di vite NADH supportano l&#39;ipotesi che l&#39;associazione NADH e capacit&agrave; cos&igrave; metabolica, &egrave; significativamente diverse tra i gruppi. Questo tipo di analisi pu&ograve; fornire informazioni sugli stati metabolici nel materiale patologico.

Imaging durata multifotonica fluorescenza della fluorescenza intrinseca nell&#39;uomo e tessuto cerebrale di ratto rivela spazialmente distinti associazione NADH.

&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4E8C;&#x5149;&#x5B50;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;FLIM&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5C40;&#x6240;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; NADH&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x88DC;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x5F37;&#x304F;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;NADH&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x753B;&#x50CF;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x3068;&#x632F;&#x5E45;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30AB;&#x30B9;&#x30BF;&#x30E0;&#x753B;&#x50CF;&#x51E6;&#x7406;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002; NADH FLIM&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306F;&#x3001;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068;&#x3066;&#x3093;&#x304B;&#x3093;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x53CE;&#x96C6;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; NADH&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x5BFF;&#x547D;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x9055;&#x3044;NADH&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x7FA4;&#x9593;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D2;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x8133;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x56FA;&#x6709;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;Binding&#x7A7A;&#x9593;&#x500B;&#x5225;NADH&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

&#xB450; &#xAD11;&#xC790; &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; (FLIM) &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xB85C;&#xCEEC; microenvironment&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC54C;&#xC544;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. NADH, &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84;&#xC790;&#xC640; &#xC720;&#xBE44; &#xCFFC;&#xD130; &#xC2A4; &#xB300;&#xC0AC; &#xACF5;&#xB3D9; &#xD6A8;&#xC18C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xC758;&#xC874; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xBA85;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC950;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB1CC;&#xC758; &#xC870;&#xAC01;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; NADH &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xC6D0;&#xC2DC; &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; &#xBC0F; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC790; &#xC9C0;&#xC815; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xCC98;&#xB9AC; &#xC54C;&#xACE0;&#xB9AC;&#xC998;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xAC04; &#xC9C8; &#xC950; &#xC870;&#xC9C1; NADH FLIM &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xC218;&#xC9D1; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. NADH &#xD3C9;&#xC0DD;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; NADH &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xACFC; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB300;&#xC0AC; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0;, &#xADF8;&#xB8F9; &#xAC04;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xBCD1; &#xC801;&#xC778; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xAD11; &#xBC0F; &#xC950; &#xB1CC; &#xC870;&#xC9C1; multiphoton &#xD615;&#xAD11; &#xC218;&#xBA85; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; &#xBCC4;&#xAC1C; NADH &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;.

De dos fotones de im&#xE1;genes de fluorescencia vida (Flim) de las mol&#xE9;culas pueden revelar informaci&#xF3;n importante sobre el microambiente local. NADH, una mol&#xE9;cula fluorescente intr&#xED;nseca y ubicua metab&#xF3;lico co-enzima, tiene una duraci&#xF3;n que depende fuertemente de uni&#xF3;n enzim&#xE1;tica. Se presenta una imagen personalizada de algoritmo de procesamiento para toda la vida cruda de fluorescencia y datos de amplitud que produce una imagen que muestra espacialmente distintos tiempos de vida de fluorescencia de NADH en rebanadas de la rata y el cerebro humano. Im&#xE1;genes NADH Fli se recogieron en el control de la rata y el tejido epil&#xE9;ptico. Las diferencias en los patrones espaciales de la vida NADH apoyan la hip&#xF3;tesis de que el NADH vinculante, y la capacidad metab&#xF3;lica por lo tanto, es significativamente diferente entre los grupos. Este tipo de an&#xE1;lisis puede proporcionar informaci&#xF3;n sobre los estados metab&#xF3;licos en material patol&#xF3;gico.

Fotones de im&#xE1;genes de fluorescencia vida de fluorescencia intr&#xED;nseca en el tejido cerebral humano y de rata revela NADH Encuadernaci&#xF3;n lugares distintos

