在大鼠模型中诱导急性电休克惊厥

摘要

来源：Jang, S., et al，大鼠电休克惊厥及其海马组织的分离以检测惊厥诱导的突触后密度蛋白变化。J. Vis. Exp. (2017)

本视频展示了在大鼠模型中诱导急性电惊厥发作（ECS）以研究惊厥诱发的神经可塑性。研究人员通过耳夹电极施加电刺激，引发神经元过度兴奋和阵挛。该模型有助于研究突触可塑性、惊厥机制以及与电休克治疗（ECT）相关的治疗效应。

方案

所有涉及动物模型的操作均已经过当地机构动物护理委员会和 JoVE 兽医审查委员会的审核。

1. 急性电休克刺激的诱导

注意： 参见 图1B，上图。

1. 用无菌生理盐水润湿耳夹，确保其充分浸透。
2. 用浸有无菌生理盐水的纱布包裹大鼠耳朵以润湿耳部，待耳朵湿润后，移除纱布。
3. 每只耳朵各夹一个耳夹，并置于主软骨带以外的位置。
4. 在电惊厥发作（ECS）仪器上确认已形成有效回路；若未形成，仪器将显示错误信息或读数为“1”。
5. 佩戴厚实的非金属手套。用戴着手套的手轻轻握住大鼠，按下“SHOCK”按钮数秒钟，随后缓慢松开对大鼠的握持，观察其惊厥反应。对于假刺激“无惊厥”（NS）对照组，操作步骤完全相同，但不施加电流。
6. 当强直-阵挛发作开始时，断开耳夹连接，并根据修订后的Racine分级标准记录惊厥行为，该标准包括：“口面部运动”（1期）、“点头”（2期）、“前肢阵挛”（3期）、“直立伴前肢阵挛”（4期）和“直立跌倒伴前肢阵挛”（5期）。惊厥持续时间应约为10秒；使用计时器记录惊厥持续时间。
7. 惊厥结束后，将大鼠放回其饲养笼中。继续观察5分钟，确认大鼠已从惊厥中恢复。单独饲养于笼内，并将笼子送回恢复室。
8. 对下一只大鼠重复上述ECS诱导操作。
9. 在当天剩余时间内持续监测大鼠，并在次日至少于上午和下午各监测一次，直至实验结束实施安乐死。
   注意：....

结果

图1：急性电休克（ECS）与慢性电休克（ECS）诱导示意图。（A）通过耳夹电极将大鼠连接至脉冲发生器，并施加电刺激（55 mA，100脉冲/秒，持续0.5秒），以诱发4-5级强直-阵挛性癫痫发作。（B）急性ECS通过单次电刺激诱导；慢性ECS则通过连续7天每天施加一.......

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
Sprague-Dawley 大鼠	Charles River Laboratories		ECS 供应品
脉冲发生器	Ugo Bsile，意大利科梅里奥	57800	ECS 供应品