
该视频讲解了在哺乳动物宿主细胞中产生抗体的过程,从基因表达到分泌。该过程包括转录、翻译、信号识别、正确折叠,以及最终通过分泌囊泡释放到细胞外介质中。...
Video Duration: 3 minutes and 22 seconds
JoVE Encyclopedia of Experiments
免疫学
面向学术界和工业界科学家的先进科研实验视频百科全书。

在顶尖大学实验室拍摄
每个实验的实践与理论

该视频讲解了在哺乳动物宿主细胞中产生抗体的过程,从基因表达到分泌。该过程包括转录、翻译、信号识别、正确折叠,以及最终通过分泌囊泡释放到细胞外介质中。...
Video Duration: 3 minutes and 22 seconds
本视频展示了一种通过将携带重链和轻链基因的质粒载体导入哺乳动物细胞来产生抗体的方法。这些载体与聚乙烯亚胺相互作用,通过形成多聚复合物进入细胞;随后,它们被翻译成单个蛋白质,并组装成完整的抗体,最终分泌到细胞外培养基中。...
Video Duration: 2 minutes and 10 seconds
本视频演示了一种利用传统杂交瘤技术制备针对猪氨肽酶N(APN)的单克隆抗体的实验方法。APN是一种膜结合型金属肽酶。用APN免疫小鼠后,收集其脾细胞并与永生化骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞。随后利用HAT(次黄嘌呤-氨基蝶呤-胸苷)培养基筛选并扩增杂交瘤细胞,以产生针对不同APN表位的特异性单克隆抗体。...
Video Duration: 4 minutes and 51 seconds
本视频演示了一种针对金属肽酶的重组抗体的制备方法。携带编码抗体、绿色荧光蛋白及抗生素抗性基因的重组质粒,通过脂质体转染试剂转染至上皮细胞中。对转染后的细胞进行筛选和培养,以产生重组抗体。...
Video Duration: 3 minutes and 38 seconds
该视频展示了一种从抗原特异性B细胞中制备单克隆抗体的技术。从分离的抗原特异性B细胞中克隆编码抗体重链和轻链的真核表达载体,通过多聚复合物将其导入哺乳动物细胞。进入细胞后,这些载体进行翻译,产生的重链和轻链多肽组装成抗体,并由细胞分泌出来。...
Video Duration: 2 minutes and 53 seconds
本视频演示了一种从中国仓鼠卵巢细胞收获的细胞培养液中纯化单克隆抗体的实验方法。该方法采用固定化蛋白A的多孔玻璃树脂,蛋白A可特异性结合样品中抗体的Fc区,从而有效将其与杂质分离。通过低pH洗脱缓冲液减弱蛋白A与抗体之间的相互作用,进而实现纯化抗体的回收。...
Video Duration: 2 minutes and 28 seconds
该视频展示了一种利用稳定转染的哺乳动物细胞生产治疗性抗体的方法。添加胰蛋白胨可促进细胞分裂,导致细胞过度生长,并支持更高的抗体产量。收集含抗体的培养基,经过滤后储存,以供后续使用。...
Video Duration: 2 minutes and 29 seconds
本视频演示了一种从抗体生产细胞培养所获得的培养上清液中纯化单克隆抗体的技术。该过程采用交联琼脂糖珠基质,其上偶联了蛋白A,可将上清液中的抗体固定在琼脂糖珠上,从而有效分离杂质。通过加入低pH的洗脱缓冲液,可削弱蛋白A与抗体之间的相互作用,便于收集含抗体的组分。...
Video Duration: 3 minutes and 3 seconds
本视频展示了一种检测抗体介导的T细胞效应功能激活的实验方法。将针对流感病毒血凝素(HA)的特异性单克隆抗体加入表达HA的转染哺乳动物细胞中,可形成与HA的免疫复合物。当引入表达Fc受体和荧光素酶报告基因的工程化T细胞后,抗体-HA复合物可激活T细胞,通过添加荧光素酶底物并检测产生的生物发光信号,即可检测T细胞的激活程度。...
