使用微板读器进行细菌生长的精确高通量分析

Abstract

来源： 黑川M. 等人。细菌生长的高精度高通量分析。 J. Vis. Exp. （2017年）

本视频演示了利用微板读取器高通量定量细菌生长的方法。它概述了培养准备、光学密度测量和生长动态分析的步骤。

Protocol

1. 增长的实时记录
   1. 绘制96孔板象形图（8×12表）以显示接种培养样本在96孔板上的位置。打印出表格，作为实验参考。
      注意： 位于微板边缘的孔应仅含有空白介质，因为会进行蒸发。
   2. 将一个消毒过的96孔平底微板带盖子、P-1000、1000微升移液器头、P-200、200微升移液器头、数个1.5毫升微管、一个8通道移液器、一个灭菌试剂储液箱、室温M63和大 肠杆 甘油液放在干净的工作台上。
   3. 向试剂储液槽中加入约25毫升M63。使用该储液槽进行以下所有步骤。
   4. 在微管中加入900微升M63，准备进行串行稀释。
   5. 在室温下解冻甘油高汤。向解冻后的甘油汤中加入900微升M63，并进行漩涡。这导致原始甘油库存稀释了10倍。
   6. 将100微升的10倍稀释液转移到另一根含有900微升M63和漩涡的微管上。这导致了100倍的稀释。
   7. 重复步骤1.6，直到达到所需的稀释数量。
   8. 使用8通道移液器（P-200）在微板边缘注入200微升M63。
      注意： 这些井可以用作空白井。
   9. 根据参考表（步骤1.1），将每个稀释样品在步骤1.4-1.7中装入200微升到微板孔中。在装载前对稀释样品进行涡旋，并将同一样品在板上不同位置的多个孔中装入。
   10. 将96孔微板放....

Materials