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方法文章

通过隐静脉采血和心脏穿刺法从大鼠采血

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DOI:

10.3791/266

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2007年8月23日

本文内容

摘要

在大量研究中都需要进行采血,例如用于研究化合物的药代动力学特征。本文中,我们演示了两种从大鼠采血的技术:从隐静脉采血或经心脏穿刺采血。

摘要

从啮齿类动物采血对于大量体外和体内研究都是必需的。啮齿类动物的采血部位有很多:眶后窦、颈静脉、上颌静脉、隐静脉和心脏。每种技术都有其优缺点,且某些技术在一些国家已不再被批准使用(例如,荷兰已不再允许使用眶后窦采血)。关于不同采血技术的讨论可参见文献1-3。 本文中,我们介绍两种从大鼠采血的技术,每种技术均有其特定的应用场景。

正确操作时,从隐静脉采血对动物造成的应激极小,且无需麻醉。该技术可用于多次采集少量血液,例如药代动力学研究4,5、血浆化学分析或血细胞计数6所需样本。

心脏穿刺可从单只动物采集大量血液(可从一只150克重的大鼠采集多达10毫升血液)。因此,当从隐静脉采血无法获得足够样本量时,该技术作为终末性操作非常有用。当需要从特定品系的大鼠获取足量血清以在体外培养T淋巴细胞系时,我们采用心脏穿刺技术4-9。

方案

通过隐静脉和心脏穿刺法从大鼠采血

注意:所有操作步骤必须获得您所在机构动物护理与使用委员会的批准。

1. 从隐静脉采血

  1. 此操作无需麻醉,需要两人协作完成,一人固定大鼠,另一人进行采血。
  2. 用毛巾卷成锥形或佩戴啮齿类动物操作手套固定大鼠,使其中一条后肢暴露。
  3. 使用电动剃毛器剃除腿部后侧的毛发,直至隐静脉清晰可见。剃除足够大的区域,确保穿刺部位不接触毛发。可使用少量无香味的手部润肤露,防止未剃除的毛发进入穿刺区域。
  4. 在腿部根部施加压迫点,使隐静脉隆起(类似于从人类或大型动物采血时使用止血带的方法)。使用20G针头穿刺静脉,并用微量采血管收集流出的血液。通过腿部的轻微挤压动作可帮助获得更多血液。采集足够血液后,用干净的敷料按压穿刺部位以止血。

2. 通过心脏穿刺采血

  1. 该操作需要使用麻醉剂,且为终末性操作。心脏穿刺结束后必须立即对动物实施安乐死。
  2. 准备一支带有23G1针头的5 ml注射器。
  3. 对大鼠进行深度麻醉,并通过观察其是否缺乏自主运动、呼吸缓慢以及对刺激(如夹捏脚趾)无反应来确认麻醉效果。为确保麻醉持续有效,操作过程中可在大鼠鼻部放置一个内含浸有挥发性麻醉剂的纸巾的注射器筒。
  4. 将大鼠仰卧放置,头部背....

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讨论

从隐静脉采血是一种无需麻醉即可获取少量血液的便捷方法。如果需要多次采样,请查阅相关规定,确保从一只大鼠采集的血液量不超过允许限度。

通过心脏穿刺采血是一种获取大量血液的便捷方法,但该操作为终末性手术,采血结束后必须对动物实施安乐死。

这些技术(如同所有在活体动物上进行的技术一样)应首先在兽医或兽医技术人员的监督下进行,他们能够评估动物是否得到妥善处理,并确保动物不会遭受不必要的疼痛和/或痛苦。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
20G 1/2 针头工具BD Biosciences305176用于穿刺隐静脉
Microvette 300工具Sarstedt Ltd20.1308.100用于采集隐静脉血液
电动剃毛器工具Braintree Scientific, Inc.CLP-32130
23G 1 针头工具BD Biosciences305145用于心脏穿刺
5 ml 塑料注射器,滑动接头工具Fisher Scientific14-826-12用于心脏穿刺

参考文献

  1. Van Herck, H., Baumans, V., Brandt, C. J. W. M., Boere, H. A. G., Hesp, A. P. M., Van Lith, H. A., Schurink, M., Beynen, A. C. Blood sampling from the retro-orbital plexus, the saphenous vein and the tail vein in rats: comparative effects on selected behavioural and blood variables. Laboratory Animals. 35, 131-139 (2001).
  2. Luzzi, M., Skoumbourdis, E., Baumans, V., Cont....

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重印与许可

标签

采血大鼠血液采集血液取样终末性操作药代动力学研究血清采集T淋巴细胞系血容量