使用冷常压等离子体处理刺激神经干细胞分化

Abstract

来源:Xiong， Z.， et al. 通过一步冷常压等离子体体外处理进行神经干细胞分化。 （2019 年）。

该视频介绍了一种利用低温大气血浆触发神经干细胞分化的方法。这会产生紫外线辐射和反应分子，刺激神经细胞产生投射，表明神经元细胞分化。

Protocol

1. 细胞培养和预分化

1. 神经干细胞培养和预分化
   1. 准备聚-D-赖氨酸包被的盖玻片。将无菌盖玻片（直径 20 mm）放入 12 孔板中。按照以下步骤，在水中涂覆 0.1% 聚 D-赖氨酸，以更好地粘附在盖玻片上。
      注:必须为每种细胞系和应用确定最佳条件。
      1. 在无菌条件下用 0.1% w/v 的聚-D-赖氨酸溶于水中涂覆盖玻片表面。轻轻摇动以确保盖玻片表面均匀涂覆。
      2. 在 37°C 下培养过夜（~12 小时）后，去除多聚-D-赖氨酸溶液，并用 1 mL 无菌水冲洗表面 3 次。
      在
      3. 接种细胞前至少 30 分钟干燥细胞。
2. 小鼠神经干细胞 C17.2 （C17.2-NSC） 培养和预分化
   1. 在 25 cm² 培养瓶中，在补充有 10% 胎牛血清 （FBS）、5% 马血清 （HS） 和 1% 青霉素/链霉素的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基 （DMEM） 中，在 37 °C 和 5% CO2 下孵育 C17.2-NSCs~2 - 3 天。
   2. 当细胞达到 85% 汇合时，取出培养基，用 1 mL PBS 洗涤细胞，并向培养瓶中加入 1 mL 新鲜胰蛋白酶 （0.25%）。放置 1 分钟;然后，向培养瓶中加入 1 mL 培养基，....

Results

图 1:实验装置示意图。等离子喷射装置连接到高压电源的输出线。带示波器的高压探头用于检测输出电压。当工作气体流过注射器并且高压打开时，将产生等离子射流并传播到空气中。

图 2:C17.2-NSC 和原代大鼠 NSC 的普通倒置相差光学显微镜图像。此图经许可改编自 Xiong 等人。

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Materials