通过大鼠模型中的迷走神经刺激减轻冻结行为

摘要

来源：Childs, J. E., 等．利用迷走神经刺激诱导与消退学习相关通路的可塑性．J. Vis. Exp. (2015)

本视频展示了在大鼠模型中通过迷走神经刺激（VNS）减轻僵直行为的方法。经过恐惧条件化的大鼠在声音再暴露期间接受迷走神经刺激，导致僵直行为减少，揭示了其治疗潜力。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 听觉恐惧条件反射

注意：该恐惧条件反射实验方案比大多数方案更为强化，因为这些实验的目的是增强消退效果。若采用较温和的恐惧条件反射，其容易被消退，则可能出现下限效应，从而掩盖这种增强作用。

1. 将动物饲养在12小时光照/12小时黑暗的循环条件下 随意 自由获取食物和水。术后恢复期间每天处理动物。
2. 设置条件化和测试装置，该装置由一个放置在隔音箱内的操作箱组成（图1C操作箱具有透明塑料壁，尺寸为20 × 20 × 20 cm，底部为不锈钢网格地板，连接至足底电击发生器。使用白色房屋灯照亮箱体，以便进行视频记录。使用9 kHz、85 dB声压级（SPL）的声音作为条件刺激（CS）。
3. 使用位于操作箱上方腔室内的数字摄像机记录行为。在行为室外的计算机上查看和监控实验过程。保存视频以供后续分析。
4. 每次实验前后用70%乙醇擦拭实验腔室，以消除嗅觉线索。
5. 对大鼠进行为期2天的恐惧条件反射训练（图 2A）。通过在第一天呈现5次声音刺激（9 kHz，85 dB，持续30 s）来确认大鼠对声音本身无先天恐惧反应，确保其僵直水平可忽略不计。
   1. 在连续两天中的每一天，进行8次声音-足底电....

结果

图1. 迷走神经刺激与实验装置。（A）用于迷走神经刺激（VNS）的装置示意图。动物通过头帽连接至刺激隔离单元，头帽引出两条铂铱合金导线，经皮下通向定制的套管电极，该电极包裹在迷走神经周围。（B）套管电极在迷走神经周围的放置位置。手术切口及暴露的迷走神经在缝合套管电极前的显微照片。（C）用于听觉恐惧条件反射实验的装置照片，动物连接至刺激器。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
聚维酮碘	Henry Schein	69066950
数码相机 - 罗技网络摄像头 C210	Logitech	B003LVZO88
铂铱合金丝	Medwire	10IR9/49T
隔离式脉冲刺激器 型号 2100	A-M Systems	720000
Sinometer 10 MHz 单通道示波器	Sinometer	CQ5010C
Extech 407730 40-130 分贝数字声级计	Extech Instruments	B000EWY67W
DSCK-C 双输出随机电击器	Kinder Scientific Co