使用热激法将质粒DNA转化至大肠杆菌

摘要

使用热激法将质粒DNA转化至大肠杆菌（E. coli）是分子生物学的一项基本技术，其过程包括将外源质粒或连接产物导入细菌细胞。本视频方案描述了使用Genlantis公司提供的市售化学感受态细菌进行转化的传统方法。将化学感受态细菌与DNA的混合物在冰上短暂孵育后，置于42°C下45秒（热激），随后立即放回冰中。加入SOC培养基后，转化后的细胞在37°C下振荡孵育30分钟。为了确保无论转化效率高低均能获得菌落，将两种不同量的转化菌液分别涂布于平板。该传统方案可成功用于转化大多数市售的感受态细菌。此外，Genlantis公司的TurboCells还可用于一种新颖的3分钟快速转化方案，该方法详见产品说明书。