成年斑马鱼肠道解剖技术：用于分析化合物吸收

摘要

来源：Jie J. 等，成年斑马鱼的口腔插管：一种评估生物活性化合物肠道吸收的模型。视觉化实验杂志 (2018)。

本视频介绍了分离肠道以评估生物活性化合物肠道吸收的技术。在此示例中，我们将从成年斑马鱼中分离肠道，以分析免疫刺激剂的吸收情况。

方案

1. 斑马鱼肠道解剖

1. 插管后特定时间（例如， 5 小时和/或 24 小时），将鱼用网转移至含有 300 mg/L 三卡因甲磺酸盐（MS-222）的溶液中实施安乐死。确保鳃盖停止运动且无尾部夹捏反射。通常 5 分钟已足够。
2. 用网捞起已安乐死的鱼，将其置于滤纸上。
   注意： 滤纸对于去除肠道周围的黏连组织非常有用。
3. 使用锋利的解剖剪从肛门向鳃盖方向做半圆形切口，并用精细镊子打开切口。剪断肠道两端，取出所有内脏器官，并将其置于滤纸上。
   注意： 操作应迅速，以减少细胞代谢和死亡。
   注意： 也可在 PBS 缓冲液中并置于冰上时去除黏连组织。
4. 将肠道从其他内脏器官中分离，注意保持其方向性（从前段至后段肠段），并将其拉直。通常，肠道前段比后段更宽。解剖时需注意获取完整的肠道组织。
   注意： 在体型较小的鱼中，后端肠段非常细且脆弱，容易断裂，尤其在体重 <0.7 g 的个体中更易发生。
5. 用镊子在滤纸上滚动肠道，以分离黏连组织。
6. 随后进行肠道组织的后续多种分析前处理。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
MS-222	Sigma Aldrich	E10521	粉末
10x PBS	Sigma Aldrich	P5493
滤纸	Filter-Lab	RM14034252