Video Duration: 3 minutes and 3 seconds
该视频展示了一种基于细胞的检测方法,用于检测抗水通道蛋白-4免疫球蛋白G,该方法使用含有未转染细胞和表达水通道蛋白-4的转染细胞的生物芯片。此方法可用于视神经脊髓炎谱系疾病的诊断,诊断依据为生物芯片上出现强烈的绿色荧光。...
Video Duration: 4 minutes and 21 seconds
本视频展示了一种用于生成中和性流感病毒单克隆抗体逃逸变异株的技术。将抗体中和后的病毒悬液接种至鸡胚中,以选择性扩增逃逸变异株。由此获得的病毒群体主要为逃逸变异株,其存在经测序验证 通过...
Video Duration: 3 minutes and 20 seconds
本视频展示了由治疗性抗体在人自然杀伤细胞中引发的FcγRIIIa介导的事件。该人工刺激平台有助于研究下游效应功能,包括细胞骨架重排、脱颗粒、趋化因子/细胞因子产生,以及由抗体FcγRIIIa和Fc区结合所介导的信号通路。...
Video Duration: 3 minutes and 32 seconds
本视频展示了一种基于细胞的检测方法,该方法利用pH敏感的荧光标记Tau蛋白聚集体,通过荧光激活细胞分选技术定量分析小鼠小胶质细胞对Tau蛋白的摄取。...
Video Duration: 5 minutes and 22 seconds
本视频演示了一种利用大鼠海马神经元培养物来鉴定样本中针对特定抗原的抗体的技术。通过将培养的神经元暴露于含有靶向N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDARs)自身抗体的患者样本中,可通过免疫染色揭示结合在神经元表面的自身抗体的存在。...
Video Duration: 3 minutes and 52 seconds
本视频展示了一种用于检测抗呼吸道合胞病毒(RSV)中和抗体的实验方法。将含有抗RSV中和抗体的血清与病毒预先孵育,可使病毒颗粒失活,从而减少细胞感染及空斑形成。随后对感染病毒的细胞进行固定、封闭,并使用荧光素标记的抗体进行染色,以实现空斑的可视化观察。该过程可用于确定能够中和50%...
Video Duration: 5 minutes and 1 second
本视频展示了人血清中胰岛自身抗体的电化学发光检测。血清中的抗体将钌标记的抗原与生物素化的捕获抗原连接,形成复合物,通过电化学发光测定进行检测。...
Video Duration: 6 minutes and 9 seconds
该视频展示了一种基于纸张的免疫分析方法,该方法采用胺基功能化的纤维素圆片,并通过戊二醛进行交联。首先将特异性识别IgG-Fc段的捕获抗体共价固定在圆片上,随后加入免疫球蛋白G和辣根过氧化物酶标记的检测抗体,若存在免疫球蛋白G,则发生显色反应,通过颜色变化予以确认。...
Video Duration: 4 minutes and 48 seconds
本视频演示了一种 体外 研究抗体对真菌生物膜作用的技术。致病性真菌 Candida tropicalis...
Video Duration: 3 minutes and 54 seconds
本视频展示了一种用于测定血清样本中流感病毒神经氨酸酶(NA)抑制性抗体滴度的检测方法。将含有抗NA抗体的血清样本加入包被有胎球蛋白(fetuin)的微孔板中。加入病毒后,抗体可阻止病毒NA切割胎球蛋白并暴露其半乳糖基团。随后加入辣根过氧化物酶标记的凝集素,该凝集素可结合暴露的半乳糖。通过比色法测定NA抑制性抗体滴度,即固定化的凝集素偶联过氧化物酶催化过氧化物酶底物产生显色反应。...
Video Duration: 3 minutes and 19 seconds
本视频展示了一种用于检测器官移植受者体内抗供体 HLA 同种异体抗体的实验方法。合成肽阵列以代表可能引起抗体介导的器官排斥反应的表位。将该阵列与受者血清孵育,血清中的同种异体抗体将结合其靶向表位。通过化学发光法检测抗体结合情况,从而鉴定引发同种异体抗体反应的供体特异性 HLA...
Video Duration: 3 minutes and 15 seconds
本视频展示了用于分析小鼠血清中循环抗糖抗体的打印糖阵列技术。血清中的抗体与芯片上的特定糖类发生相互作用,通过免疫染色后进行荧光扫描来确认该相互作用。...
