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天蓝色链霉菌野生型与突变株的表型比较

2025年9月26日

本文内容

摘要

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来源:Bennett, J. A., et al.链霉菌发育突变体的显微观察与评估。J. Vis. Exp. (2018)

本视频展示了野生型和突变型Streptomyces coelicolor菌株的培养及表型比较。视频介绍了减少自发突变、防止交叉污染以及通过正确涂布技术促进细菌生长的操作步骤。最后,通过菌落形态的视觉差异,阐明突变对细菌菌株发育造成的影响。

方案

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1. 准备仪器、培养基、溶液和培养皿

1. 将牙签放入50 mL烧杯中,用铝箔覆盖后进行高压灭菌,以保持其无菌状态。

2. 在高压灭菌器中对所有将要使用的干燥物品(枪头、玻璃棒、玻璃器皿等)进行灭菌。

注意: 警告!请遵循所使用高压灭菌器型号的所有安全操作说明。高压灭菌器存在爆炸风险,可能导致蒸汽烫伤,以及接触高温表面、材料和培养基而造成伤害。

3. 准备用于培养菌种的MS琼脂(甘露醇大豆粉琼脂(SFM))。

1. 向1 L的烧瓶中加入5 g大豆粉和5 g琼脂。

2. 将5 g甘露醇溶解于250 mL自来水中,加入含有大豆粉和琼脂的烧瓶中。

3. 在烧瓶口添加泡沫塞和铝箔,于121 °C、15 psi条件下高压灭菌至少30分钟。

注意:该培养基极易沸腾溢出。请使用容量至少为实际MS琼脂体积四倍的锥形瓶进行高压灭菌。在安全注意事项相似的....

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结果

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琼脂平板上的真菌生长模式;遗传变异研究;微生物学实验示意图。

图1:显示S. coelicolor宏观菌落表型的代表性琼脂平板照片。该琼脂平板展示了野生型S. coelicolor菌株MT1110(WT)气生菌丝的毛状灰白色外观,并与具有不同发育表型的多种随机转座子插入突变体进行对比。突变体或缺.......

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
无菌水GeneMateG-3250-1L
牙签(扁平型)Target081-22-1957
移液器吸头(10 mL)GeneMateP-1240-10
移液器吸头(200 mL)GeneMateP-1240-200Y
移液器吸头(1,250 mL)GeneMateP-1240-1250
棉签Fisherbrand23-400-124
大豆粉Bob's Red Mill1516C164
D-甘露醇Sigma-AldrichM4125-1KG
琼脂Sigma-AldrichA1296-1KG
100% 甘油VWR amresco life science0854-1L
0.8% NaCl(生理盐水)Sigma-AldrichSLBB9000V
培养皿Sigma-AldrichP5856-500EA
盖玻片 #1.5Thomas Scientific64-0721
载玻片Carolina63-2010
高压灭菌器Tuttnauer2540E
镊子Carolina Biological624504
本生灯Carolina Biological706706
甲醇Sigma-Aldrich34860-1L-R
PBS(磷酸盐缓冲液)Sigma-AldrichP4417-50TAB
100 mL 烧杯Pyrex USA1000-T
1 L 烧杯Carolina Biological721253

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