评估粪菌移植在白细胞介素-10缺陷小鼠中的作用

摘要

来源：Xiao, Y. 等，白细胞介素10缺陷小鼠模型中粪菌移植的治疗效果评估 J. Vis. Exp. (2022)

本视频演示了在结肠炎的白细胞介素-10缺陷小鼠中进行粪便微生物移植的操作过程。肠道内定植的粪便微生物会释放次级代谢产物，诱导抗炎性细胞因子的释放，从而减轻结肠炎症。

方案

所有涉及动物模型的实验步骤均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 新鲜粪便样本的采集

1. 准备无菌纸巾、钝头镊子和 50 mL 离心管。
   1. 将部分纸巾和镊子分别放入独立的灭菌袋中，并在干热条件下于 180 °C 灭菌 30 分钟。同时使用无菌的离心管。称量离心管并将其重量标记在管壁上。
2. 打开动物房内的生物安全柜。
3. 取一个已灭菌且不含垫料的清洁小鼠笼，放入生物安全柜中。取下笼盖和食槽，并将其一并置于柜内。
4. 在笼底放置一些无菌纸巾，并将金属架重新放回笼子上方。
5. 选择年龄匹配的粪便供体小鼠，将小鼠笼放入生物安全柜中。打开笼子，用镊子轻轻抓住供体小鼠（C57BL/6J）的尾巴，将其放置在清洁笼子上方的金属架上。
6. 将笼盖盖在金属架上方，等待小鼠排便。
   注意：可同时将几只同窝小鼠放在金属架上。
7. 收集粪便颗粒，并将其放入无菌的 50 mL 离心管中。按性别分别收集粪便颗粒，不得混合来自雄性和雌性小鼠的粪便颗粒。
8. 再次称量离心管，计算粪便颗粒的重量。

2. 粪便悬液的制备<....

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
BD 注射器，1 mL	Fisher Scientific	14-829-10F
钝头镊子	Knipex	926443
C57BL/6J 小鼠	Jackson Lab	664
离心机	Eppendorf	5415R
锥形管	ThermoFisher	339650
弯曲喂食针头	Kent Scientific	FNC-20-1.5-2
甘油	MilliporeSigma	G5516
IL-10 基因敲除小鼠	Jackson Lab	4366
USP 生理盐水	Grainger	6280
麻醉气体挥发器	Euthanex Corp.	EZ-108SA