小鼠腹腔注射细菌脂多糖以研究全身免疫反应

摘要

来源：Radulovic, K., et al. 向小鼠注射脂多糖以模拟肠道屏障受损后微生物来源产物的进入。 J. Vis. Exp. (2018)

本视频演示了将脂多糖（LPS）经腹腔注射至小鼠体内以诱导全身性炎症的逐步操作流程。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 小鼠腹腔注射脂多糖（LPS）
   1. 在超净工作台中，使用30 G针头的0.5 mL注射器吸取LPS工作液。
   2. 称量雌性C57Bl/6小鼠（6至10周龄），并计算需注射的LPS剂量：每克体重10 µL（2 µg）。
      注意：例如，若小鼠体重为20 g，则需注射20 g × 10 µL = 200 µL的LPS工作液。
   3. 轻柔但牢固地抓握小鼠，用一只手固定动物，确保其呼吸正常，且在固定过程中无法扭转或翻动身体。
   4. 将小鼠鼻部略微朝向地面，以暴露腹部注射区域。定位腹部中线，并选择中线左侧或右侧下腹部作为注射部位。对照组小鼠则腹腔注射（i.p.）磷酸盐缓冲液（PBS）代替LPS。
   5. 用另一只手将相应体积（按步骤1.2计算所得）的LPS工作液注入腹腔。确保针头已进入腹膜腔，避免误注入腹肌层。但针头不宜插入过深，以防损伤该区域内的内脏器官。
   6. 将动物小心放回饲养笼，每笼最多饲养5只小鼠。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
LPS Escherichia coli O111:B4	Invivogen，美国加利福尼亚州圣地亚哥	tlrl-eblps
Omnican 50 一次性胰岛素注射器	B. Braun Melsungen，德国梅尔松根	9151125