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方法文章

在小鼠胶质母细胞瘤模型中治疗性纳米颗粒的静脉注射

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2025年8月29日

本文内容

摘要

来源:Kim, B. D.,.在胶质母细胞瘤动物模型中通过纳米颗粒递送寡核苷酸载荷。J. Vis. Exp. (2024)

本视频展示了在患有胶质母细胞瘤的小鼠中进行治疗性纳米颗粒的静脉注射。该方法能够实现跨越血脑屏障的靶向递送,并支持非侵入性成像,以评估纳米颗粒在脑肿瘤中的生物分布及治疗效果。

方案

所有涉及动物模型的操作均已被当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. MN-anti-miR10b 给药

注意: 在本研究中,注射在植入后第7天开始,每周进行一次,持续6周,但该相同方案也可用于不同的注射频率。

  1. 称重小鼠,并计算需给予小鼠的MN(磁性纳米颗粒)-anti-miR10b体积。在小鼠胶质母细胞瘤(GBM)模型中,MN-anti-miR10b的给药剂量为20 mg Fe(铁)/kg。例如,一只20 g的小鼠需接受80 µL浓度为5 mg Fe/mL的MN-anti-miR10b。对照组小鼠则接受与该剂量方案一致的等体积磷酸盐缓冲盐水(PBS)。
  2. 用28G注射器抽取MN-anti-miR10b药液,并确保注射液中无气泡。
  3. 将小鼠置于诱导箱中,以2%-4%异氟烷诱导麻醉,维持麻醉浓度为1.5%-2%,气体流速为1.5 L/min。将小鼠转移至鼻罩,并持续给予麻醉。检查麻醉深度,并涂抹兽用眼膏。
  4. 用70%异丙醇擦拭尾部进行消毒,并待多余酒精挥发干燥。
  5. 旋转尾部,使尾侧静脉位于尾部上方。然后对准静脉插入针头,并通过回抽活塞建立负压。
  6. 继续插入针头直至血液进入注射器,表明已成功进入静脉。
  7. 缓慢注射MN-anti-miR10b,注射完成后拔出针头。用纱布对注射部位施加压力,直至出血停止。
  8. 将小鼠从鼻罩移开。持续监测小鼠,直至其完全恢复并能自主活动。
    注意:纳米颗粒的推注给药可能引起呼吸窘迫。需密切监测小鼠状态,若出现呼吸窘迫迹象,应立即实施轻柔胸部按压。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
无胸腺裸鼠“J:NU”杰克逊实验室RRID:IMSR_JAX:007850免疫缺陷小鼠模型
70% 异丙醇擦拭巾CardinalMW-APL用于肿瘤移植和尾静脉注射的局部消毒擦拭巾
异氟烷Covetrus11695067772麻醉剂
异氟烷挥发器SOMNI ScientificVS6002麻醉装置
胰岛素注射器 1CC 29G X 1/2"贝克顿·迪金森324704用于D-荧光素注射和纳米颗粒尾静脉注射的注射器

标签

RNA 10b