制备用于噬菌体感染的土壤细菌培养物

摘要

来源：Cross, T., 等，一种从土壤样品分离物中分离节杆菌噬菌体物种的优化富集技术。J. Vis. Exp.(2015)

本视频演示了用于噬菌体生产的细菌培养物的制备过程。内容包括将土壤细菌接种到带挡板的锥形瓶中，通过通气和振荡促进细菌均匀生长，并利用光密度测量监测细胞密度。当培养物达到最佳生长阶段时，即可用于高效地进行噬菌体生产。

方案

噬菌体分离用Arthrobacter细胞的制备

• 将接种于LB琼脂平板上的Arthrobacter sp. KY3901菌落置于30 °C培养2–3天。挑取单菌落，用无菌接种环将其接种至装有250 ml LB液体培养基的带挡板三角摇瓶中，在30 °C、225 rpm条件下于摇床中培养。
• 培养约24小时，获得处于对数生长后期/稳定期初期的菌体，用于噬菌体感染实验。密切监测细菌生长状态，避免菌体进入稳定期中后期。
  注意：进行噬菌体分离与纯化操作时，菌液的光密度OD₆₀₀应维持在0.5–0.7之间。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
LB 肉汤粉末	Fisher	BP9722-2
颗粒状琼脂	Fisher	BP1423-2
Eppendorf 管	Fisher	05-408-129
5 ml 单独刻度吸管	Fisher	13-678-11D
50 ml 锥形管	Fisher	76002844
15 ml 锥形管	Fisher	76002845
10 ml 单独刻度吸管	Fisher	13-676-10J
25 ml 单独刻度吸管	Fisher	13-676-10K