&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x5C42;&#x5207;&#x7247;&#x5141;&#x8BB8;&#x540C;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x76AE;&#x8D28;&#x5C42;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5207;&#x7247;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x672C;&#x673A;&#x751F;&#x7406;&#x6295;&#x5165;&#x548C;&#x4EA7;&#x51FA;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4F53;&#x5185;&#x3001; &#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x6210;&#x50CF;&#x4FDD;&#x7559;&#x672C;&#x673A;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x901A;&#x5E38;&#x5C40;&#x9650;&#x4E8E;&#x6DF1;&#x5EA6; &lt; 500 microm&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x591A;&#x4E2A;&#x76AE;&#x8D28;&#x5C42;&#x540C;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x96BE;&#x7531;&#x4E8E;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x8D28;&#x7684;&#x5206;&#x5C42;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA; 1 &#x6BEB;&#x7C73; microprisms &#x7528;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5185;&#x3001; &#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x6210;&#x50CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x68F1;&#x955C;&#x542F;&#x7528;&#x540C;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x591A;&#x7684;&#x76AE;&#x8D28;&#x5C42;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5C42; V&#xFF0C;&#x4ECE;&#x67D0;&#x4E2A;&#x89D2;&#x5EA6;&#x770B;&#xFF0C;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x5207;&#x7247;&#x7684;&#x7B79;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;&#x56FE;&#x50CF;&#x662F;&#x4ECE;&#x9F20;&#x6807;&#x7535;&#x673A;&#x548C;&#x8EAF;&#x4F53;&#x611F;&#x89C9;&#x76AE;&#x5C42;&#x6536;&#x96C6;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD1; 900-microm &#x5168;&#x89C6;&#x91CE;&#x3002;&#x5728;&#x9AD8;&#x653E;&#x5927;&#x500D;&#x6570;&#x6210;&#x50CF;&#x76EE;&#x6807; 1 &#x6BEB;&#x7C73;&#x7684; coverglass &#x6821;&#x6B63;&#xFF0C;&#x51B3;&#x8BAE;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x89E3;&#x51B3;&#x5BF9;&#x4E94;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6811;&#x7A81;&#x68D8;&#x3002;&#x56FE;&#x50CF;&#x4F7F;&#x7528;&#x68F1;&#x955C;&#x6536;&#x96C6;&#x53EF;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x4F20;&#x7EDF;&#x5207;&#x7247;&#x5236;&#x5907;&#x4ECE;&#x6536;&#x96C6;&#x5230;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x3002;&#x529F;&#x80FD;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x8840;&#x6D41;&#x91CF;&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x76AE;&#x5C42;&#x6DF1;&#x5EA6;&#x8FD8;&#x4ECB;&#x7ECD;&#xFF0C;&#x5141;&#x8BB8;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8840;&#x6D41;&#x91CF;&#x548C;&#x6D41;&#x901F;&#x3002;H &amp; E &#x67D3;&#x8272;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x5468;&#x56F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4ECD;&#x4FDD;&#x7559;&#x5728;&#x5176;&#x672C;&#x673A;&#x5206;&#x5C42;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6C0F;&#x5C0F;&#x4F53;&#x67D3;&#x8272;&#x5242;&#x4E0E;&#x7898;&#x5316;&#x4E19;&#x952D;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x635F;&#x5BB3;&#x7684;&#x8BC4;&#x4F30;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x7EC6;&#x80DE;&#x635F;&#x4F24;&#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E; &lt; 100 microm &#x4ECE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x73BB;&#x7483;&#x754C;&#x9762;&#x3002;Microprisms &#x662F;&#x5230;&#x76AE;&#x5C42;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x4F17;&#x591A;&#x4F18;&#x70B9;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x4F53;&#x5185;&#x591A;&#x5C42;&#x76AE;&#x8D28;&#x6210;&#x50CF;&#x7684; Microprisms&#x3002;

Cortical slices allow for simultaneous imaging of multiple cortical layers. However, slices lack native physiological inputs and outputs. Although in vivo, two-photon imaging preserves the native context, it is typically limited to a depth of <500 microm. In addition, simultaneous imaging of multiple cortical layers is difficult due to the stratified organization of the cortex. We demonstrate the use of 1-mm microprisms for in vivo, two-photon neocortical imaging. These prisms enable simultaneous imaging of multiple cortical layers, including layer V, at an angle typical of slice preparations. Images were collected from the mouse motor and somatosensory cortex and show a nearly 900-microm-wide field of view. At high-magnification imaging using an objective with 1-mm of coverglass correction, resolution is sufficient to resolve dendritic spines on layer V neurons. Images collected using the microprism are comparable to images collected from a traditional slice preparation. Functional imaging of blood flow at various neocortical depths is also presented, allowing for quantification of red blood cell flux and velocity. H&E staining shows the surrounding tissue remains in its native, stratified organization. Estimation of neuronal damage using propidium iodide and a fluorescent Nissl stain reveals cell damage is limited to <100 microm from the tissue-glass interface. Microprisms are a straightforward tool offering numerous advantages for into neocortical tissue.

Microprisms for in vivo multilayer cortical imaging.

Tranches de cortex permet pour l&#x26;#39;imagerie simultan&#xE9;e de plusieurs couches corticales. Toutefois, les tranches n&#x26;#39;ont pas indig&#xE8;nes entr&#xE9;es et sorties physiologiques. Bien que in vivo, l&#x26;#39;imagerie &#xE0; deux photons pr&#xE9;serve le contexte natif, il est g&#xE9;n&#xE9;ralement limit&#xE9;e &#xE0; une profondeur de &#x26;lt;500 microm. En outre, l&#x26;#39;imagerie simultan&#xE9;e de plusieurs couches corticales est difficile en raison de l&#x26;#39;organisation stratifi&#xE9;e du cortex. Nous d&#xE9;montrons l&#x26;#39;utilisation de 1-mm microprismes pour in vivo, l&#x26;#39;imagerie &#xE0; deux photons n&#xE9;ocorticale. Ces prismes permettre l&#x26;#39;imagerie simultan&#xE9;e de plusieurs couches corticales, y compris la couche V, un angle typique de pr&#xE9;parations de tranche. Les images ont &#xE9;t&#xE9; recueillies &#xE0; partir du moteur de la souris et le cortex somatosensoriel et de montrer un champ de pr&#xE8;s de 900 microm &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle de vue. A fort grossissement d&#x26;#39;imagerie utilisant un objectif de 1 mm de correction lamelle, la r&#xE9;solution est suffisante pour r&#xE9;soudre les &#xE9;pines dendritiques des neurones V couche. Images recueillies &#xE0; l&#x26;#39;aide de la microprismes sont comparables &#xE0; des images recueillies &#xE0; partir d&#x26;#39;une pr&#xE9;paration de tranches traditionnelle. L&#x26;#39;imagerie fonctionnelle de la circulation sanguine &#xE0; diff&#xE9;rentes profondeurs du n&#xE9;ocortex est &#xE9;galement pr&#xE9;sent&#xE9;e, permettant de quantifier les flux de globules rouges et de la vitesse. Coloration H &#x26;amp; E montre le tissu environnant reste dans son origine, l&#x26;#39;organisation stratifi&#xE9;e. Estimation de l&#xE9;sions neuronales utilisant l&#x26;#39;iodure de propidium et un colorant fluorescent Nissl r&#xE9;v&#xE8;le des dommages aux cellules est limit&#xE9;e &#xE0; &#x26;lt;100 microm&#xE8;tre de l&#x26;#39;interface avec le tissu de verre. Microprismes sont un outil simple offrant de nombreux avantages pour les tissus en n&#xE9;ocorticale.

