拉瓦尔运动分析：研究斑马鱼幼虫化合物神经行为毒性的高通量方法

摘要

资料来源：张乙 等人。 研究环境污染物对斑马鱼幼虫的神经行为影响。 J. 维斯 (2020)

本文通过监测幼虫运动来描述斑马鱼对有毒化合物的行为反应。该议定书进一步考察了斑马鱼幼虫对环境污染物的反应。

方案

1. 行为测试的准备

1. 将 800 μL 的暴露溶液转移到 48 井微板的每口井中。
   注： 每组使用 16 口井（即控制解决方案、5 微克/升和 50 微克/升组）。
2. 使用 1 mL 移液器尖端将 200 μL 的暴露溶液从玻璃培养皿中的一个幼虫转移到 48 井微板的一口井中。
3. 将 4 mL 的暴露溶液转移到 6 井微板的每口井中。
   注： 每组使用一个 6 井微板。
4. 使用 1 mL 移液器尖端将 200 μL 的暴露溶液与两个幼虫转移到 6 井微板的每口井中。
   注： 每个组有六个重复组。
5. 在测试前，请确保考场的温度为 28 °C 2 h。
   注： 行为测试通常在下午进行。

2. 运动和路径角度测试

1. 保存协议并调低测试室的光线。
2. 在系统中对幼虫进行10分钟的适应，然后依次单击"实验""执行"按钮，然后选择保存实验文件的文件夹并输入结果名称。
3. 点击"背景""开始"按钮依次开始测试。
4. 当测试结束时，点击"实验""停止"按钮来停止实验。
   注： 系统显示系统停止时测试的数据。数据包括三个速度等级的跟踪距离和每分钟八个角度类的路径角度数。对于所示示例中的运动测试，计算每个光周期（10 分钟）的总距离，并比较对照组和治疗组之间的差异。
5. 将48口井微板移回光孵化器进行其他实验。

材料