斑马鱼胚胎感染后宿主-病原体相互作用的活体成像 脓肿分枝杆菌

摘要

来源： 贝尔努特，A. 等解析与成像病原性及索状结构 脓肿分枝杆菌 在斑马鱼胚胎中。 视频实验杂志 (2015)

本视频展示了一种利用表达荧光巨噬细胞并感染了荧光标记病原体的转基因斑马鱼胚胎的实验方案 脓肿分枝杆菌 粗糙菌株用于观察宿主-病原体相互作用。该方法揭示了胞外索状结构如何介导免疫逃逸，促进细菌存活及宿主细胞损伤。

方案

1. 活体成像 M. abscessus 感染

1. 在进行落射荧光显微镜观察前，将三卡因麻醉的胚胎置于35 mm培养皿中的1%低熔点琼脂糖中固定。进行倒置共聚焦显微镜观察时使用玻璃底培养皿，进行正置共聚焦显微镜观察时使用单腔凹面载玻片。将胚胎调整至所需位置后，用含三卡因的养鱼用水覆盖已凝固的琼脂糖。
2. 使用落射荧光显微镜配合10 X物镜，对整个胚胎进行荧光信号的连续采集及透射光图像的获取。或者，使用配备40X或63X物镜的共聚焦显微镜，观察感染后免疫细胞的活动情况。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
低熔点琼脂糖	Sigma-Aldrich
氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐（Tricaine）	Sigma-Aldrich	A5040