Microprismes pour l&#x26;#39;imagerie in vivo corticale multicouche

Kortikale Scheiben erm&ouml;glichen gleichzeitige Darstellung der kortikalen Mehrschichtigkeit. Scheiben fehlt jedoch native physiologische ein- und Ausg&auml;nge. Obwohl in-vivo, zwei-Photonen-Bildgebung den systemeigenen Kontext beibeh&auml;lt, ist es in der Regel beschr&auml;nkt auf eine Tiefe von &lt; 500 Microm. Dar&uuml;ber hinaus ist die simultane Bildgebung der kortikalen Mehrschichtigkeit schwierig, da die geschichteten Organisation des Cortex. Wir demonstrieren die Verwendung von 1-mm-Mikroprismen f&uuml;r in-vivo, zwei-Photonen neokortikalen Bildgebung. Diese Prismen erm&ouml;glichen gleichzeitige Bildgebung mehrere kortikalen Schichten, einschlie&szlig;lich der Schicht V, schr&auml;g typische Scheibe Zubereitungen. Bilder wurden von der Maus Motor und somatosensorischen Kortex gesammelt und zeigen eine fast 900-Microm-weiten Blickfeld. Bei hoher Vergr&ouml;&szlig;erung Bildgebung mit ein Ziel mit 1 mm Deckglas Korrektur, reicht die Aufl&ouml;sung dendritische Dornen auf Schicht V Neuronen zu beheben. Bilder mit der Mikroprismenring gesammelt sind vergleichbar mit Bilder von einer traditionellen Segment Zubereitung gesammelt. Funktionelle Bildgebung der Blutfluss in verschiedenen neokortikalen tiefen wird auch dargestellt, zulassend Quantifizierung der roten Blutzelle Flussmittel und Geschwindigkeit. H &amp; E F&auml;rbung zeigt, dass das umliegende Gewebe im systemeigenen bleibt, geschichtet Organisation. Absch&auml;tzung der neuronalen Sch&auml;den mit Propidium Jodid und einem fluoreszierenden Nissl Fleck zeigt Zellsch&auml;den beschr&auml;nkt sich auf &lt; 100 Microm die Gewebe-Glas-Schnittstelle. Mikroprismen sind ein einfaches Tool bietet zahlreiche Vorteile in neokortikalen Gewebe.

Mikroprismen f&uuml;r in-vivo mehrlagige kortikale Imaging.

Fette corticale consentono per l&#39;imaging simultanea di pi&ugrave; strati corticali. Tuttavia, fette mancano nativi fisiologici ingressi e uscite. Anche se imaging in vivo, due-fotone conserva il contesto nativo, &egrave; in genere limitata ad una profondit&agrave; di &lt; microm 500. Inoltre, imaging simultanea di pi&ugrave; strati corticali &egrave; difficile a causa dell&#39;organizzazione stratificata della corteccia. Noi dimostrare l&#39;uso di 1 mm microprismi per l&#39;imaging in vivo, due-fotone neocorticale. Questi prismi abilitare simultaneo imaging di strati corticali multipli, compreso strato V, con un angolo tipico di fetta preparati. Le immagini sono stati raccolte dal motore del mouse e corteccia somatosensoriale e visualizza un campo visivo di quasi 900-microm-wide. All&#39;imaging di alto ingrandimento utilizzando un obiettivo con 1 mm di correzione coprioggetti, risoluzione &egrave; sufficiente per risolvere le spine dendritiche su neuroni di strato V. Immagini raccolte mediante il microprismi sono paragonabili alle immagini raccolte da una preparazione tradizionale fetta. Imaging funzionale del flusso di sangue a varie profondit&agrave; neocorticale &egrave; anche presentato, consentendo per la quantificazione del flusso di globuli rossi e la velocit&agrave;. H &amp; E spettacoli il tessuto circostante rimane nella sua nativa, la colorazione stratificata e organizzazione. Stima dei danni neuronali utilizzando ioduro di propidium e una fluorescente di Nissl rivela danno cellulare &egrave; limitato a &lt; 100 microm dall&#39;interfaccia di tessuto di vetro. Microprismi sono un semplice strumento che offre numerosi vantaggi nel tessuto neocorticale.

Microprismi per imaging corticale multistrato in vivo.

