在无氧条件下制备厌氧污泥培养物

摘要

来源：Wagner, A. O., et al., 严格厌氧/缺氧条件下微生物培养的培养基制备。 J. Vis. Exp. (2019)

本视频展示了在严格控制的无氧条件下，使用无氧污泥制备和接种厌氧培养物的方法。

方案

接种培养基

1. 从厌氧消化器中制备接种物。
   1. 向烧瓶中加入 400 mL 蒸馏水并煮沸。
   2. 持续用 N₂ 冲洗顶空，冷却至 < 30 °C。
   3. 加入约 100 g 来自厌氧消化器的污泥。
      注意：避免污泥与氧气过度接触。
   4. 记录所加污泥的精确质量，以准确计算稀释倍数。
   5. 用 N₂ 置换烧瓶顶空，并用丁基橡胶隔垫密封。
   6. 在 120 rpm 条件下振荡 30 分钟。
2. 使用注射器和套管吸取 5 mL 接种物，并注入已准备好的血清瓶中。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
培养瓶（120 mL，N20）	Ochs, 德国	102046
丁基橡胶隔垫（N20）	Ochs, 德国	102049
铝盖（N20）	Ochs, 德国	102050
N₂ 气体	Messer, 奥地利		纯度 5.0
注射器 + 套管	多种
压盖器	Ochs, 德国	102051
去盖器	Ochs, 德国	102052
GC2010	Shimadzu