Video Duration: 4 minutes and 57 seconds
本视频展示了一种应用多肽微阵列技术来分析识别组蛋白多肽上翻译后修饰(PTM)的抗体特异性的方法。将含有已知PTM组合的固定化荧光染料标记组蛋白多肽的微阵列芯片与靶向PTM特异性抗体孵育。该过程有助于确定抗体对靶标PTM的特异性及其与非靶标PTM之间潜在的交叉反应性。...
Video Duration: 5 minutes and 21 seconds
本视频演示了一种免疫染色技术,用于定位植物组织中的阿拉伯半乳聚糖蛋白(AGPs)和果胶。经过固定并包埋在树脂中的植物组织切片,使用针对AGP和果胶的特异性一抗、荧光标记的二抗以及一种纤维素结合型荧光染料进行染色,以揭示它们在细胞壁中的组织特异性共定位情况。...
Video Duration: 3 minutes and 38 seconds
本视频展示了一种间接酶联免疫吸附测定法,即ELISA夹心免疫捕获法,用于评估疫苗中免疫原性糖蛋白的含量。将含有糖蛋白特异性抗体的检测板与系列稀释的疫苗样本(包括参考疫苗和待测疫苗)共同孵育,随后通过免疫测定法定量待测疫苗中的糖蛋白含量。...
Video Duration: 5 minutes and 42 seconds
本视频演示了一种利用基于微流控芯片的化学发光系统检测血清特异性免疫球蛋白E的方法。血清IgE与固定在芯片反应区内的不同变应原发生相互作用,随后通过辣根过氧化物酶标记的抗IgE抗体和化学发光底物进行检测,从而实现多种变应原特异性IgE的同步检测。...
Video Duration: 3 minutes and 31 seconds
本视频演示了一种利用免疫组织化学方法在脑组织切片中检测错误折叠朊蛋白的技术。首先用甲酸处理脑组织切片,以变性朊蛋白并降低感染风险,再通过加热诱导表位修复来暴露朊蛋白聚集体,随后对错误折叠的朊蛋白聚集体进行免疫标记,并在显微镜下观察。...
Video Duration: 4 minutes and 37 seconds
本视频展示了利用共聚焦显微镜评估病毒来源的肽段修饰抗体偶联物在细胞内分布的过程。病毒来源的核定位序列可引导抗体偶联物进入细胞质,该过程通过免疫染色和荧光检测得以证实。...
Video Duration: 4 minutes and 59 seconds
本视频展示了一种通过抗体喂养的方法来研究原代海马神经元培养中谷氨酸受体的转运过程。该方法可同时观察细胞质膜和内膜系统上的受体群体。通过在细胞膜透化前后分别进行标记,使用相同的初级抗体但结合不同荧光染料的次级抗体,从而实现对这两类受体亚群的区分。...
Video Duration: 5 minutes and 27 seconds
本视频展示了一种检测乳汁吞噬细胞介导的抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)的实验方法。将荧光标记的、与抗原-抗体复合物偶联的微球与从乳汁中分离的细胞悬液混合,以诱导吞噬性白细胞发生抗体依赖性细胞吞噬作用。通过使用针对常见白细胞抗原(CD45)的抗体对细胞进行标记后,采用流式细胞术检测微球阳性且具有活力的吞噬性白细胞的荧光强度,从而反映ADCP活性水平。...
Video Duration: 4 minutes and 3 seconds
本视频演示了一种用于定量人诺如病毒类病毒颗粒(VLPs)与人肠道细菌结合的检测方法。将细菌悬液与VLPs混合并孵育,以形成VLP-细菌复合物。随后用荧光标记的VLP特异性抗体对复合物进行标记,再通过基于流式细胞术的可视化和定量分析,确定结合VLP的细菌百分比。...
Video Duration: 4 minutes and 24 seconds
本视频演示了一种毛细管电泳免疫分析方案,用于检测人血小板中与肌萎缩侧索硬化症(ALS)相关的蛋白质生物标志物。通过基于分子大小对血小板蛋白进行分离,随后进行化学发光检测,从而确认ALS生物标志物蛋白的存在。...
