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使用容积-压力记录尾套法测量小鼠血压

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DOI:

10.3791/1291

2009年5月15日

本文内容

摘要

CODA 8通道高通量无创血压系统可同时测量多达8只小鼠或大鼠的血压。该尾套系统采用容积压力记录法(VPR),通过测定尾部血容量来测量血压。

摘要

CODA 8通道高通量无创血压系统可同时测量多达8只小鼠或大鼠的血压。该CODA尾套系统采用容积压力记录法(VPR)通过测定尾部血容量来测量血压。系统配备特制的差分压力传感器和阻断式尾套,可在无需获取单个脉搏信号的情况下测量尾部总血容量。为获得最准确的血压读数,特别关注了阻断尾套的长度设计。VPR技术可轻松获取深色皮肤啮齿类动物(如C57BL/6小鼠)的读数,并与磁共振成像(MRI)兼容。CODA系统可提供六种不同的血压参数测量值:收缩压、舒张压、心率、平均动脉压、尾部血流量和尾部血容量。测量可在清醒或麻醉状态下的小鼠或大鼠上进行。CODA系统包含控制器、笔记本电脑、软件、尾套、动物固定器、红外加热垫和红外温度计。系统配备七种不同尺寸的动物固定器,适用于体重低至8克的小鼠至高达900克的大鼠。

方案

  1. 设备设置
    1. 在实验室中选择一个室温在20°C或以上的区域。
    2. 避免靠近空调出风口和/或噪音较大的位置。
    3. 避免使动物接触可能引起刺激和/或应激的气味,例如香水、古龙水、化学品和清洁剂。
    4. 打开CODA控制器。
    5. 打开加热平台并设置为3级。如果室温高于25°C,则从1级或2级开始。
    6. 控制器诊断测试
      1. 打开CODA软件。
      2. 通过点击选择CODA设备。
      3. 点击“测试选定设备”。
      4. 选择要测试的袖带和通道,然后点击“测试”。
      5. 测试完成后,关闭设备测试窗口。
  2. 软件设置
    1. 人员与动物管理
      1. 人员管理
        1. 选择工具 > 管理人员。
        2. 点击“研究员1”以更改姓名。
        3. 点击后续行以添加其他研究人员。
        4. 点击“技术人员标签”以修改或添加技术人员。
        5. 点击“样本标签”为动物命名以便于识别,并选择动物类型:大鼠或小鼠。
        6. 点击“动物标签”以更改动物类型和敏感度。
    2. 新建实验
      1. 选择文件 > 新建 > 实验
      2. 开始新实验
        1. 输入实验名称。
        2. 选择主要研究员。
        3. 选择开始日期并点击“下一步”。
      3. 基本会话信息
        1. 输入会话名称。
        2. 将“适应循环次数”设为5。若不希望包含适应循环,可设为零。为帮助动物适应固定器和袖带,可在实验中增加额外循环,并连续运行5天。
        3. 将“集合数”设为1。
        4. 对于多个集合,将“集合间时间”设为30秒。
        5. 将“每集合循环数”设为20次循环。
        6. 将“循环间时间”设为5秒,然后点击“下一步”。
    3. 样本选择
      1.  
        1. 从样本池中选择样本,分配至第一个可用通道,然后点击“下一步”。
      2. 会话参数
        1. 将“最大阻断压力”设为250mmHg。
        2. 将“放气时间”设为小鼠20秒,大鼠15秒。
        3. 将“最小体积”设为15µL。
        4. 将“显示样式”设为每图一个通道。
        5. 添加其他研究员和技术人员,然后点击“下一步”。
      3. 会话脚本
        1. 查看会话脚本,然后点击“下一步”。
        2. 在完成动物准备部分之前,请勿点击“完成”。
  3. 动物准备
    1. 动物设置
      1. 动物固定器
        1. 为训练并改善动物适应性,可在实验中增加额外循环,并连续运行五天。您也可以在正式研究开始前连续三天每天将动物放入固定器中15分钟,以辅助其适应。
        2. 通过抓住动物尾巴将其轻轻放入固定器后部,固定器后部应朝向鼻锥的开口端。注意:动物体型与所选固定器尺寸的匹配。动物应能自由进入固定器。
        3. 小心地通过旋转固定器后部红色螺帽将后盖固定。固定时应注意避免夹住尾巴或其他身体部位。
        4. 将鼻锥向后盖滑动,以限制动物活动。鼻锥的位置应能防止动物在固定器内转身。
        5. 将固定器放置在加热平台的指定位置。若在一段时间内对同一组动物进行测试,务必轮换固定器在加热平台上的位置,以提高血压测量的一致性和准确性。让动物至少适应固定器5分钟。
        6. 动物在固定器内时,请勿触碰或操作动物。  过多接触可能会刺激动物。
        7. 切勿让动物在无人看管的情况下留在固定器中。
      2. 袖带放置
        1. 将尾巴穿过“阻断袖带”,尽可能靠近尾根部放置,但不要用力。
        2. 将“阻断袖带管路”固定在固定器顶部后方的凹槽中。
        3. 将尾巴穿过“VPR袖带”,并将其放置在距离“阻断袖带”2mm以内。
        4. 将“VPR袖带管路”固定在固定器顶部后方的凹槽中。
        5. 将袖带连接至CODA控制器。
      3. 动物体温
        1. 让动物至少有5分钟时间进行体温调节。
        2. 使用红外测温仪频繁记录动物体温。动物体温应在32至35°C之间。
  4. 实验
    1. 开始实验
      1. 点击“完成”,实验将立即开始。
    2. 结束实验
      1. 动物
        1. 立即从袖带和固定器中取出动物。
        2. 在“简单会话摘要报告”显示后,将动物放回笼中。
      2. 数据采集
        1. 最后一个循环完成后,被接受的循环数据将自动以电子表格形式显示在CODA应用程序中,点击“导出至Excel”按钮。
        2. 选择保存文件的文件夹,命名文件并点击“保存”。
        3. 打开Excel应用程序并点击“打开”。
        4. 查看所有文件类型以显示已保存的“.csv文件”,点击该文件。
      3. 数据处理
        1. 有多种方式可在Excel文件中处理数据。常见的做法是计算平均值和标准差。
        2. 如果标准差大于30,则删除该测量值。
        3. 此外,可查看被拒绝的循环,整个数据库也可轻松导出至Excel。更多信息请参阅用户手册。

披露

作者无任何利益冲突需要披露。

重印与许可

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CODA