从小鼠脉络丛中分离免疫细胞

本文内容

摘要

本视频展示了从小鼠脉络丛中分离免疫细胞的操作步骤。该方法应用于神经免疫学研究，以探讨脉络丛中的免疫细胞如何影响大脑健康及多种神经系统疾病。

方案

所有涉及动物模型的操作均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 材料的准备

磁珠激活细胞分选（MACS）缓冲液：在PBS-/-中配制含2 mM乙二胺四乙酸（EDTA）和0.5%牛血清白蛋白（BSA）（材料表）的溶液。
IV型胶原酶储备液（20 U/μL）：将粉末溶于PBS+/+（材料表）中，分装后于-20 °C保存。
注意： IV型胶原酶需要MgCl₂才能完全激活；避免对IV型胶原酶溶液进行冻融。
麻醉镇痛溶液：在1 mL PBS-/-中混合150 μL氯胺酮（150 mg/kg）、25 μL赛拉嗪（5 mg/kg）和330 μL布托啡诺（0.1 mg/kg）。
注意： 麻醉镇痛溶液需现用现配，保存时间不得超过一天。
肝素溶液（100 U/mL）：将粉末溶于PBS-/-中。
准备灌注插入系统，将一根导管连接至装有PBS-/-的锥形烧瓶。在灌注管末端连接一支23 G针头。打开灌注装置，使PBS流动直至导管内无气泡。
准备配备光源的双目放大镜。

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材料

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