组织学和血液学分析以评估蒸 头芽孢杆 菌在热应激大鼠中的效果

摘要

来源：Sorokulova， I. 等人。Bacillus subtilis菌株对大鼠热应激不良反应的预防。J. Vis. Exp. （2016）

本视频展示了用于评估暴露于热应激大鼠中枯 萎芽杆 菌保护作用的组织学和血液显微镜分析。

方案

1. 组织学分析

1. 通过手术从每只实验大鼠身上取出小肠样本。将样品固定在布因定画液中，嵌入石蜡中，按照标准程序制备6微米切片和染色切片，使用赫马基林和伊欧红。
2. 使用高分辨率显微镜系统测量每个样品的肠道绒毛高度和黏膜总厚度（放大倍率为100倍）。从每只大鼠身上分析4个样本，并对每个样本进行至少二十次测量。快速结果以微米计。

2. 高分辨率血液光学显微镜

1. 使用震动隔离平台作为显微镜系统、摄像机和计算机的基础，以记录实时图像。使用理查森幻灯片校准测试图像。
2. 将每只大鼠新鲜抽取的7微升血液放在玻片上，盖上盖纸，拍摄并记录10帧图像，每个样本中分别为72×53.3^微米（ 放大倍率1700倍）。
3. 使用提供高分辨率直视光学图像的软件实时测量囊泡浓度。每个实验条件至少检查20帧图像。

材料