使用氧化还原染料补充半固体培养基的细菌运动可视化

摘要

资料来源： Chu， W. 和 Zhuang， X. 基于颜色反应可视化细菌运动。 J. Vis. Exp. （2022年）

该视频演示了一种基于氧化还原染料的半固体琼脂测定法，用于通过视觉区分运动菌株和非运动菌株来评估细菌运动性。

方案

菌株

注意： 从水生环境中分离出80株菌株，并使用自动细菌鉴定仪器进行鉴定（见 材料表），包括 大肠杆菌、 铜绿假单胞菌、 沙门氏菌 属、 弧菌 属、 肺炎克雷伯菌 和 嗜水气单胞 菌（表1）。 金黄色葡萄球菌 （见 材料表）用作阴性非运动对照;大 肠杆菌、 铜绿假单胞菌和 鼠伤寒沙门氏菌 （见 材料表）被用作阳性对照菌株。

1. 确定用于运动分析的测试细菌菌株。
2. 包括阴性非运动对照和运动阳性对照菌株。

TTC 增强的细菌运动观察

1. 从琼脂平板中挑选测试细菌的单个菌落，并通过用接种针刺穿它们将它们接种到含有TTC（2,3,5-三苯基四唑氯化物）的半固体培养基中。
2. 将试管在培养箱中以37°C培养24-48小时以观察结果。
3. 观察生长状态：如果只有穿刺线是红色的，则将细菌描述为非运动 （-）。如果红色沿穿刺线轻轻向外扩散，则将细菌描述为运动 （+）。

表1：细菌运动的比较。

应变		含0.4%琼脂的半固体培养基		含有 0.4% 琼脂和 0.005% TTC 的半固体培养基
		24 小时	48 小时	24 小时	48 小时
铜绿假单胞菌 ATCC27853		+	+	+	+
大肠杆菌 ATCC25922		+	+	+	+
鼠伤寒沙门氏菌 ATCC14028		+	+	+	+
金黄色葡萄球菌 ATCC25923		-	-	-	-
大肠杆菌 （15）		12	14	13	14
沙门氏菌 属 （8）		7	8	8	8
嗜水 A. hydrophila （20）		18	20	20	20
弧菌 属 （8）		7	8	8	8
铜绿假单胞菌 （24）		18	20	22	23
肺炎克雷伯菌 （5）		-5	-5	-5	-5
数字表示阳性菌株 （+） 和阴性染色剂 （-） 的数量。

材料