Video Duration: 7 minutes and 32 seconds
本视频展示了一种用于评估预先免疫小鼠对新型纳米乳剂佐剂疫苗抗体免疫应答的方法。通过测定IgG抗体滴度,证实免疫接种可增强抗体应答。...
Video Duration: 4 minutes and 51 seconds
本视频展示了一种用于测量荧光抗生素探针在细菌细胞内蓄积的实验方法。首先使细菌细胞暴露于外排泵抑制剂,以破坏其跨膜质子梯度,随后加入荧光团标记的抗生素。由于质子梯度被破坏导致外排泵功能受抑,抗生素在细菌内部蓄积。之后裂解细菌细胞,通过测定荧光强度来确认抗生素的蓄积情况。...
Video Duration: 4 minutes and 2 seconds
该视频展示了一种在小鼠肿瘤异种移植模型中进行体内抗体定位的荧光成像方法。该方法包括将肿瘤细胞注射到小鼠体内,使其在皮下形成实体异种移植瘤。随后注射荧光标记抗体,通过肿瘤异种移植部位增强的荧光信号,验证抗体的特异性定位。...
Video Duration: 3 minutes and 10 seconds
本视频演示了一种用于将抗体递送至小鼠脑部的对流增强递送(CED)技术。暴露麻醉小鼠的颅骨,并在目标区域钻出一个骨孔以用于抗体递送。将含有抗体的阶梯式导管插入目标部位,并通过输注泵产生压力梯度,以可控速率递送抗体。...
Video Duration: 2 minutes and 58 seconds
本视频演示了在小鼠模型中进行超声辅助抗体递送的操作流程。经眼后注射的微泡在超声作用下发生振荡,导致血脑屏障出现短暂性破坏,从而使标记的抗体得以进入脑组织。...
Video Duration: 2 minutes and 51 seconds
本视频展示了一种利用放射性免疫偶联物的技術 体内...
Video Duration: 2 minutes and 39 seconds
本视频展示了一种基于免疫荧光的方法,用于在游离的小鼠空肠冷冻切片中观察肠杯状细胞。在肠绒毛内,管腔顶端的绿色荧光与延伸的红色根状结构共定位,表明存在杯状细胞。...
Video Duration: 3 minutes and 31 seconds
本视频展示了一种在小鼠模型中追踪双特异性抗体诱导T细胞向肿瘤迁移的方法。将经荧光素酶转导的效应T细胞注射到皮下移植肿瘤异种移植物的小鼠体内。随后引入双特异性抗体,使其同时结合T细胞和肿瘤细胞。通过生物发光成像追踪T细胞的定位,信号强度反映T细胞浸润肿瘤的程度。...
Video Duration: 2 minutes and 44 seconds
本视频展示了使用同一种属来源的两种不同一抗进行双重标记免疫染色,这两种一抗可特异性结合寄生虫和宿主的蛋白质。此外,通过使用针对这些一抗的标记二抗,可清晰区分宿主和寄生虫蛋白的信号,从而促进宿主-病原体相互作用的研究。...
Video Duration: 3 minutes and 44 seconds
该视频展示了一种免疫荧光染色方法,用于检测成年海马体中的神经发生。首先,对小鼠脑切片进行处理,使用针对神经前体细胞中与神经发生相关的标志蛋白的一抗孵育。接着,用带有荧光染料标记的二抗进行标记。然后在共聚焦显微镜下观察脑切片,根据不同的标志蛋白组合表达模式,区分各种前体细胞亚型。...
Video Duration: 4 minutes and 18 seconds
本视频演示了一种利用量子点对小鼠心脏组织切片中的σ-1受体进行免疫标记的技术。心脏组织经固定、锇酸处理、染色、脱水后,包埋于树脂中并进行切片。随后,将切片与抗体孵育,并用量子点标记,以通过电子显微镜界定Sigma-1受体的亚细胞定位。...
Video Duration: 5 minutes and 4 seconds
本视频演示了一种利用CUBIC(透明、无阻碍的脑/体成像鸡尾酒溶液及计算分析)组织透明化方法结合免疫荧光染色技术,对小鼠肾脏进行整体染色的实验方法。肾脏经过组织透明化处理,包括去脂、脱色以及折射率匹配溶液处理,从而使组织变得透明,以实现最佳的三维成像效果。随后使用荧光标记的抗体对组织进行染色,并在光片显微镜下观察肾脏中的交感神经和动脉结构。...
