B族链球菌定量检测 链球菌 通过拭子取样和显色培养对小鼠阴道腔进行接种

摘要

来源： Patras, K. A. & 多兰，K. S. 一种B族链球菌感染的小鼠模型 链球菌 阴道定植 视频实验杂志 (2016)

本视频展示了阴道B族链球菌的定量方法 链球菌 使用拭子采样和显色培养法在小鼠模型中检测B族链球菌（GBS）载量。本文概述了样本采集、接种培养和平板菌落计数的步骤，以定量小鼠阴道腔内的GBS载量。

方案

所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医评审委员会的审核。

1. 擦拭阴道腔以定量 GBS 载量

1. 为每只小鼠准备一个1.5 ml的微量离心管，加入100 µl磷酸盐缓冲液（PBS）。在采样前，先将拭子浸入PBS中预湿。
2. 固定小鼠，将拭子插入阴道腔内10 mm处。轻轻顺时针旋转拭子4次，再逆时针旋转4次，同时对阴道壁施加轻微压力。
3. 将拭子转移至含有100 µl PBS的1.5 ml微量离心管中。接种前，将微量离心管涡旋振荡约15秒，以使细菌从拭子上释放。用PBS对每个样本进行系列稀释，并取20 µl稀释液（1:10至1:10,000）接种于按制造商说明制备的鉴别培养基琼脂平板上。将平板在37 °C下孵育24小时。B族链球菌（Group B Streptococcus，GBS）菌落呈亮粉色或紫红色。其他内源性菌群则被抑制，或呈现为蓝色、白色或灰色菌落。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
尿道生殖道无菌海藻酸钙拭子	Puritan	25-801 A 50
CHROMagar B族链球菌培养基	DRG International	SB282
杜尔贝科磷酸盐缓冲液（1×）	Corning	21-031-CV