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的的膀胱测压小老鼠:A膀胱Chemosensation研究的使用

DOI:

10.3791/3869

August 21st, 2012

In This Article

Summary

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膀胱测压是一种有效的技术来测量小动物的膀胱功能。膀胱是连续输注速率控制,而通过膀胱内灌注导管用于排尿的尿道自由。这允许重复填充和排空的膀胱,记录膀胱内压和排尿量。

Protocol

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1。实验动物

  1. 动物(小鼠,大鼠)被安置在一个专门的动物设施,12个小时光暗周期和自由采食获得水和食物颗粒标准。这两种动物的年龄和性别,是重要的参数,根据需要,应该标准化。我们通常进行膀胱内压在10 - 12周龄雌性动物5,6。
  2. 所有的动物进行了实验,根据与欧洲联盟共同体理事会准则和当地的伦理委员会的批准。

2。麻醉

  1. 异氟醚麻醉用于执行小的外科手术,因为它很容易的剂量,由于其短的半衰期。适当的废气清除,必要时使用异氟醚。
    1. 动物被放置在一个封闭的盒子,用异氟烷在纯氧气中的5%(1升/分钟)毒气。
    2. 诱导后,麻醉在适当的升埃维尔是由一个小的掩模(切口10毫升注射器)由0.8 - 1升/分钟氧气与1 - 1.5%的异氟烷​​维持。
  2. 对于小鼠,氨基甲酸乙酯麻醉过程中使用功能的录音(见"红外线)。乌拉坦麻醉期间使用的功能的录音,因为,在大多数其他麻醉药相反,排尿反射不抑制该麻醉剂4。氨基甲酸乙酯1.2克/公斤体重,皮下给药(SC)的前60分钟开始的录音。如果有必要,以获得适当的麻醉所需的剂量的氨基甲酸乙酯可通过施用额外的剂量(0.1克/公斤)皮下滴定。然而,应当指出,该额外的麻醉可能会改变排尿效率,进而排尿频率7,8。因此,应密切....

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Discussion

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这里介绍的允许性膀胱测压技术在动物模型体内测量膀胱功能执行。老鼠可能是最常用的动物模型。的小鼠更难以处理,但提供的优势,利用基因操纵的动物。由于技术难度使用意识的小鼠,这往往是非常活跃的松动植入导管在腹腔内的压力,可能会影响膀胱内压力的变化导致的,我们建议在全膀胱压力,让他们用氨基甲酸乙酯麻醉协议。当然,有镇静小鼠的好处,对麻醉药的影响进行权衡。因此,聚氨酯可以有一个显着的影响排尿后的残留量7,8。因此,我们等待,直到我们有一个稳定的麻醉程度,才开始我们的录音和干预。

研究人员应该考虑吨他差异雄性和雌性啮齿动物排尿13。此外,动物的年龄是非常重要的。我们进行的动物膀胱内压在10 - 12周龄。所有的实验应该在一个平静的环境,尤其是在使用有意识的动物。为我们的动物模型中已经描述了一些输注速率。我们通常使用20μl/ min的小鼠和100μl/ min的鼠只输注速率。

如上所述,人类和啮齿类动物的排尿功能的差异显着。例如,ATP在小鼠和大鼠逼尿肌收缩的主要贡献者,而.......

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Disclosures

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没有利益冲突的声明。

Acknowledgements

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这项工作是由比利时联邦政府(IUAP P6/28),研究基金会,富兰德(FWO)(G.0565.07和G.0686.09),安斯泰来欧洲基金会奖2009年和鲁汶大学研究理事会的拨款,支持(,EF/95/010 GOA 2009/07和PFV/10/006)。 PU,我们正在研究基金会龙龙(FWO)的博士后研究员。 MB是居里夫人研究员。 DDR的基本临床研究员的FWO。

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
的试剂的名称 企业名称,公司, 目录编号 评论
聚氨酯聚氨酯,Sigma-Aldrich公司 315419 2B组致癌物质
异氟醚 Isoba,先灵葆雅动物保健
聚乙烯导管 Intramedic聚乙烯管材PE50,Becton Dickinson公司 427411
手术显微镜 OP-MI 6,卡尔·蔡司 OP-MI 6
荷包缝合普理灵,爱惜康6/0 8610H
筋膜和皮肤缝合 Ethilon 4/0或5/0,爱惜康 662G或661G
术后镇痛 Temgesic,先灵葆雅动物保健大鼠0.05毫克/千克的剂量
扩音器 78534c显示器,惠普
分析天平和平衡的数据采集软件 FZ 300I,A&D FZ-300I
输液泵泵33,哈佛装置 HA33
膀胱测压记录系统 DATAQ仪器,DI-730的系列和Windaq /精简版 DI-730-USB Windaq /精简版
温度注册福禄克52 KJ温度计 52 KJ
压力传感器爱德华生命科学,压力监测组 T322247A

References

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Everaerts, W., Gevaert, T., Nilius, B., De Ridder, D. On the origin of bladder sensing: Tr(i)ps in urology. Neurourol. Urodyn. 27, 264-2673 (2008).
  2. Fry, C. H. Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction. Neurourol. Urodyn.

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CystometryBladder ChemosensationIntravesical PressureCatheter ImplantationRodent ModelsVoiding FrequencyTRPV1 KnockoutTRPA1 KnockoutMustard Oil InfusionPressure Transducer

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