Vibrio cholerae 生物型分化的 Voges-Proskauer 试验

摘要

来源： Brumfield, K. D., 等用于维持和区分不同生物型的实验室技术 Vibrio cholerae 临床与环境分离株 视频实验杂志 (2017).

本视频演示了伏格斯-普罗科菲耶夫（Voges-Proskauer，VP）试验，用于区分霍乱弧菌（Vibrio cholerae）的三种生物型：古典生物型、野生型埃尔托生物型和埃尔托变异型。每种培养物均接种于含葡萄糖的培养基中，经培养后加入α-萘酚和氢氧化钾，以检测乙酰甲基甲醇（acetoin）的存在。仅在野生型埃尔托生物型中观察到粉红色至红色的显色反应，表明VP试验阳性，从而将其与古典型和变异型区分开来。

方案

Voges-Proskauer（VP）试验

1. 在液体LB肉汤中制备过夜培养物。
2. 用移液器将10 μL预先制备的过夜培养物加入盛有4 mL甲基红-伏普（MR-VP）肉汤的无菌培养管中，接种MR-VP肉汤，并在37 °C、225 rpm条件下于摇床培养箱中振荡培养12至16小时。
3. 分别向无菌培养管中MR-VP过夜培养物的1 mL等分试样中加入150 μL 5% (w/v) α-萘酚和50 μL 40% (w/v) KOH。
4. 短暂涡旋混匀，室温静置最多4小时，直至出现颜色变化。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
MR-VP 培养基	Difco	216300	http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=216300&parentCategory=&parentCategoryName=&categoryId=&categoryName=&searchUrl=%2FsearchResults%3Fkeyword%3Dmr-vp%2Bmedium%26typeOfSearch%3DproductSearch
KOH	Fisher Scientific	P250-500	https://www.fishersci.com/shop/products/potassium-hydroxide-pellets-certified-acs-fisher-chemical-5/p250500?searchHijack=true&searchTerm=P250500&searchType=RAPID
α-萘酚	MP Biomedicals	204189	http://www.mpbio.com/product.php?pid=05204189