&#x76AE;&#x8CEA;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x76AE;&#x8CEA;&#x5C64;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x5165;&#x529B;&#x3068;&#x51FA;&#x529B;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; in vivo&#x3067;&#x3001;&#x4E8C;&#x5149;&#x5B50;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x26;lt;500&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x6DF1;&#x3055;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x76AE;&#x8CEA;&#x5C64;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x5C64;&#x72B6;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x56F0;&#x96E3;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;in vivo&#x3001;&#x4E8C;&#x5149;&#x5B50;&#x65B0;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;1 mm&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x6A19;&#x672C;&#x306E;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x89D2;&#x5EA6;&#x3067;&#x3001;V&#x5C64;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x76AE;&#x8CEA;&#x5C64;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x753B;&#x50CF;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x4F53;&#x6027;&#x611F;&#x899A;&#x91CE;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x3001;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306E;&#x307B;&#x307C;900&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x88DC;&#x6B63;&#x306E;1 mm&#x306E;&#x5BFE;&#x7269;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x9AD8;&#x500D;&#x7387;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x3067;&#x3001;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306F;V&#x5C64;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x68D8;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x305F;&#x753B;&#x50CF;&#x306F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x30B9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B9;&#x6A19;&#x672C;&#x304B;&#x3089;&#x53CE;&#x96C6;&#x3057;&#x305F;&#x753B;&#x50CF;&#x3068;&#x540C;&#x7B49;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x65B0;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x6DF1;&#x3055;&#x3067;&#x8840;&#x6D41;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; H&#xFF06;E&#x67D3;&#x8272;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3001;&#x5C64;&#x72B6;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E8;&#x30A6;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x67D3;&#x8272;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x86CD;&#x5149;&#x30CB;&#x30C3;&#x30B9;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x640D;&#x50B7;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x26;lt;100&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x7C21;&#x5358;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x4F53;&#x591A;&#x5C64;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;

&#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC870;&#xAC01; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBD84;&#xD560; &#xC601;&#xC5ED; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC785;&#xB825;&#xACFC; &#xCD9C;&#xB825; &#xBD80;&#xC871;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, 2 &#xAD11;&#xC790; &#xC601;&#xC0C1; &#xAE30;&#xBCF8; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;&#xC758; &#xAE4A;&#xC774;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &lt; 500 microm. &#xB610;&#xD55C;, &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC758; &#xD53C; &#xC9C8; &#xCE35; &#xC0C1;&#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC5B4;&#xB835;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, 2 &#xAD11;&#xC790; neocortical &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; 1 m m &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD504;&#xB9AC;&#xC998;&#xC758; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; V, &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xAC01;&#xB3C4; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD53C; &#xC9C8; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC601;&#xC0C1; &#xAC00;&#xB2A5;. &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xD130; somatosensory &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1; &#xB41C; &#xACE0; &#xAC70;&#xC758; 900 microm &#xC804;&#xCCB4; &#xC2DC;&#xC57C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Coverglass &#xAD50;&#xC815;&#xC758; 1 m m &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB192;&#xC740; &#xD655;&#xB300; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; V &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xCABD;&#xC774; &#xD574;&#xACB0;. &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB294; microprism&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xC9D1; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xC2AC;&#xB77C;&#xC774;&#xC2A4; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1; &#xB41C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xBE44;&#xAD50;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; neocortical &#xAE4A;&#xC774;&#xC5D0; &#xD608;&#xC561; &#xD750;&#xB984;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC601;&#xC0C1; &#xB610;&#xD55C; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; &#xC720;&#xB7C9; &#xBC0F; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC815;&#xB7C9;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC81C;&#xC2DC;. H &amp; E &#xC1FC; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBCF8;&#xD1A0;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC544; &#xC5BC;&#xB8E9; &#xC870;&#xC9C1; &#xCE35; &#xD654;. Propidium &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xD654; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; Nissl &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC190;&#xC0C1;&#xC758; &#xCD94;&#xC815; &#xC138;&#xD3EC; &#xC190;&#xC0C1;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &lt; 100 microm &#xC870;&#xC9C1; &#xC720;&#xB9AC; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC9C0;&#xB3C4; neocortical &#xC870;&#xC9C1;&#xC73C;&#xB85C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC774;&#xC810;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xCE35; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xB3C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rebanadas corticales permiten im&#xE1;genes simult&#xE1;neas de m&#xFA;ltiples capas corticales. Sin embargo, carecen de rodajas de nativos entradas y salidas fisiol&#xF3;gicas. Aunque en vivo, de dos fotones de imagen conserva el contexto nativo, t&#xED;picamente se limita a una profundidad de &#x26;lt;500 micras. Adem&#xE1;s, las im&#xE1;genes simult&#xE1;nea de m&#xFA;ltiples capas corticales es dif&#xED;cil debido a la organizaci&#xF3;n estratificada de la corteza. Se demuestra el uso de 1-mm microprismas para in vivo, de dos fotones de im&#xE1;genes neocortical. Estos prismas permiten im&#xE1;genes simult&#xE1;neas de m&#xFA;ltiples capas corticales, incluyendo la capa V, en un &#xE1;ngulo t&#xED;pico de las preparaciones rebanada. Las im&#xE1;genes fueron recogidas por el motor y la corteza somatosensorial del rat&#xF3;n y mostrar un campo de casi 900 micras-de visi&#xF3;n amplio. En im&#xE1;genes de alta magnificaci&#xF3;n, utilizando un objetivo de 1 mm de la correcci&#xF3;n de cubre objetos, la resoluci&#xF3;n es suficiente para resolver las espinas dendr&#xED;ticas en las neuronas de la capa V. Im&#xE1;genes recogidas con el microprisma son comparables a las im&#xE1;genes recogidas a partir de una rebanada preparaci&#xF3;n tradicional. Imagen funcional del flujo de sangre a diferentes profundidades neocorticales se presenta tambi&#xE9;n, lo que permite la cuantificaci&#xF3;n de flujo de c&#xE9;lulas rojas de la sangre y la velocidad. Tinci&#xF3;n H &#x26;amp; E muestra el tejido circundante permanece en su organizaci&#xF3;n ind&#xED;gena, estratificado. Estimaci&#xF3;n de da&#xF1;o neuronal utilizando yoduro de propidio y una mancha fluorescente Nissl revela el da&#xF1;o celular se limita a &#x26;lt;100 micras desde la interfaz de tejido de vidrio. Microprismas es una herramienta sencilla que ofrece numerosas ventajas para el en el tejido neocortical.

