用于小鼠模型中无创神经调节的眼科药物递送

本文内容

摘要

本视频展示了一种用于靶向神经调节的非侵入性眼科药物递送方法。该药物以滴眼液形式给药，经循环系统吸收后穿过血脑屏障，激活特定的神经元受体。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 使用滴眼液重复给予氯氮平-N-氧化物（CNO）

在给予滴眼液前3-4天，每天对每只小鼠进行3分钟的颈背部抓握操作，使其适应抓握处理。
将氯氮平-N-氧化物（CNO，5 mg）溶解于1 mL无菌0.9%生理盐水溶液中（储备液：5 mg CNO/mL）。将溶液置于4°C冰箱中保存。
实验开始前称量每只小鼠的体重，以确定所需给予的CNO剂量。每眼使用1-3 μL滴液，以达到1.0 mg CNO/kg体重的剂量。
注意：例如，一只20 g的小鼠应接受双眼滴注（每眼2 μL）。
在小鼠的非活动期（光照期）给予滴眼液，即关灯前2小时（zeitgeber时间（ZT）10）。若需在小鼠活动期（黑暗期）给予CNO，操作时应确保使用微弱红光，以便妥善处理动物。
注意：应采取预防措施，避免干扰实验动物的昼夜节律（及光/暗周期）。
1. 使用P10微量移液器吸取所需体积（1-3 μL）的CNO溶液，以实现1.0 mg CNO/kg的剂量。
  注意：每次滴眼应使用新的无菌移液器吸头。本组实验中采用双眼滴注CNO；然而，若需较低CNO浓度，也可采用单眼滴注。
2. 通过抓握颈背部固定小鼠。
3. 缓慢排出溶液，直至移液器尖端形成稳定的液滴。
4. 小心将液滴靠近小鼠角膜，直至溶液被递送。移液器尖端不得接触小鼠眼部。
5. 释放小鼠，并将其放回原有饲养笼中。
每天重复此操作，持续5天。
注意：该持续时间可根据实验需求进行调整。

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材料

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