Video Duration: 3 minutes and 43 seconds
本视频演示了一种免疫荧光检测方法,用于检测皮肤活检切片中与神经退行性疾病特异性的α-突触核蛋白聚集体。采用游离漂浮免疫染色法,对真皮神经元中的羧基末端水解酶和α-突触核蛋白聚集体进行荧光标记。在共聚焦显微镜下,同时显示两种抗体荧光信号的细胞表明真皮神经元中存在α-突触核蛋白聚集体。...
Video Duration: 4 minutes and 9 seconds
本视频展示了一种利用荧光介导断层扫描(FMT)在结肠炎小鼠模型中评估肠道巨噬细胞浸润的技术。通过葡聚糖硫酸钠(DSS)在小鼠体内诱导结肠炎后,向动物注射可识别结肠内浸润巨噬细胞表面F4/80糖蛋白标志物的抗体。随后将小鼠置于FMT设备中成像,荧光信号与反射信号被重建为三维图像,以确定荧光的空间分布及强度。...
Video Duration: 4 minutes and 6 seconds
本视频演示了一种抗体摄取实验,用于对斑马鱼放射状胶质前体细胞中的 Notch/DeltaD 信号进行成像。该方法包括将去壳并包埋于琼脂糖中的斑马鱼胚胎进行固定,向其中注射靶向 RGP 上 DeltaD 配体的染料溶液,并在荧光显微镜下观察,以确认 Notch/DeltaD...
Video Duration: 4 minutes and 57 seconds
本视频展示了利用荧光标记的捕获抗体-磁性纳米颗粒偶联物进行细胞外囊泡的免疫捕获。该过程包括复合物的形成、使用荧光标记的检测抗体进行染色、磁分离以及流式细胞术分析,以实现抗原表征。...
Video Duration: 4 minutes and 5 seconds
本视频展示了一种基于微球的多重免疫检测试验,用于定量样本中多种细胞因子靶标。该方法使用一组与细胞因子特异性抗体偶联的不同微球,以结合样本中存在的细胞因子。通过生物素标记的检测抗体,将链霉亲和素标记的报告分子固定在已结合的细胞因子上。流式细胞术根据微球的独特大小和内部荧光强度来识别已结合的细胞因子,而报告分子的荧光强度则反映细胞因子的数量。...
Video Duration: 4 minutes and 49 seconds
本视频演示了一种利用免疫球蛋白G(IgG)包被的肿瘤细胞评估树突状细胞活化状态的实验方案。树突状细胞会内吞IgG包被的肿瘤细胞,加工肿瘤抗原,并通过MHC-II分子将抗原呈递至细胞表面,同时共表达共刺激分子CD86。随后,对这些树突状细胞进行针对MHC-II和CD86的免疫染色,并通过流式细胞术分析,以鉴定其活化状态。...
Video Duration: 3 minutes and 35 seconds
本视频展示了一种利用抗体微阵列芯片检测环境样品中蓝细菌菌株的方法。含有多种细菌的样品与固定在芯片上的抗体发生相互作用,通过荧光标记的抗蓝细菌菌株抗体进行免疫染色,可在不同位点观察到特异性荧光信号,从而揭示特定蓝细菌菌株的存在。...
Video Duration: 3 minutes and 31 seconds
本视频演示了一种对包埋在三维水凝胶中的细胞进行免疫染色的技术。含有神经前体细胞的水凝胶培养物经固定、通透化处理,并用封闭液处理以防止非特异性免疫染色。加入针对特定蛋白的一抗混合物,随后加入荧光标记的二抗和细胞核染料。最后将样品封片并置于共聚焦显微镜下观察。...
Video Duration: 3 minutes and 39 seconds
本视频演示了一种将淀粉样蛋白β(Aβ)肽特异性抗体持续灌注至大鼠海马区的技术。该研究采用植入双侧套管系统,以实现对Aβ肽特异性抗体的可控灌注,同时向大鼠海马区灌注可溶性Aβ寡聚体(Aβo),用于研究寡聚体与抗体之间的相互作用。...