Microprismas de im&#xE1;genes in vivo de m&#xFA;ltiples capas corticales

&#x771F;&#x6B63;&#x7684;&#x7F8E;&#x56FD;&#x8054;&#x90A6;&#x50A8;&#x5907;&#x5238;&#x6709;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x56FA;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x3002;&#x8FD9;&#x5141;&#x8BB8;&#x5047;&#x5E01;&#x7EB8;&#x5F20;&#x68C0;&#x6D4B;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5927;&#x65F6;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x771F;&#x6B63;&#x7684;&#x7EB8;&#x8D28;&#x8D27;&#x5E01;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x626B;&#x63CF;&#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x6FC0;&#x5149;&#x6FC0;&#x53D1;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x76F8;&#x5173;&#x5355;&#x5149;&#x5B50;&#x8BA1;&#x6570; &#xFF08;TCSPC&#xFF09; &#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x6837;&#x7EA6; 4 mm(2) &#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x4E09;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5192;&#x724C;&#x6837;&#x672C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x56DB;&#x4E2A;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x5192;&#x724C;&#x6837;&#x672C;&#x9002;&#x5408;&#x5355;&#x7EC4;&#x5206;&#x8870;&#x51CF;&#x3002;&#x4E94;&#x4E5D;&#x5192;&#x724C;&#x6837;&#x54C1;&#x9002;&#x5408;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x88AB;&#x6807;&#x8BC6;&#x4E3A;&#x5192;&#x724C;&#x56E0;&#x91CD;&#x5927;&#x504F;&#x5DEE;&#x5728;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x76F8;&#x6BD4;&#x771F;&#x6B63;&#x7684;&#x6761;&#x4F8B;&#x8349;&#x6848;&#x3002;

&#x5192;&#x724C;&#x7F8E;&#x56FD;&#x7EB8;&#x5E01;&#x4F7F;&#x7528;&#x56FA;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

Genuine U.S. Federal Reserve Notes have a consistent, two-component intrinsic fluorescence lifetime. This allows for detection of counterfeit paper money because of its significant differences in fluorescence lifetime when compared to genuine paper money. We used scanning two-photon laser excitation and the time-correlated single photon counting (TCSPC) method to sample a approximately 4 mm(2) region. Three types of counterfeit samples were tested. Four out of the nine counterfeit samples fit to a one-component decay. Five out of nine counterfeit samples fit to a two-component model, but are identified as counterfeit due to significant deviations in the longer lifetime component compared to genuine bills.

Detection of counterfeit U.S. paper money using intrinsic fluorescence lifetime.

D&#x26;#39;origine des &#xC9;tats-Unis Federal Reserve Notes ont une approche coh&#xE9;rente, &#xE0; deux composants &#xE0; vie fluorescence intrins&#xE8;que. Cela permet pour la d&#xE9;tection du papier-monnaie contrefaite en raison de ses diff&#xE9;rences significatives dans la dur&#xE9;e de vie de fluorescence comparativement au papier-monnaie r&#xE9;elle. Nous avons utilis&#xE9; la num&#xE9;risation d&#x26;#39;excitation laser &#xE0; deux photons et le temps-corr&#xE9;l&#xE9;e comptage de photon unique (TCSPC) m&#xE9;thode pour d&#xE9;guster un mm environ 4 (2) la r&#xE9;gion. Trois types d&#x26;#39;&#xE9;chantillons de contrefa&#xE7;on ont &#xE9;t&#xE9; test&#xE9;s. Quatre des neuf &#xE9;chantillons de contrefa&#xE7;on s&#x26;#39;adapter &#xE0; une d&#xE9;croissance &#xE0; un composant. Cinq des neuf &#xE9;chantillons de contrefa&#xE7;on s&#x26;#39;adapter &#xE0; un mod&#xE8;le &#xE0; deux composantes, mais sont d&#xE9;tect&#xE9;s comme faux en raison des &#xE9;carts importants dans la composante dur&#xE9;e de vie par rapport &#xE0; un billet authentique.

