肌肉移植作为中风后恢复小鼠脑血流的外科手术策略

摘要

来源：Paro, M. R., 等. 小鼠大脑中动脉闭塞诱导卒中后脑-肌-血管吻合术治疗模型.J. Vis. Exp. (2022).

本视频展示了一种外科手术操作，即在短暂性大脑中动脉闭塞后，将带血管的肌肉移植到脑表面。该移植肌肉可促进缺血区域新生血管的形成，从而增强氧气和营养物质的供应。随着时间推移，整合后的肌肉有助于神经元存活，并促进卒中后的功能恢复。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 脑-肌-血管吻合术（EMS）手术
   1. 在大脑中动脉闭塞（MCAo）60分钟后，将小鼠随机分为仅MCAo组或MCAo + EMS组。在MCAo后4小时对MCAo + EMS组实施EMS手术，或在部分实验中进行假手术（仅EMS组）。手术前更换一副新的无菌外科手套。
      注意： 小鼠在MCAo 60分钟后从麻醉中恢复，并在EMS手术前重新麻醉。
   2. 对于接受EMS的组（MCAo + EMS组或仅EMS组），使用剪刀做一长度为10–15 mm的皮肤切口，从右耳前方1–2 mm处开始，延伸至右眼后方1–2 mm处。
      注意： 使用无菌剪刀以防止意外损伤下方的颞肌。
   3. 使用钳子牵开皮肤瓣，肉眼辨认颞肌和颅骨。
   4. 采用剪刀以分离技术钝性剥离颞肌与颅骨的连接。沿肌肉后缘向腹侧方向做一2–3 mm的肌膜切开，以利于肌肉向腹侧翻转。
   5. 在翻转的颞肌下方颅骨处，使用微型钻头进行直径约5 mm的颅骨开窗。
   6. 用镊子去除硬脑膜，暴露脑皮层表面。操作需格外小心，避免对脑组织造成意外损伤。
   7. 使用6-0 Monocryl单股缝线将颞肌背侧边缘缝合至背侧皮肤瓣的皮下组织，使其与暴露的脑皮层表面平齐。
   8. 用6-0单股缝线缝合皮肤切口。将小鼠放回笼中，监测直至从麻醉中恢复，并将其送回饲养设施。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
6-0 单丝缝合线	Ethilon	697G
用于消毒手术台面的 70% 乙醇	Walgreen
0.25% 布比卡因溶液	Midwest Vet
用于组织牵拉的钳子	Roboz
带尼龙涂层的 Doccal 缝合线	Doccal corporation Sharon MA	602145PK10Re
用于手术台面的电热垫
异氟烷麻醉剂	Piramal Critical Care Inc
异氟烷输送装置	--B6Surgivet (Isotech 4)
微型钻机	Harvard Apparatus
显微解剖镊，弯头，2 把	Piramal Critical Care Inc
小鼠血管生成检测试剂盒	R& D biotech	ARY015
持针器	Ethilon
手术显微镜	Olympus
手术台面	Olympus
手术剪	Roboz