训练一种复杂的显微外科技术：大鼠颈总动脉中植入颈外静脉移植物

摘要

新生内膜增生是动静脉化静脉狭窄的主要原因。我们提出一种新方案，采用套管技术将Sprague Dawley大鼠的右侧颈外静脉移植至颈总动脉。在实施安乐死的时间点，动物的存活率为100%。

摘要

新生内膜增生是动静脉化静脉狭窄的主要原因之一，而静脉狭窄在冠状动脉旁路移植术、外周动脉旁路移植术以及动静脉瘘中具有重要意义。^1-5 采用套管技术将静脉移植物植入颈总动脉的实验方法已被应用于多个研究项目中，以探讨新生内膜增生的病因及其治疗策略。^6-8 套管可防止血管吻合口重塑，并在移植物内诱导产生湍流，从而促进新生内膜增生的发生。

使用上腔静脉移植物是一种已建立的用于静脉动脉化实验的小动物模型。^9-11 本实验方案参考了Zou et al. 首次描述的颈静脉移植物移植技术⁹，以及其他研究者提出的方法。^12-14 然而，这些已发表的小动物实验方案较为复杂。

为了简化操作流程并最大限度减少所需实验动物的数量，本文提供了一套通过视频培训的详细手术操作方案。该视频可帮助初学者外科医生同时掌握套管技术和静脉移植术。在此，将21只雌性Sprague Dawley大鼠的右侧颈外静脉以套管技术移植至颈总动脉，大鼠被均分为三组，分别于术后第21天、第42天和第84天处死。值得注意的是，由于采用的是自体移植，无需供体动物。在处死时间点，动物的存活率为100%。此外，前10只手术动物的移植物通畅率为60%，其余11只动物的通畅率为82%。处死时的血流速率为8±3 ml/min。总之，该手术方案显著简化、优化并标准化了这一复杂操作，为初学者提供了简单、分步的指导，并解释了可能遇到的困难，从而帮助其快速掌握技术，避免不必要的实验动物牺牲。

方案

1. 实验动物

1. 获得当地伦理委员会批准将要开展的所有实验，批准过程需符合动物保护FELASA指南。
2. 使用可从任何商业育种商处购买的雌性Sprague-Dawley大鼠（例如 Charles River Wiga GmbH，德国苏尔茨费尔德）。共使用21只动物，分为三组，每组7只，分别在术后3周、6周和12周处死。购买时动物应为12周龄，体重250–300 g。
3. 将动物饲养在环境温度受控的房间内，保持室温为 21 °C，60% 相对湿度，12小时光照-黑暗循环，自由摄食和饮水。

2. 麻醉与手术准备

1. 使用与麻醉机相连的有机玻璃箱诱导全身麻醉，设置氧气流速为1 L/min，并使用含5%异氟烷麻醉气体的蒸发器。
2. 动物深部感觉反射消失后，立即通过异氟烷挥发罐以1.5%浓度维持麻醉。
3. 将大鼠仰卧位固定于恒温加热板上。
4. 使用脱毛膏去除每只动物从下颌角至其下方2 cm范围内的毛发，以准备手术区域 胸骨柄.
5. 通过关注手术区域、动物体表准备区域以及外科医生的前方区域，准备无菌手术环境：
   • 用消毒剂清洁实验台面。
   • 通过多次使用外科擦洗液准备切口部位（例如 氯....

讨论

在颈总动脉中植入外颈静脉移植物是一种复杂的显微外科技术。本视频可帮助初学者外科医生以最短时间掌握该技术，同时减少实验动物的浪费。

吸入麻醉是该手术的最佳选择，因为它可避免麻醉过深，易于控制，并能为外科医生提供充足的手术时间。此外，与小鼠相比，大鼠作为实验动物具有合适的体型，使此类复杂外科技术的操作更为简便。

采用套管技术的优点在于能够吻合不同管腔直径的血管。必须结扎套管外翻血管的完整周径，以防止再灌注后出血。该模型非常适合模拟高血流速度和低剪切应力的血流动力学状态，并用于研究影响新生内膜增生的机制。套管可防止血管吻合处重塑，并在移植物内诱导湍流，从而促进新生内膜增生的发生。

为防止血栓形成，必须将静脉移植物结扎线2放置在合适的位置，以避免血液与固定动脉的结扎线1发生接触（图3）⁹。按照推荐方式结扎静脉移植物可将血栓事件的发生率限制在12%-13%，血管闭塞的比例则更低¹⁵。正如手术视频中所示，精.......

材料

本文使用的材料清单

姓名	公司	目录编号	评论
黑色编织丝线 7-0	Ethicon 产品	892100
Vicryl 3-0	Ethicon 产品	J285G
Vicryl 4-0	Ethicon 产品	J284G
Portex 非无菌尼龙管 0.75 mm，0.94 mm 细径聚乙烯（聚乙烯）管	Portex 英国	800/200/175/100
异氟烷 5%			任意通用品牌
肝素			任意通用品牌
0.9% 生理盐水			任意通用品牌
布托啡诺			任意通用品牌