D&#xE9;tection du papier-monnaie de la contrefa&#xE7;on aux &#xC9;tats-Unis l&#x26;#39;aide de vie de fluorescence intrins&#xE8;que

Echte amerikanische Federal Reserve Notes haben eine konsistente, Zweikomponenten-intrinsische Fluoreszenz-Lebensdauer. Auf diese Weise k&ouml;nnen f&uuml;r die Erkennung von gef&auml;lschten Papiergeld wegen seiner erheblichen Unterschiede im Fluoreszenz-Lebensdauer im Vergleich zu echten Papiergeld. Wir verwendet Scannen, zwei-Photonen-Laser Erregung und die Zeit korrelierte single-Photon, das Z&auml;hlmethode (TCSPC), um eine ungef&auml;hr 4 mm(2)-Region zu probieren. Drei Arten von Softwaref&auml;lschungen wurden getestet. Vier von den neun Softwaref&auml;lschungen passen zu einem Einkomponenten-Verfall. F&uuml;nf von neun Softwaref&auml;lschungen passen zu einem zwei-Komponenten-Modell, aber als F&auml;lschung durch erhebliche Abweichungen in der l&auml;ngeren Lebensdauer-Komponente im Vergleich zu echten Rechnungen identifiziert werden.

Erkennung von gef&auml;lschten US-Papiergeld mit intrinsische Fluoreszenz-Lebensdauer.

Genuino US Federal Reserve note hanno una vita coerente, due-componente fluorescenza intrinseca. In questo modo per il rilevamento di banconote contraffatte a causa delle sue differenze significative nella durata della fluorescenza rispetto alla vera carta moneta. Abbiamo usato scansione di eccitazione del due-fotone laser e il fotone singolo correlati nel tempo (TCSPC) metodo di conteggio per una regione di circa 4 mm(2) del campione. Tre tipi di contraffazione campioni sono stati testati. Quattro dei nove campioni contraffazione adatta a un decadimento monocomponente. Cinque di nove campioni contraffazione adattano ad un modello a due componenti, ma sono identificati come contraffatte a causa di deviazioni significative nel componente durata pi&ugrave; lunga rispetto alle fatture originali.

Rilevamento di contraffazione degli Stati Uniti carta moneta utilizzando vita di fluorescenza intrinseca.

&#x672C;&#x7269;&#x306E;&#x7C73;&#x9023;&#x90A6;&#x6E96;&#x5099;&#x5236;&#x5EA6;&#x7406;&#x4E8B;&#x4F1A;&#x306E;&#x6CE8;&#x610F;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x4E8C;&#x6210;&#x5206;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x672C;&#x7269;&#x306E;&#x7D19;&#x5E63;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6709;&#x610F;&#x5DEE;&#x306E;&#x507D;&#x9020;&#x7D19;&#x5E63;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D04;4&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x5149;&#x5B50;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x52B1;&#x8D77;&#x3068;&#x6642;&#x9593;&#x76F8;&#x95A2;&#x5358;&#x4E00;&#x5149;&#x5B50;&#x8A08;&#x6570;&#xFF08;TCSPC&#xFF09;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E3;&#x30F3;&#x3057;&#x3066;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x507D;&#x9020;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x304C;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 9&#x507D;&#x9020;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x3046;&#x3061;4&#x3064;&#x306E;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 9&#x306E;&#x3046;&#x3061;5&#x507D;&#x9020;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;2&#x6210;&#x5206;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x672C;&#x7269;&#x306E;&#x7D19;&#x5E63;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x9577;&#x5BFF;&#x547D;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x9038;&#x8131;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x507D;&#x9020;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x5BFF;&#x547D;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x507D;&#x9020;&#x7C73;&#x56FD;&#x7D19;&#x5E63;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;

&#x5178;&#x578B;&#x6210;&#x50CF;&#x6DF1;&#x5EA6;&#x7ED3;&#x5408;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; (MPM) &#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x5C11;&#x4E8E; 300 &#x5988;&#x5988;&#x7531;&#x4E8E;&#x5149;&#x6563;&#x5C04;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x3002;&#x5149;&#x5B66;&#x7ED3;&#x7B97;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x901A;&#x8FC7;&#x66FF;&#x6362;&#x5177;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x6298;&#x5C04;&#x7387;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x6DB2;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C34;&#x5149;&#x6563;&#x5C04;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x3001; &#x56FA;&#x5B9A;&#x3001; &#x6E05;&#x9664;&#x9F20;&#x6807;&#x673A;&#x5173;&#x4E0E;&#x7A7F;&#x900F;&#x6DF1;&#x5EA6;&#x548C;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x89C6;&#x56FE;&#x8D85;&#x8FC7; 2 &#x6BEB;&#x7C73;&#x3002; MPM &#x8FDE;&#x8F67;&#x7BA1;&#x673A;&#x4F7F;&#x5927;&#x578B;&#x4E09;&#x7EF4;&#x6570;&#x636E;&#x96C6;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E0E;&#x50CF;&#x7D20;&#x683C;&#x5F0F;&#x548C;&#x968F;&#x65F6;&#x8BBF;&#x95EE;&#x56FA;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x548C;&#x4E8C;&#x6B21;&#x8C10;&#x6CE2;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x7075;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x56FE;&#x50CF;&#x548C;&#x4E09;&#x7EF4;&#x56FE;&#x50CF;&#x5806;&#x6808;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x3001; &#x5C0F;&#x80A0;&#x3001; &#x5927;&#x80A0;&#x3001; &#x80BE;&#x3001; &#x80BA;&#x3001; &#x548C;&#x777E;&#x4E38;&#x4E00;&#x6837;&#x5927; 4,096 x 4,096 &#x50CF;&#x7D20;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x5927;&#x5C0F;&#x3002;