Video Duration: 5 minutes and 29 seconds
本视频展示了一种利用电容型免疫探针生物传感器检测和定量肽类递质的方法。经过功能化修饰并涂覆有抗体的电极可与目标肽相互作用,引起信号变化,从而实现对肽的精确定量与检测。...
Video Duration: 5 minutes and 15 seconds
本视频分析T细胞受体诱导的T细胞内钙离子流入。抗CD3抗体激活T细胞信号通路,导致细胞内钙离子浓度升高,钙离子与Indo-1染料结合。在流式细胞术中,光谱从无钙状态向钙结合状态的偏移 反映了T细胞受体诱导的钙离子内流。...
Video Duration: 8 minutes and 14 seconds
本视频展示了一种在Caenorhabditis elegans中研究线粒体自噬的in...
Video Duration: 3 minutes and 39 seconds
本视频展示了一种基于磁性纳米颗粒的免疫分析微流控系统。该检测系统采用了一种在其通道内集成磁性捕获结构的微流控装置。将预先形成的免疫复合物——由抗原包被的磁性纳米颗粒与一抗及辣根过氧化物酶标记的二抗结合而成——引入通道中。在外加磁场作用下,免疫复合物被截留在多孔磁性捕获结构中。通过使用一种在过氧化物酶催化下可发出荧光的荧光底物,在显微镜下对被捕获的免疫复合物进行检测。...
Video Duration: 4 minutes and 16 seconds
该视频展示了一种基于免疫荧光的方法,用于定量癌细胞中的复制应激。经羟基脲处理的细胞会产生单链DNA,可通过免疫荧光检测。绿色荧光焦点的数量反映了癌细胞中复制应激的水平。...
Video Duration: 3 minutes and 37 seconds
该视频展示了用于无交叉反应的多重夹心免疫测定的 snap chip...
Video Duration: 4 minutes and 36 seconds
本视频展示了一种使用同一宿主物种来源的一抗进行多重免疫染色的实验方法。该方法中,肾上腺组织切片经历两步免疫染色过程:首先,切片用特异性识别皮质标记物的抗体进行染色;随后,去除已结合的抗体,再用特异性识别髓质标记物的抗体重新染色。...
Video Duration: 5 minutes and 31 seconds
本视频演示了一种 原位 利用荧光多光谱成像技术分析肿瘤组织中不同亚群的浸润性T细胞。将肾细胞癌组织冷冻切片用抗体处理,标记表达特定抑制性受体并呈现免疫治疗耐受表型的CD8+ T细胞。通过多光谱显微镜观察标记后的切片,以鉴定不同的CD8+...
Video Duration: 5 minutes and 1 second
本视频展示了一种用于监测单纯疱疹病毒-1型感染过程中感染细胞蛋白0(ICP0)转运的方法。ICP0在新合成后会转位至细胞核,随着感染进程的发展,随后转移至细胞质。通过免疫荧光显微镜可揭示并分析该蛋白的亚细胞定位,从而深入了解其在感染各阶段中的转运动态。...
Video Duration: 5 minutes and 19 seconds
本视频展示了一种用于鉴定小鼠肺组织中定居免疫细胞的体外技术。从小鼠肺组织中分离目标免疫细胞后,使用针对天然免疫和适应性免疫细胞特定标志物的荧光标记抗体混合物对细胞表面进行标记。此外,还利用一种细胞内标志物对单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞进行标记。随后通过流式细胞术鉴定各类免疫细胞类型。...
Video Duration: 5 minutes and 54 seconds
该视频展示了一种评估病毒感染细胞中半胱天冬酶(caspase)介导的蛋白质切割的方法。病毒感染后,caspase 被激活,进而降解多种宿主细胞蛋白和病毒核蛋白,而特异性 caspase 抑制剂可阻止这种降解,这一点已通过蛋白质印迹(western...
Video Duration: 3 minutes and 34 seconds更快掌握新实验方案,高效培训实验室成员
降低实验室成本,节约宝贵资源
快速学习新研究技术,建立Core技能并拓展专业能力。
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