建立阴道B族链球菌小鼠模型 链球菌 感染

摘要

来源： 帕特拉斯，K. A.，多兰，K. S. 一种B族链球菌感染的小鼠模型 链球菌 阴道定植 视频实验杂志 (2016)

本视频展示了经激素处理的雌性小鼠的准备及其阴道接种B族链球菌的过程 链球菌 用于模拟感染。本文详细说明了如何培养和制备细菌，将接种物注入阴道腔，以及确保感染成功的方法。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. B族链球菌阴道接种 链球菌 （GBS）

1. 接种前一天，在37 °C条件下，于Todd Hewitt肉汤（THB）中培养5 ml目标GBS菌株（如A909（Ia血清型））的过夜液体培养物。
2. 将GBS过夜培养物按1:10体积比转接到新鲜THB中，于37 °C继续培养。使细菌生长至对数中期（OD₆₀₀ = 0.4–0.5）。

注意：根据GBS菌株的不同，此步骤通常需要2 - 3小时。

3. 将菌种转接到无菌的15 ml圆锥形离心管中，在3,000 × g条件下离心5分钟以收集菌体。吸除上清液。用200 µl无菌磷酸盐缓冲液（PBS）重悬菌体沉淀。
4. 取重悬后的菌液，在新的5 ml培养管中，加入3–5 ml PBS（每10只小鼠使用1 ml），调节菌液浓度至OD₆₀₀ = 0.4。此时菌液浓度约为1 × 10⁸菌落形成单位（CFU）/ml。将菌液转移至新的15 ml圆锥形离心管中，在3,000 × g条件下离心5分钟，重新收集菌体。吸除上清液。
5. 用PBS将菌体沉淀重悬至原体积的1/10。....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
200 μl 凝胶加样移液器吸头	USA Scientific	1252-0610
Todd Hewitt 肉汤	Hardy Diagnostics	7161C
1×杜尔贝科氏磷酸盐缓冲盐溶液	Corning	21-031-CV