&#x6E05;&#x9664;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x673A;&#x5173;&#x7684;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x672F;&#x3002;

Typical imaging depths with multiphoton microscopy (MPM) are limited to less than 300 mum in many tissues due to light scattering. Optical clearing significantly reduces light scattering by replacing water in the organ tissue with a fluid having a similar index of refraction to that of proteins. We demonstrate MPM of intact, fixed, cleared mouse organs with penetration depths and fields of view in excess of 2 mm. MPM enables the creation of large 3-D data sets with flexibility in pixel format and ready access to intrinsic fluorescence and second-harmonic generation. We present high-resolution images and 3-D image stacks of the brain, small intestine, large intestine, kidney, lung, and testicle with image sizes as large as 4,096 x 4,096 pixels.

Multiphoton microscopy of cleared mouse organs.

Des profondeurs d&#x26;#39;imagerie typiques avec la microscopie multiphotonique (MPM) sont limit&#xE9;s &#xE0; moins de 300 mum dans de nombreux tissus en raison de diffusion de la lumi&#xE8;re. Compensation optique r&#xE9;duit sensiblement la diffusion de lumi&#xE8;re par le remplacement de l&#x26;#39;eau dans le tissu organique avec un fluide ayant un indice de r&#xE9;fraction similaire &#xE0; celui de la prot&#xE9;ines. Nous d&#xE9;montrons MPM de intactes, fixes, les organes de souris compens&#xE9;s avec des profondeurs de p&#xE9;n&#xE9;tration et de champs de vue au-del&#xE0; de 2 mm. MPM permet la cr&#xE9;ation de grands 3-D des ensembles de donn&#xE9;es avec souplesse dans le format de pixel et un acc&#xE8;s facile &#xE0; la g&#xE9;n&#xE9;ration de fluorescence et de second harmonique intrins&#xE8;que. Nous pr&#xE9;sentons des images haute r&#xE9;solution et des piles d&#x26;#39;images 3-D du cerveau, l&#x26;#39;intestin gr&#xEA;le, gros intestin, les reins, les poumons, et le testicule avec des tailles d&#x26;#39;image plus grand que 4096 x 4096 pixels.

Microscopie multiphotonique des organes de souris compens&#xE9;s

Typische bildgebende tiefen mit multiphoton-Mikroskopie (MPM) beschr&auml;nken sich auf weniger als 300 Mutter in vielen Geweben durch Lichtstreuung. Optische l&ouml;schen deutlich reduziert Lichtstreuung durch Wasser im Gewebe Orgel durch eine Fl&uuml;ssigkeit mit einem &auml;hnlichen Brechungsindex der Proteine zu ersetzen. Wir zeigen, dass MPM intakt, feste, ger&auml;umte Maus Organe mit tiefen eindringen und Gesichtsfelder von mehr als 2 mm. MPM die Schaffung gro&szlig;er 3-d-Datens&auml;tze mit Flexibilit&auml;t im Pixelformat und Zugriff auf systeminterne Fluoreszenz und zweite-harmonische Generation erm&ouml;glicht. Pr&auml;sentieren wir Ihnen hochaufl&ouml;sende Bilder und 3D-Bild Stapel von Gehirn, D&uuml;nndarm, Dickdarm, Niere, Lunge, und Hoden mit Bildgr&ouml;&szlig;en so gro&szlig; wie 4.096 x 4.096 Pixel.

Multiphoton-Mikroskopie ger&auml;umte Maus Organe.

Tipica profondit&agrave; imaging con microscopia multifotonica (MPM) sono limitati a meno di 300 mamma in molti tessuti a causa della dispersione della luce. Compensazione ottica notevolmente riduce la dispersione della luce sostituendo acqua nel tessuto organo con un fluido avendo un indice di rifrazione simile a quello delle proteine. Dimostriamo che MPM di organi intatti, fisso, sgomberati mouse con profondit&agrave; di penetrazione e campi di vista superiore a 2 mm. MPM consente la creazione di grandi insiemi di dati 3D con flessibilit&agrave; in formato pixel e pronto accesso a fluorescenza intrinseca e la generazione di seconda armonica. Vi presentiamo le immagini ad alta risoluzione e pile di immagini tridimensionali del cervello, dell&#39;intestino tenue, intestino crasso, rene, polmone e testicolo con dimensioni grandi come 4.096 x 4.096 pixel dell&#39;immagine.

Microscopia multifotonica degli organi del mouse deselezionata.

