鼠标膀胱壁注射液

Summary

小鼠膀胱壁注射液是一种有用的方法原位研究膀胱干细胞和癌症生物学。这种微妙的显微外科方法可以掌握仔细的技术和实践。

Abstract

小鼠膀胱壁注射原位研究，包括干细胞，平滑肌，和癌症生物学膀胱现象，是一种有用的技术。开始前注射，手术区必须用肥皂和水和消毒液清洗。在使用前和每个动物之间的手术设备必须消毒。每个鼠标放在吸入异氟醚麻醉下（2-5％的诱导，维持1-3％）和膀胱暴露中线腹部切口，用剪刀。如果膀胱满了，这是部分之间的两根手指轻轻挤压解压。 intramurally利益的细胞悬液注入使用29或30号针头和注射器1毫升或更小的圆顶膀胱壁。伤口闭合伤口剪辑，并允许恢复变暖垫鼠标。膀胱壁注射液是一种微妙的显微外科技术，可以掌握与实践。

Protocol

1。鼠标膀胱壁注射液

小鼠品系，年龄和性别的选择是出于实验需要。我们用8至12周龄小鼠，因为这是一个窗口前的免疫成熟到衰老。作为一般指引，老鼠应该到达至少一个星期前，实验操作，以避免应力引起的混杂因素。

1. 用肥皂和水清洁手术台面。
2. CIDE挥笔或杀菌湿巾擦拭手术台面。
3. 前高压灭菌干净的手术器械，手术中使用。
4. 此外，热珠灭菌消毒的手术器械之前使用，以及在手术过程中的动物之间。
5. 清洁100μL，汉密尔顿注射器和29或30号（1 / 2英寸长）针头反复抽吸和无水酒精注射，第一次使用前，在最后的外科手术结束。
6. 清洗和冲洗消毒磷酸盐缓冲生理盐水每只动物之间的汉密尔顿注射器。
7. 麻醉小鼠放置在2-5％之间，异氟醚，异氟醚诱导室。
8. 一旦达到全身麻醉室和放置在一个温暖的垫仰卧位，请从鼠标的下方，以帮助维持正常体温。
9. 实现维护麻醉动物的口鼻部放置在一个喷嘴，含挥发异氟醚（滴定从1-3％，要保持适当的麻醉）。
10. 剃须与快船队的腹部皮肤。
11. 使用一次性无菌手术悬垂覆盖，以防止在手术过程中粪便污染肛门。
12. 使用第二个一次性无菌手术悬垂覆盖手术野（小腹）。
13. 准备三件浸泡优碘，纱布，腹部。重复此步骤三次。
14. 为解剖显微镜的放大倍率，使较低的中线腹部切口，用剪刀。 ....

Discussion

小鼠膀胱壁注射允许为特定的细胞植入到膀胱壁的定义领域。这项技术已广泛应用，为膀胱癌，平滑肌，和干细胞生物学的小鼠模型。根据定义，小鼠膀胱壁注射液有利于引入膀胱癌或干细胞原位位置，所以可以在一个有关生理解剖背景下的研究，他们的生长和分化。事实上，Dinney等。首次描述了这种技术，以研究在¹裸鼠人膀胱癌裸鼠移植瘤原位。

虽然一直在膀胱癌和干细胞研究^1-9利用的膀胱壁注射技术，它不是唯一的方法使用。许多科学家都试图植入裸鼠皮下，腹腔或静脉注射，膀胱癌细胞，但这些模型都没有展出可预见的致瘤性和转移性，允许选择在体内的^细胞株11-13属性。此外，还有一些依赖于经尿道接种的有^14个肿瘤细胞的小鼠膀胱癌模型。一个领先的膀胱癌变假定的理论认为，肿瘤的扩散"播种"的正常尿路上皮癌细胞发生尿路尿流到棚。从这个角度来看，接种经尿道，导致尿路上皮管腔侧膀胱癌细胞暴露，可能比膀胱壁注射有关的生理。然而，经尿道注射不能直接细胞植入膀胱内。

相比之下.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
试剂名称	公司	目录编号
异氟醚（Aerrane）	巴克斯特	NDC的10019-773-60
29或30表针	汉密尔顿	7803-06或7803-07
100微升注射器	汉密尔顿	7656-01