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直接重建颈神经以恢复小鼠前肢运动功能

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2025年8月29日

本文内容

摘要

来源:Gao, Z., et al. 一种通过脊前通路进行神经跨接移植术直接吻合的小鼠模型。 J. Vis. Exp. (2021)。

本视频演示了通过直接颈神经再连接恢复小鼠前肢运动功能的方法。实验开始时,小鼠因右侧C7神经在其神经根处被切断而导致右前肢瘫痪。随后,将左侧C7神经切断,经椎前通路引导至右侧,并与右侧C7神经进行缝合。最后,清理手术部位并关闭切口。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

选用8周龄的雄性C57BL/6N小鼠。

1. 术前准备

  1. 确保备有足够的经高压灭菌的外科手术器械、设备、镇痛药物和麻醉药物。
  2. 确保手术台上留有足够的操作空间。
  3. 使用尿布包裹的定制外科泡沫板作为小鼠手术床,准备手术台。用医用胶带将加热垫固定在泡沫板上,并用无菌纱布覆盖加热垫。
  4. 使用血管钳弯曲一根 acupuncture 针,将其对折,再将对折后的针尖弯成钩状,制成牵开器。在 acupuncture 针末端固定一条橡胶条,并用图钉将橡胶条的末端固定在泡沫板上。
  5. 校准体视显微镜;选择具有足够工作距离的体视显微镜。用灭菌的铝箔覆盖变焦/聚焦按钮,以便术者在手术过程中进行调节。将灭菌铝箔覆盖在变焦/聚焦按钮上,使术者能够戴无菌手套操作。

2. 小鼠麻醉与准备

  1. 称重小鼠,并根据其体重进行麻醉(异氟烷 3%)。通过夹捏其足垫间区域以确认麻醉深度,若小鼠无反应,则表明麻醉充分。整个手术过程中应维持适当的麻醉深度(异氟烷 1%)。
  2. 双侧眼球涂抹眼膏,以防止手术期间角膜受到刺激或干燥。
  3. 使用自动剃毛器剃除颈部和胸部的毛发,准备手术区域。清除并清理松散的毛发。
  4. 将小鼠仰卧置于覆盖无菌纱布的加热垫上。整个手术过程中维持小鼠体温在 37 °....

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
1 mL 注射器KDLK-20200808
12-0 尼龙缝线Chenghe20082
5-0 编织丝线MERSILK,ETHICONQK312
75% 乙醇GENERAL-REAGENTP1762077
针灸针Chengzhen190420用于制作牵开器
自动剃毛器CodosCHC-332
C57BL/6N 小鼠SLAC laboratory (上海)C57BL/6Slac
电凝器Gutta CutterSD-GG01
红霉素眼膏白云山H1007
碘伏消毒液Lionser20190220
医用胶带Transpore,3M1527C-0
显微持针器ChengheX006-202003
显微镊子ChengheB001-201908
显微剪刀66VT1911-2S276
手术显微镜OLYMPUSSZX7
眼科剪刀ChengheX041D1251
戊巴比妥钠Sigma20170608
塑料输液管KDLC-20191225
无菌生理盐水KLL121021109
血管钳金钟J31020
加热垫RWD69027

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