一种评估大鼠蔗糖渴求孵育的通用方法

摘要

在戒断期间，对与食物或药物相关线索的反应会随着时间的推移而增强，这可能与复吸行为的易感性增加有关。本文详细介绍了一种用于评估蔗糖自给大鼠中这种“渴求孵育”现象的实验方法。

摘要

对于处于食物限制饮食状态的个体而言，食物相关线索引发的食物渴求可能成为从节制到重新摄入食物这一过程中的关键行为转折点¹。以此方式定义的食物渴求，类似于药物相关线索引发的药物渴求。目前已有大量文献致力于研究药物渴求的行为学和神经生物学决定因素；我们及其他研究者近期正致力于将基础成瘾研究中的技术方法应用于进一步理解与食物相关的成瘾样行为^2-4。

与以往药物渴求研究类似，我们采用大鼠复吸模型来研究蔗糖渴求行为。在此模型中，大鼠在数天内多次进行自我给药，所给物质为药物或食物。在给药阶段，按压杠杆可获得奖赏，并伴随声音+灯光刺激。渴求行为则在后续无奖赏提供的测试阶段中，以按压杠杆的反应操作性地加以定义。大鼠会稳定地对声音+灯光刺激作出反应，这很可能是因为该刺激已获得条件性强化特性⁵。这种行为有时被称为蔗糖寻求或线索反应性。在本文讨论中，我们将使用“蔗糖渴求”一词来涵盖上述两种概念。

在过去的十年中，我们一直关注奖赏自我给药后的时间长短如何影响对奖赏的渴求。有趣的是，在强制戒断的数周过程中，大鼠对与奖赏配对的线索的反应逐渐增强。这种“渴求的孵化”现象在那些曾自我摄取食物或滥用药物的大鼠中均有观察到^4,6。我们在动物模型中发现的这种随时间推移而增强的渴求，可能对人类的药物成瘾和食物成瘾行为具有重要的参考意义。 本文介绍了一种评估大鼠蔗糖渴求孵化的实验方案。本方案包含若干变体，其中渴求的评估方式包括：在蔗糖自我给药环境中，通过消除压杆行为后对独立的蔗糖配对线索的反应来测定（无线索消除）；或在普遍的消除环境中，通过测定对蔗糖配对线索的反应来评估（有线索消除）。

方案

1. 动物实验对象

1. 实验开始时，使用3月龄的雄性Long-Evans大鼠。大鼠来源于美国加利福尼亚州吉尔罗伊的Simonsen公司，在美国西部华盛顿大学动物房内繁殖，并单独饲养于12小时反转昼夜循环（光照于0700关闭）条件下，自由摄取Purina Mills Inc. Mazuri啮齿类颗粒饲料（Gray Summit, MO, USA）和水。
2. 所有训练和测试均在每日0900至1300之间进行，每批大鼠每天均在同一时间段接受训练和测试。
3. 在整个研究期间，大鼠每周一、三、五称重一次。
4. 在训练阶段开始前，大鼠禁水约20小时，以促进其在训练第一天对蔗糖的自我给药行为。

2. 行为学实验步骤

所有操作性行为实验均使用标准操作性条件反射箱（Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA），每个操作性条件反射箱顶部均配备一个输注泵（Razel Scientific Instruments, St. Albans, VT, USA）。操作性条件反射箱置于带通风风扇（Western Washington University, USA）的隔音柜内。所有实验条件控制和数据采集均由Med PC IV软件（Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA）完成。

讨论

我们在此描述的实验程序可被视为复现程序，尽管从技术上讲这一说法并不准确，因为在渴求测试阶段之前，并未对与线索相关的压杆行为进行消退。在典型的复现程序中，与奖赏相关联的线索引发的反应会先经过消退，随后通过非条件性地给予奖赏（奖赏启动诱导的复现）或施加应激刺激（如足底电击，即应激诱导的复现）使其“复现”¹¹。仅对压杆行为进行消退后再次提供线索（步骤2.3.1）是最接近复现程序的操作。然而，我们所描述的程序可用于测量针对与蔗糖配对线索的目标导向反应。从操作定义上讲，这种行为即为线索增强的“渴求”行为，可能与复吸行为相关^4,12-14。

与无线索灭绝后接线索接触程序（第2.3.1项）相比，带线索灭绝程序（第2.3.2项）具有一些实际优势。采用后一种方法时，部分大鼠在六次训练 session 内无法达到灭绝标准，因而需要额外增加一次灭绝训练 session。相比之下，2 h 带线索灭绝程序为渴求评估提供了可预测的时间框架，因此更适用于需要在不同受试者和实验条件下保持自我给药环境暴露一致的研究设计。此类研究的一个实例是：在渴求测试 session 结.......

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
富集笼	Quality Cage Company	FH-36½T-N
操作条件箱	Med Associates, Inc.	MED-008-CT-B3
SCH 23390	Sigma-Aldrich	D054