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在小鼠脑内植入电极组件用于电生理记录

2025年7月8日

本文内容

摘要

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来源:Straub, J., VGAT-Cre 小鼠电点燃电极的制备与植入以建立颞叶癫痫模型J. Vis. Exp. (2021)。

本视频演示了一种将电极组件植入小鼠脑内的技术。该组件包含双极电极,用于记录海马区的神经活动,以及一个参考电极,用于获取小脑区域的基线活动信号。将麻醉后的小鼠固定于立体定位仪上,随后将电极组件植入目标脑区。术后动物恢复一段时间,随后进行电生理记录。

方案

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所有涉及动物模型的实验程序均已通过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 制作带有两个双极电极的耳机(图1)

  1. 剪取一段长度为 3.5 cm 的不锈钢聚四氟乙烯涂层不锈钢丝。
  2. 将导线两端的绝缘涂层剥离约 1 mm。注意不要剥离过多导线。
  3. 将两个插针插入台钳夹具中,插针底部较长的狭缝朝下。
  4. 在导线裸露的两端以及插针顶部涂抹助焊剂。
  5. 用适量焊料对导线裸露部分进行镀锡,确保完全覆盖即可。
  6. 在插针顶部添加极少量焊料,避免溢出至侧面。
  7. 当焊料熔化时,将导线一端裸露部分尽可能深入地插入插针中。
    注意: 插针侧面有孔,导线可能从此孔穿出——请勿让导线从插针中穿出。所有裸露的导线部分必须完全保留在插针内部。
  8. 对第二个插针重复步骤 1.6–1.7,使用导线另一端的裸露部分。
  9. 让插针静置 30 秒使其固定,然后从台钳夹具上取下,并轻轻拉扯以确认导线与插针之间的连接牢固可靠。
  10. 用冷水冲洗插针,然后将其擦干。
  11. 使用欧姆表检测插针 1 与插针 2 之间的导通性。
  12. 将导线两端的插针靠拢并保持平行且紧密贴合。用止血钳夹住导线中部,然后旋转止血钳,使导线自身紧密缠....

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结果

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实验装置;不同微丝电极构型标记为 A,精密机械装置标记为 B。
图 1:脑电帽制备的关键步骤。A)电极在不同制备步骤中的外观(左侧数字对应相应步骤)。(B)最终产品安装于自制支架中,该支架可适配立体定位仪。注意,支架末端为一个套环针组件,可插入脑电帽底座中。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
16通道细胞外差分交流放大器(115V/60Hz)AD InstrumentsAM3500-115-60替代脑电图放大器
363/CP 插头套管,带针套筒P1 Technologies363SLEEVPIN0NL用于电极夹持器
电缆,363-363 5厘米 - 100厘米,带屏蔽网 6TCMP1 Technologies363363XXXXCM004小鼠至换向器电缆
闭路电视摄像机 Qcwox HD Sony 红外LEDSonyQC-SP316
换向器 SL6C/SB(单刷)P1 Technologies8BSL6CSBC0MT原Plastics One, Inc.
电流放大器A-M SystemsModel 2100
牙科水泥Stoelting51459
钻头,#75,外径0.310" LOC 130 PTKyocera105-0210.310
E363/0 斜向插座触点P1 Technologies8IE3630XXXXE连接器用针脚
iBond 自酸蚀粘接剂KulzerCE0197
MS363 基座 2298 6针 白色P1 Technologies8K000229801F脑电图头戴设备连接器
欧姆表Simpson260高灵敏度
PowerLab 16/35 和 LabChart ProAD InstrumentsPL3516/P替代脑电图软件
SomnoSuiteKent Scientific Corp.SS-01麻醉装置 & RightTemp 监测
立体定位钻机和微型电机套件Foredom Electric Co.K.1070
立体定位仪David Kopf InstrumentsModel 940
用于深部电极的聚四氟乙烯涂层导线,外径0.008'A-M Systems791400
VGAT-Cre 小鼠,近交系C57BL/6J背景The Jackson Laboratory664

重印与许可

申请许可以重复使用本 JoVE 文章的文本或图表

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标签

VGAT Cre

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