小鼠神经元对重复性缺氧预处理的适应性

摘要

来源：Poinsatte, K., et al., 小鼠重复性缺氧预处理及短暂性大脑中动脉闭塞后神经血管保护作用的定量分析。J. Vis. Exp. (2015)

本视频通过在小鼠发生缺血性脑卒中前将其暴露于可控的低氧循环环境中，演示了重复性低氧预处理（RHP）的方法。该实验评估了RHP对血脑屏障稳定性、神经元适应性以及炎症反应的影响。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 重复性缺氧预处理

1. 在气体调节器上定制设计四个流量计，并使用聚氯乙烯（PVC）管将其连接至标准的15 L诱导室，使来自氧气（O₂）气瓶的压缩气体通过进气口流入诱导室。
2. 将小鼠分为两组：重复性低氧预处理（RHP）组，接受8%和11% O₂的暴露；对照组，同时接受21% O₂（室内空气）的暴露。
3. 取下每个鼠笼的顶部滤膜盖，将带有食物和水瓶的鼠笼放入连接至相应O₂气瓶的诱导室中。关闭并密封诱导室盖。
   1. 打开气瓶主阀门，将每个诱导室的初始气体流速设为每分钟2升（LPM），持续暴露前5分钟，之后将流速降低至1 LPM，维持至暴露结束。
   2. 暴露结束后，将流速降至0 LPM，并关闭气瓶的气体阀门。
   3. 打开诱导室盖，将滤膜顶盖重新安装至各鼠笼上，将鼠笼放回标准饲养环境，直至下一次低氧暴露。
4. 每次使用后，用NPD（Steris）或等效的消毒剂/除味剂喷洒清洁每个诱导室。
5. 在连续两周内，每天在同一时间对21%组和RHP组小鼠同时进行暴露处理。

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材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
流量计、调节器	VetEquip, Inc	定制订购	四个流量计连接在6.0 mm的柔性PVC管上，通过塑料母接头连接到每个诱导室的进气口。这些流量计用螺栓固定在一根6.5英寸×1英寸×1英寸的金属条上。该金属条再用螺栓固定在带有DISS出口的MI-246-P压力表上。通过扳手可将此压力表和流量计装置连接至每个新的气体钢瓶。
21% O₂气瓶	AirGas	OX USP200
11% O₂气瓶	AirGas	定制订购
8% O₂气瓶	AirGas	定制订购
15 L诱导室	VetEquip	941454