通过飞沫标题细胞封装

Protocol

NIH3T3细胞的准备:

A.弹出细胞

1. Trypsinize细胞与细胞媒体，然后稀释1:1，从T75烧瓶中转移到一个15毫升的猎鹰管
2. 分拆成颗粒细胞，离心，吸出上清液，用DPBS细胞
3. 成颗粒细胞再次离心，吸上清
4. 在媒体的悬浮细胞
5. 确定细胞密度与血球（〜200 × 10 ⁴细胞/ mL的容量瓶中每T75）
6. 离心细胞液，吸出上清液，并悬浮在适量的媒体不同的细胞浓度

B.细胞弹射

1. 弹射前使用的涡细胞
2. 转移到注射器200μL细胞液
3. 设置适当的模式脉冲发生器
   1. 弹出的单液滴和多个水滴（连发），设置脉冲发生器的"E BUR"模式
   2. 对于连续液滴抛射，至"NORM"模式设置脉冲发生器
4. 变化的信号设置
   1. 设置高和低电平输出电压:5 V和LOL为0 V，并确保"林先生"LED是上的HIL
   2. 设置为一个方形脉冲信号
   3. 变化的时间液滴弹射电磁阀打开，改变为"妇女参与发展"的价值或改变占空比（"责任"）
   4. 改变改变"市盈率"价值弹射频率
   5. 更改价值水滴喷出一阵改变"BUR"
5. 到准备基板上弹出电池解决方案与显微镜成像

C.染色

1. 染料溶液与0.5μL，钙黄绿素- AM和2μL，乙锭每DPBS毫升二聚体
2. 在染料溶液浸入准备基板
3. 允许样品孵育10分钟，在37 °成像彗星之前

实验验证

1. 在尼康的Eclipse TE - 2000 U荧光显微镜
   1. 现货先进的软件（诊断公司）
   2. 活/死含量

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
荧光显微镜		尼康仪器	Eclipse TE-2000 U
电磁阀单元喷射器				作频率：1 KHz，30psi，50nl~0.5ul。 12V阀门驱动器：2.5安培驱动电流
加仑便携式气罐		Coleman	Powermate CT5	加压空气：30 PSI
压力调节器Marsh		Bellofram
脉冲发生器			HP8112A	驱动频率产生：50 MHz
XYZ 平台		Newmark 系统		带步进电机：6 英寸行程 xy 平台（NLS4-6-25），2.5 英寸行程 z 平台（NLS4-2.5-25），3 轴控制器 （NSC-G3），0.1um 分辨率
NIH 3T3	细胞系			成纤维细胞
胰蛋白酶				0.05% 溶液
NIH 3T3 细胞培养基
DPBS	缓冲液
T75				组织培养瓶
塑料锥形管				15 ml，用于组织培养