用于宿主-病原体相互作用研究的Streptococcus mitis培养物制备

摘要

来源：Naji, A., 等. 研究缓症链球菌群在秀丽隐杆线虫中引起的氧化应激.J. Vis. Exp. (2019).

本视频演示了在微需氧条件下使用含酵母提取物的托德-休伊特（Todd-Hewitt Yeast Extract，THY）琼脂培养基培养Streptococcus mitis的方法，以制备用于宿主-病原体相互作用研究的细菌培养物。

方案

1. 感染用米提斯链球菌群的制备

1. 将目标链球菌菌株划线接种于100 mm × 15 mm的THY（Todd-Hewitt酵母提取物）琼脂平板上（若平板储存于4 °C，接种前需将平板预热至37 °C），然后将平板置于烛缸中，于37 °C培养过夜（约18 h），以提供链球菌生长所需的微需氧环境（划线后的平板可在4 °C保存一周）。
2. 如需扩增链球菌的临床分离株，应使用胰蛋白酶大豆血琼脂平板。将平板置于烛缸中，于37 °C培养过夜（约18 h）。
3. 次日，从烛缸中取出平板，用无菌接种环挑取单个菌落，接种至含有2 mL THY液体培养基的15 mL无菌锥形管中。扩增链球菌临床分离株时，需在THY液体培养基中添加5% v/v的绵羊血。盖紧管盖，在37 °C静置培养。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
BD Bacto Todd Hewitt 肉汤	Fisher Scientific	DF0492-17-6
酵母提取物	Fisher Scientific	BP1422-500
一次性聚苯乙烯血清移液管 10 mL	Fisher Scientific	07-200-574
一次性聚苯乙烯血清移液管 25 mL	Fisher Scientific	07-200-575
Falcon 细菌培养用带盖培养皿（35 mm × 10 mm）	Fisher Scientific	08-757-100A
带透明盖培养皿（60 mm × 15 mm）	Fisher Scientific	FB0875713A
带透明盖培养皿（100 mm × 15 mm）	Fisher Scientific	FB0875712
S. mitis ATCC 49456
琼脂