&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#xFF08;MPM&#xFF09;&#x306E;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x306A;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x6DF1;&#x3055;&#x304C;&#x5149;&#x6563;&#x4E71;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;300&#x4EBA;&#x672A;&#x6E80;&#x306E;&#x304A;&#x6BCD;&#x3055;&#x3093;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5149;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5C48;&#x6298;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x6D41;&#x4F53;&#x3068;&#x81D3;&#x5668;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x6C34;&#x3092;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x5149;&#x6563;&#x4E71;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x6DF1;&#x3055;&#x3068;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3001;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3001;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;MPM&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; MPM&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;3&#x6B21;&#x5143;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x4F5C;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x30D4;&#x30AF;&#x30BB;&#x30EB;&#x5F62;&#x5F0F;&#x3068;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x3068;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x9AD8;&#x8ABF;&#x6CE2;&#x767A;&#x751F;&#x3078;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x67D4;&#x8EDF;&#x6027;&#x3092;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x3068;&#x8133;&#x3001;&#x5C0F;&#x8178;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x3001;&#x814E;&#x81D3;&#x3001;&#x80BA;&#x3001;4096 X 4096&#x30D4;&#x30AF;&#x30BB;&#x30EB;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x777E;&#x4E38;&#x306E;3-D&#x753B;&#x50CF;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C3;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;

Multiphoton &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; (MPM)&#xC640; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xAE4A;&#xC774; &#xBBF8;&#xB9CC; 300 &#xC5C4;&#xB9C8; &#xBE5B; &#xC0B0;&#xB780;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xB9CE;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xAD11;&#xD559; &#xC9C0;&#xC6B0;&#xAE30; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD74;&#xC808; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC0C9;&#xC778; &#xB370; &#xC561;&#xCCB4; &#xBB3C;&#xC774; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558; &#xC5EC; &#xBE5B; &#xC0B0;&#xB780;&#xC744; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. MPM &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xCDE8;&#xC18C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC7A5;&#xAE30; &#xCE68;&#xD22C; &#xAE4A;&#xC774;&#xC640; &#xD544;&#xB4DC; &#xBCF4;&#xAE30;&#xC758; &#xCD08;&#xACFC; 2 m m. MPM&#xC758; &#xD53D;&#xC140; &#xD615;&#xC2DD; &#xBC0F; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xD615;&#xAD11; &#xBC0F; 2 &#xCC28; &#xACE0;&#xC870;&#xD30C; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC900;&#xBE44;&#xAC00; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC5F0;&#xC131;&#xC744; &#xD070; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xB1CC;, &#xC18C;&#xC7A5;, &#xB300; &#xC7A5;, &#xC2E0;&#xC7A5;, &#xD3D0;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xACE0;&#xD658;&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xC2A4;&#xD0DD; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xD06C;&#xAE30;&#xAC00; 4096 x 4096 &#xD53D;&#xC140; &#xB9CC;&#xD07C; &#xD070; &#xC120;&#xBB3C;&#xC774;.

&#xC9C0;&#xC6B4;&#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAE30;&#xAD00;&#xC758; multiphoton &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Profundidades t&#xED;picas de im&#xE1;genes con microscop&#xED;a multifot&#xF3;nica (MPM) se limitan a menos de 300 madre en muchos tejidos debido a la dispersi&#xF3;n de la luz. Compensaci&#xF3;n &#xF3;ptica reduce significativamente la dispersi&#xF3;n de luz mediante la sustituci&#xF3;n de agua en el tejido de los &#xF3;rganos con un fluido que tiene un &#xED;ndice de refracci&#xF3;n similares a la de las prote&#xED;nas. Demostramos MPM de los &#xF3;rganos intactos, fijos, rat&#xF3;n despejadas con una profundidad de penetraci&#xF3;n y campos de visi&#xF3;n de m&#xE1;s de 2 mm. MPM permite la creaci&#xF3;n de grandes en 3-D los conjuntos de datos con la flexibilidad en el formato de p&#xED;xel y el f&#xE1;cil acceso a la generaci&#xF3;n de fluorescencia intr&#xED;nseca y el segundo arm&#xF3;nico. Se presentan im&#xE1;genes de alta resoluci&#xF3;n 3-D y pilas de im&#xE1;genes del cerebro, el intestino delgado, intestino grueso, ri&#xF1;&#xF3;n, pulm&#xF3;n y test&#xED;culo con tama&#xF1;os de imagen tan grande como 4.096 x 4.096 p&#xED;xeles.

Microscop&#xED;a multifot&#xF3;nica de los &#xF3;rganos de rat&#xF3;n aclarados

&#x591A;&#x5C42;&#x6D3B;&#x4F53;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x5C42;&#x4F7F;&#x7528;&#x68F1;&#x955C;&#x3002;

Multi-layer in vivo imaging of neocortex using a microprism.

Multi-couche d&#x26;#39;imagerie in vivo du n&#xE9;ocortex l&#x26;#39;aide d&#x26;#39;un microprisme

Mehrlagige in-vivo Bildgebung der Gro&szlig;hirnrinde mit einem Mikroprismenring.

Multistrato imaging in vivo della neocorteccia utilizzando un microprismi.

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30EA;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x65B0;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30EC;&#x30A4;&#x30E4;

Article	Year
Multiphoton fluorescence lifetime imaging of intrinsic fluorescence in human and rat brain tissue reveals spatially distinct NADH binding. Optics express\| PubMed ID: 18542519	2008
Microprisms for in vivo multilayer cortical imaging. Journal of neurophysiology\| PubMed ID: 19494189	2009
Detection of counterfeit U.S. paper money using intrinsic fluorescence lifetime. Optics express\| PubMed ID: 19997451	2009
Multiphoton microscopy of cleared mouse organs. Journal of biomedical optics\| PubMed ID: 20615019	2010
Multi-layer in vivo imaging of neocortex using a microprism. Cold Spring Harbor protocols\| PubMed ID: 20679385	2010

Thomas H. Chia

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications