一种利用放射性标记抗体在小鼠模型中通过活体PET成像检测肿瘤的技术

摘要

来源：Zeglis, B. M., 等 抗体的生物偶联与⁸⁹Zr-DFO标记的放射性合成。 J. Vis. Exp. (2015)。

本视频展示了一种利用放射性免疫偶联物的技術 体内 在小鼠模型中对肿瘤进行成像。注射放射性免疫偶联物后，偶联物中的抗体与癌细胞表面的特定膜抗原结合。偶联物中的放射性示踪剂释放正电子，正电子与邻近的电子相互作用产生能量，该能量被正电子发射断层扫描（PET）仪检测，从而生成肿瘤的图像。

方案

所有涉及动物模型的操作均已被当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会审核。

1. 体内 PET成像与 ⁸⁹Zr-DFO-J591

注意：本实验步骤涉及放射性物质的操作与处理。在进行这些步骤之前，研究人员应咨询所在机构的辐射安全部门。应采取一切可能的措施，以尽量减少电离辐射的暴露。

1. 在雄性裸胸腺裸鼠中，皮下植入 5 × 10⁶ 个前列腺淋巴结癌（LNCaP）癌细胞，并使其生长至 100–150 mm³ 的异种移植瘤（接种后 3–4 周）。
2. 将 ⁸⁹Zr-DFO-J591 放射免疫结合物用 0.9% 无菌生理盐水稀释至浓度为 1.0 mCi/ml。
3. 通过尾静脉向荷瘤小鼠注射 200 µl 的 ⁸⁹Zr-DFO-J591 溶液（DFO = 去铁胺，J591 =  前列腺特异性膜抗原 [PSMA] 靶向抗体）（200 µCi；7.4 MBq）。
4. 在预定的成像时间点（例如，注射后 12、24、48、72、96 或 120 小时），使用 2% 异氟烷：氧气混合气体对小鼠进行麻醉。
5. 将小鼠置于小动物 PET 扫描仪的扫描床上，并在扫描过程中使用 1% 异氟烷：氧气混合气体维持麻醉。在将动物放置于扫描床前，需通过夹趾法确认麻醉状态，并在小鼠眼部涂抹眼用软膏以防止麻醉期间角膜干燥。
6. 通过静态扫描采集小鼠的 PET 数据，使用 350–700 keV 的能量窗和 6 nsec 的符合时间窗，至少获取 4000 万次符合事件。
7. 图像采集完成后，不得让小鼠无人看管，且在小鼠恢复意识前不得将其放入与其他小鼠共用的笼中。

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
p-SCN-Bn-DFO	Macrocyclics	B-705	储存于 -80 °C
[89Zr]Zr-草酸盐	多家供应商，包括 Perkin-Elmer	-	注意：放射性物质