从小鼠尾部提取基因组DNA

方案

1. 剪取尾尖组织（3 mm）并标记耳朵。
2. 加入 720 ml STE 缓冲液和 30 ml 蛋白酶 K（10 mg/ml 储存液）。
3. 在 55°C 加热块中孵育，每小时涡旋振荡 10 秒（最高速度），持续 3 小时。
4. 在 70°C 灭活蛋白酶 K，持续 5 分钟。
5. 冰上淬灭 5 分钟。
6. 将尾部 DNA 离心 10 分钟（最高速度）。
7. 将上清液倾入新管中，管内预先加入 720 ml 异丙醇。 
8. 通过倒置离心管或涡旋振荡使 DNA 沉淀。
9. 以最高速度离心 5 分钟使 DNA 沉淀。 弃去上清液。
10. 用 70% 乙醇洗涤沉淀。
11. 以最高速度离心基因组 DNA 5 分钟。 弃去上清液。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
STE	缓冲液			100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O
TE	缓冲液			100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl