Abstract
İn vivo biyomedikal araştırma klinik ilerlemeler in vitro bulgular çevirmek için çok önemlidir. Sınırlı kaynaklarla Küçük akademik kurumlar neredeyse imkansız oluşturmak ve araştırma için tipik kemirgen tesisleri korumak için bulabilirsiniz. Balığı araştırma farmakoloji, fizyoloji, geliştirme ve genetik çalışmalarda in vivo araştırmalar için önemli bir alternatif olduğu kanıtlanmıştır. Bu makalede, fonksiyonel Zebra balığı tesis kolay ve uygun fiyatlı bir şekilde inşa edilebileceğini göstermektedir. Biz böyle bir tesis asgari araç ve uzmanlığı ile ilgili bir iş günü içinde inşa edilebileceğini göstermektedir. Bu çalışmada inşa 27 1.8 L akvaryum Zebra balığı tesisin maliyeti yaklaşık 1500 $ oldu. Biz 3 ay boyunca bir ilk çalışma 150 balık kolonisinin bakım 1.000 $ olduğunu tahmin. Araştırma önermektedir için getirilmiştir Bu proje katılan öğrenciler, zebrafish aquaculturing için.
Introduction
İn vivo modeller bunlar sistem ve organizma düzeyinde tercüme edilecek in vitro araştırma izin beri kapsamlı biyomedikal araştırma esastır. Örneğin, küçük memeliler, yani kemirgenler, araştırma ilaçların geliştirilmesinde ve mevcut ilaçların geliştirilmesi için gerekli olduğu kanıtlanmıştır. Ancak, karmaşıklık (mali ve lojistik) neredeyse imkansız oluşturmak ve deneme küçük araştırma akademik kurumlarda teklif için kemirgen tesisleri korumak için yapmak olabilir. Bununla birlikte, in vivo araştırmalar daha az karmaşık, lojistik gerektiren diğer hayvan türlerini kullanarak gerçekleştirilebilir. Balığı (Danio rerio) başarılı bir şekilde genetik, geliştirme, patofizyolojisi ve farmakoloji 1,2,10,11,12 üzerinde çalışmak için in vivo bir modeli olarak kullanılmıştır. deney için zebrafish ev için gerekli imkanları r ile karşılaştırıldığında nispeten basit ve daha az pahalıOdent tesisler. Kim ve ark. 3 son zamanlarda detaylı parça ve işçilik maliyetlerini hem de içeren yaklaşık 1500 $ için inşa edilebilir 80 tankı Zebra balığı konut sistemi tarif var. Bu ticari tedarikçi herhangi bir sayıda bir hazır, 80 tankı sistemi satın almak için gerekli olacağını yaklaşık 8500 $ tezat duruyor. Ancak, Kim ve arkadaşları tarafından verilen açıklama. Balık araştırma acemiler için takip etmek karmaşık ve zor olabilir. Biz bir Zebra balığı tesis 1.500 $ bir yatırım için basitleştirilmiş bir şekilde inşa edilebilir inanıyoruz.
küçük akademik kurumlarda in vivo tesisin kurulması okudukları fakülte daha güçlü ve kapsamlı araştırma üretmek için ek bir araç sağlar. in vivo sonuçları ile desteklenmektedir in vitro veriler, genellikle in vitro yaklaşımlar sadece kullanılarak elde edilen verilerin daha kapsamlı biyomedikal araştırmalar üretmek. Bu nedenle,in vivo araştırma tesisi uygulanması önemli ölçüde genel araştırma çalışmalarında kurum başarısını artıracaktır (dış finansman, vb araştırma, yayınlar, iletişim, peşinde öğrenci maruz kalma.).
Bu çalışmada açıklanan gibi bir Zebra balığı tesisin yapımı finansal kez daraltıcı sırasında (in vivo araştırma tesisleri olmadan veya kurumlar) sınırlı imkanlarla araştırma, akademik kurumlar için idealdir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
NOT: Bu protokoller Presbyterian College IACUC yönergeleri izleyin.
Tablo 1 Listelenen 1. Edinme Malzemeler.
2. Üreticinin Talimatına göre 5 Raf Chrome'u birleştirin. Bu Tesisi evine kullanılacaktır.
3. Su haznesini ve filtrasyon sistemi (Şekil 1A ve 2) Construct.
- Bir kılavuz olarak Şekil 1A kullanarak, nihai montaj konumunu ve boyutunu belirlemek için 18 galon kova, pompa, filtre ve UV lambası düzeni.
- Parçalar ortaya koydu sonra, ölçmek ve montaj için gerekli uzunluğu ¾ "PVC boru kesti. Özel alan ihtiyaçları ve kısıtlamalara göre tüm boru uzunluklarını Vary.
- PVC astar ve çimento kullanarak daha önce düzenlendiği şekilde boru ve ek parçaları birleştirin, aşağıda (3.3.2 ve 3.3.3) bkz.
- Kum zımpara ile boru kesme kenarları dokunmatik An pürüzsüz olana kadard hiçbir enkaz yoktur.
- Başbakan boru dış ve PVC astar gelen dahil çubukla alınan PVC astar ile bağlantı içinde.
- Dahil çubukla kullanarak borunun dışına PVC çimento uygulayarak birlikte boru ve uydurma çimento. PVC çimentolama gereken tüm adımları tekrarlayın.
- Raf yapımında bir tarafına 18 galonluk kova yerleştirin.
- Rezervuar tankının yan bir bölme konektörü takın.
- Bölmeye ¾ "PVC boru takın.
- ¾ "Bir ¾ kullanarak pompa girişine boru" diğer ucunu takın uydurma yapmak dişli.
- İki 90 derecelik dirsek ve ¾ "PVC boru kullanılarak pompa için filtreleri bağlayın.
- Sudaki klor ve kimyasal seviyeleri enkaz süzmek ve azaltmak için bir aktif karbon filtreleri ardından bir kağıt filtre kullanın.
- Filtreler accordi UV lambası bağlayınüreticinin talimatlarına ng.
- Tel bağları kullanarak rafa ilk rafın üst tarafına pompa ve filtre sistemi takın. Seçilen raf / raf boyutu ve düzeni göre montaj ve bağlantı sırasını Vary.
- Pompa ve filtre sistemi monte ve raf bağlı kez su deposuna su galon başına 1 BioBall ekleyin.
4. ana besleme hattı (Şekil 1B ve 2) Construct.
- Tedbir ve ana kaynağı UV lamba bağlamak için PVC boru "¾ bir parça kesti
- UV filtresi gelen PVC egzoz ¾ "için tee bağlayarak ana besleme hattı başlatmak için PVC tee" ¾ kullanın. .
- Sistemin bakımı yıkama için bir boşaltma olarak hizmet etmek üzere, PVC tee altına bir açma-kapama valfi ekleyin.
- PVC ¾ "ölçme ve kesme PVC tee" ¾ üst ana besleme hattı başlayınİstenilen uzunlukta boru raf raf her besleme boruları sağlamak.
- Install ¾ "raf her raf girecek yatay çizgiler PVC tee.
- İsteğe bağlı olarak (ve önerilen), bir ekleme ¾ "açma-kapama valfı, her raf besleme hattı için her bir raf izolasyonu ve sistemin modüler tasarımı için izin verir.
- Üst rafta çizgi basınç düşürme gibi ¾ "PVC boru kullanın. Bu hat raf arkasında çalışıyorsa, depolama için bu raf kullanın. Ana egzoz hattı, bir ¾ ile (Şekil 1B) "açma-kapama vanası çizgiyi basınç azaltma End.
- Yukarıdaki adımlar, başbakan tamamlanmış ve rezervuar ve filtrasyon sistemi inşa sırasında önceden yapıldığı gibi birlikte PVC boru çimento edildikten sonra.
5. Ana egzoz hattı (Şekil 1C ve 2) Construct.
- Raf f diğer tarafında ana egzoz hattının düşey uzunluğunu çalıştırınana besleme hattı rom. Her raftan balık tankları üst ve drenaj hatlarında ana besleme hattı almak için bu dikey hat için 2 "PVC boru kullanın.
- "Dikey ana egzoz hattı için PVC boru ve 2 kullanın" 2 parçaları Kes her raftan balık tankı boşaltma hatları almak için PVC tee. Bir sünger filtre üzerinde dönüştürülmüş su çıkarmak için stok tankı ana egzoz hattı End.
- 2 "PVC boru parçaları tüm uzunluğu açılış bir inç kesin ve PVC balık tankları yatay drenaj hatları için tee dikey ana egzoz hattına takın.
- PVC kapağı 2 ", 2 yatay drenaj hatları" Cap.
- Başbakan ve gerekli parçaları (konektörler, meme veya dirsekler) kullanarak parçaları çimento.
6. balık tankları (Şekil 3) Construct.
- Matkap ile bir delik testere ile üst kenarının altına "balık tankı 1 arkasındaki delik" 1 1/8 kesti.
- Takın ve 90 derecesi 3/4 sıkın 'balık tankı egzoz borusunu oluşturmak için erkek adaptöre PVC dirsek dişli. Egzoz sistemi geçiyor zebrafish önlemek için tutma somunu vidalama önce ince örgü bir parça ekleyin.
- Tanklar arkasındaki boşaltma hattı açık uzaya egzoz borusu biten balık tankı yerleştirin
7. suyu sistemi Başlangıç
- Bu hazne için kullanılan gibi çeşitli kaplar olarak, sistem içinde bulunan su için miktarın üç katı ölçer. Bu su 48 saat süre ile klima oda sıcaklığında bekletin.
- Sisteme su ilave edin ve 3 gün, en az deveran etmesi.
- Kirletici tha sistemi kurtulmak için dolaşım ilk 3 gün boyunca şiddetle sistemde su değiştirint borular içinde bulunur.
- Marş zebrafish ekleyin ve azot döngüsü kurulan almak için izin verir. Tutarlı 7. pH Normale 1.8 L başına yedi zebrafish tutun ve Linbo 4 ve 6 McNabb tarafından önerilen sonları günde bir kez hafta içi günde iki kez onları beslemek ve.
- Nitrat Monitör (<75 mg / L), nitrit (<10 mg / L), ve amonyum balık ekledikten sonra ilk hafta boyunca her gün (0 mg / L), ve iki haftada bir kez istenilen seviyeleri düzenli su değişimleri ile muhafaza edilmiştir .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Pompa ve Flters Sistemi İnşaatı
Raf monte ve ilk adımı kurulduktan sonra pompa ve filtre sistemi inşa etmektir. Filtreler sistem pompasının bağlı ve kolay filtre bakım ve değişimi için izin veren ilk raf, alt seviyesinden bulunmaktadır. Benzer bir şekilde, UV lambası filtresi PVC boru ile bağlı olan ve gerektiğinde (Şekil 4A) ve UV lambası kolayca değiştirilmesine olanak tanımak amacıyla, plastik tel bağlar ile yerinde tutulur. Hemen bir kağıt filtre, aktif karbon filtre, ve bir UV lambası PVC boru aracılığıyla yüklenen pompayı takip. Bioballs nitrat için toksik amonyak atık dönüştürür bakterilerin büyümesi için bir yüzey temin etmek üzere bir tanka ilave edilir. Sistemde su galon başına bir BioBall bakteri oluşumuna imkan vermek için yeterli bir alandır. taşması durumunda bioballs rezervuar içinde kalır ve contamina şansı böylece plastik haznenin kapak takılabilirsiyon en aza indirilir. Bir taşma olayı çok olası olsa da, bir tahliye sistemi (haznenin üst kısmında bir boru drenaj ekleyerek) sisteme yapılabilir kolay bir ektir.
Ana Besleme Hattı İnşaatı
İkinci adım zebrabalıkları tankları (Şekil 4B) içerecektir her bölmeyi besleyecek ana su besleme hattını monte etmektir. Bu hat PVC boru parçası ile UV lambası bağlanır. Bu hat PVC tee ile rafa dikey ve yanal çalışır. T şeklindeki alt ucu tüm sistem için bir boşaltma valfı olarak görev yapacak PVC boru parçasını bağlamak için kullanılır.
dört bölmeye yatay çalıştırmak tankları besleyen ana hatları: Beşinci raf ikinci raf üst, üçüncü raf üst, üçüncü raf üst ve alt. İkinci, üçüncü ve dördüncü raf hatlarının üst balık tankları su sağlamak beri onlar midlin çalıştırmakrafları örn. Bu hatların her biri, tek tek bölmelerin kontrol sağlar tek bir hidrolik silindiri vardır.
Bir 9 noktası sulama manifoldu yatay çizgilerin ucuna tutturulur ve bu sulama esnek ¼ "boru (Şekil 4B) ile balık tanklara su. Sulama manifoldu her port kapalı yerleşik valfi vardır. Ayrıca, bir açma-kapama vanası kolay erişim ve su akış kontrolü için, balık tankı girişine yakın, her bağlantı noktasına takılı tüp sonuna yerleştirilir. boru kapağının içine delinmiş bir delik ile tankın içine eklenir. Bu sıkıca tanka yerleştirilen boru tutarak yardımcı olacaktır.
Beşinci rafın üzerinde çalışan hat bir basınç kesici olarak kullanılır ve tek bir açma-kapama vanası ile kontrol edilmektedir. Bu depolama için de kullanılabilir, böylece beşinci rafın arka çalıştırmak bu hat olması tavsiye edilir. Mai yanan hat raf tarafının orta hatta, bir PVC dirsek ve PVC boru parçası kullanarak geri getirilir çalışır ve daha sonra başka bir PVC dirsek ve bir parça kullanarak basınç kesici hattı olarak uzunlamasına (yatay) çalışır PVC boru. Basınç kesici hattı raflar diğer tarafında dikey çalışır ve (aşağıya bakın bu egzoz hattı, 2 "PVC boru yapılır) su rezervuar içine biter ana egzoz hattı biter.
Ana Egzoz hattının inşaatı
Üçüncü adım, su deposu yerleştirilir tarafında (Şekil 4C) de, rafa yanal çalışan egzoz sistemi, monte etmektir. Bu sistem 2 "PVC boru kullanarak ve basınç giderici hattından gelen suyu toplar ve balık tankından (aşağıda balık tankı yapımı bakınız) drene inşa edilir. Ana egzoz hattı, su yeniden içine raf üstündeki basınç kesici hattı bağlantı ve bitiş dikey çalışırservoir. Ayrıca, ana egzoz hattı PVC tee üzerinden ana egzoz hattına bağlamak yatay 2 "PVC borular aracılığıyla balık tanklarından drenaj alır. Bu yatay drenaj boruları balık tankları (aşağıya bakınız) süzülen suyu almak için 1 'uzunlamasına kesim var. Bu yatay drenaj hatları arkasında ve rafların alt parçaları üzerinde çalışmak ve süzülmüş su yerçekimi ana egzoz hattına çalıştırmak için izin veren bir küçük eğim var. Balık tankı boşaltma su sünger üzerine düşer ve enkaz filtreler böylece Sünger filtre pedleri yatay drenaj hatlarına ilave edilir. Bir bütün monte sistem Şekil 5'te resmedilmiştir.
Balık Tankları İnşaatı
Bir temsilci balık tankı Şekil 6'da gösterilmiştir. Balık tankı boşaltma satır sonu (egzoz hattında bölüm yukarıya bakınız) yatay drenaj hattına yerleştirilir. Bir tel örgü önlemek için akvaryum drenaj hattına eklenirtankın dışına yüzme gelen Zebra balığı. Bu özel tanklar kaçan balık önlemek ve aynı zamanda kirlilik fırsatları en aza kapakları var. Taşma oluşursa tankı kapakları yere düşen balık önleyecektir. Kapaklı Tanklar idealdir ama bir sistem daha sonra küçük bir delik tankının üstüne yakın delinmiş olabilir kapakları olmayan tankları içeren inşa halinde. Bu kaçmasını önlemek balık ise su kaçmasına izin verecektir.
İşleyen
Bir Zebra balığı koloni başka 3- 6 açıklanan mevcut ve yerleşik protokoller ile muhafaza edilebilir. Kısaca, bizim tesis yaklaşık 85 ml / dk (veya larva balık tankı için 45 ml / dk) sistem pompası, her yetişkin için akış hızını ayarlama (ya da larva balık tankı) sistem hacmi saat başına yaklaşık 75 kat dolaşmasına izin verir . Su kalitesi, aktif biyolojik filtrasyon ve küçük ölçekli su değişimi ile korunur (~ sistem hacminin% 5), gerektiği gibi. Günlük izlemepH, iletkenlik, çözünmüş oksijen (DO) düzeylerini ve sıcaklık sürekli koşulları tutmak için gereklidir. Kitler ticari pH ölçümü için kullanılabilir ve düzeyleri DO. İletkenlik metre de satın alınabilir. Günlük bu değişkenleri test etmek rezervuar su 250 ml kaldırmak ve analiz gerçekleştirmek için. pH değeri 7.2 de muhafaza edilmelidir DO 500 uS ve 1300 uS arasında en çok 6 mg ve iletkenlik olmalıdır. (Kaynak Burada) Sıcaklık 28.5 ° C 'de muhafaza edilmesi gerekir. Düzenli sistem bakım (3-4 hafta) yaklaşık% 30 su değişimi ve temizlik ve filtre pedleri ve kömür değiştirilmesini içerir.
Şekil 1: Bir Zebra balığı tesisin üç ana bileşen. A. Pompa ve filtreler sistemin ilk raf alt kısmında (bulunurraf) ve büyük besleme hattı ile su stok tankı bağlayın. B. önemli besleme hattı, UV lamba türer ve balık tankları içeren üç üst raflara su sağlamaktadır. Her bir raf kabini bağımsız olarak beslenir ve ayrı ayrı bir valf vasıtasıyla (açık veya kapalı) kontrol edilebileceğini not edin. Bu ana hattı da alt ucunda ana drenaj valfi vardır, ve üst ucunda ana egzoz hattına biten bir basınç rahatlatıcı hattı olarak devam eder. C. ana egzoz hattı basınç kesici hattan farklı su alır Balık tankı bölmeleri ve su stoku tankları içine biter. Her raf PVC borular ve uzunlamasına bireysel balık tankları su almaya açık bir balık tankı egzoz hattı olduğunu unutmayın. Bu satırlar biraz su ana egzoz hattına yerçekimi ile çalışmasına izin vermek için eğimlidir.Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 2:. Üç büyük monte bir Zebra balığı tesis bileşenleri ve kolayca fonksiyonel su stok tankı zaten bioballs olduğunu unutmayın. Ana egzoz hattına gelen su, su seviyesinin (netlik için bu şekilde tasvir değildir) yukarıdaki örgü üzerine yerleştirilen bir sünger filtre düşecek. Netlik ikinci raf gösterilen irrigator sadece 4 tedarik tüpleri vardır, tasvir sadece bazı balık tankları vardır, ve balık tankı egzoz hattı şeffaf olduğunu unutmayın. Raf her raf dokuz 1 L balık tankları tutun ve 9 liman duşu olabilir.
Şekil 3:. Balık tankı ünitesi balık tankı düzenli bir evcil hayvan mağazası edinilen ve A. balık tankı boşaltma sistemi arka tarafında 1 1/8 "delik tarafından inşa edilmiştir 2 L kapasitesine sahiptir. Tank, daha sonra 3/4 PVC dirsek L "3/4 kullanarak şekil" "PVC boru parçaları ters yerleştirilir". Bu drenaj sistemi balık tankları arkasında bulunan balık tankı egzoz hatlarının açık tarafına düşecek. B. Görüntü balık tankı boşaltma sistemine bir örgü kurulumunu gösteren. örgü egzoz hatlarına drene edilmesini zebrafish engeller.
Şekil 4: Bireysel parçalar yapımı. A. üç filtre ve pompa sistemi, sistemin alt raf üzerinde. pompası vasıtasıyla, üç mechan bağlıBir UV filtresi tarafından takip nik filtreler sistem su kirleticileri ortadan kaldırmak için. B. yatay besleme hattı her tanka taze su ve oksijen tedarik edecek bir 9 liman sulama manifoldu, biter. Her rafa besleme hattı temizleme ve karantina amaçlı her rafa su durdurmak için kullanılabilecek bir açma-kapama valfi vardır. C. balık tankı egzoz hattı dolaşımını yeniden girmek için ana egzoz hattına boşaltır. Basınç tahliye hattı da ana egzoz hattına boşaltır.
Şekil 5:. Tamamlanan sistem tamamlanmış sistem içerdiği dolaşım sistemi için bir pompa ve filtreler sistemi, bir ana düşey besleme hattı, her raf için yatay bir besleme hattı, bir tank egzoz hattı, bir basınç tahliye hattı ve bir ana egzoz hattı içerir .
Şekil 6:. Temsilci balık tankı akvaryum sisteminde yatay drenaj hatları ile bağlanacak bir tahliye hattı içerir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu makalenin temel amacı fonksiyonel Zebra balığı tesisin yapımı karmaşık değildir ve minimal inşaat bilgisine sahip acemi balık araştırmacılar tarafından inşa edilebilir olduğunu göstermektir. Ayrıca, bu makalede, bu fonksiyonel Zebra balığı tesisi için malzemeler yerel evcil hayvan besleme mağazalarda veya donanım mağazalarından kolayca ve uygun maliyetle elde edilebilir olduğunu göstermektedir. Tüm malzemeler ve aletler sisteminin inşasını elde edilmiş ve balık tankları yaklaşık bir iş günü sürer kez. 72 saat ilk çalıştırma belirlenecek tür sızıntı veya düşük su basıncı gibi sistemde herhangi bir başarısızlık, izin verir. Sistem içinde kirletici dolaşımdan kaldırılması için ilk çalıştırma da izin verir. Örneğin, PVC yapıştırıcı dolaşım ilk birkaç saat boyunca kaldırılır zararlı organik malzeme ihtiva edebilir. Sistem izin verir ve mainten için ses ve su değişimi ayarlanmasını kolaylaştıran bir ana drenaj valfi vardır ance. Ayrıca, sistem, aynı zamanda, su basıncının ayarlanmasını kolaylaştırır bir basınç giderici hattı vardır. Su basıncı düzenleme olanak verdiği için sadece bir ya da iki bölme (raf) kullanılır, bu hat kullanılır.
Tesis bireysel araştırmacıların kapasite ihtiyaçlarını karşılamak için 1, 2 veya 3 bölmelerin kullanımı (1.8 L 36 balık tankları) için izin tasarım modüler olduğunu. Her bölmeye yerleştirilen kumanda valfları sistemin farklı kısımlarına izolasyonunu kolaylaştırmak. Bu valf sistemi, potansiyel enfeksiyon yayılmasını önlemek için, ve bölmelerin sistemin temizlenmesini kolaylaştırmak için de yararlıdır. Buna ek olarak, her balık tankı su iki vana, 9 liman irrigator birer ve balık tankı girişinde esnek boru de birine sahiptir. Bu çift valf sistemi su basıncı ince ayar sağlar ve aynı zamanda temizlik prosedürlerini veya balık çıkarma veya manipülasyonunu kolaylaştırmak.
t "> amonyak, nitrit ve nitrat düzgün bir dokümantasyon tesisin düzgün fonksiyonu için gereklidir. Onlar büyüme nitrifikasyon bakterileri için yeterli yüzey sağlamak beri Bunun için, bioballs önemlidir. Balık koloni istikrarlı sonra, tesis can kolayca daha büyük veya daha küçük balık tankları kullanmak için modifiye edilebilir. Ayrıca, tesis literatürde 5 mevcut protokoller aşağıdaki zebrafish üremek için modifiye edilebilir. Ayrıca, tesis sisteminin yeteneklerini genişletmek için diğer modülleri veya rafları eklemek için modifiye edilebilir .Ek bir oksitleyici eklemek için bir ihtiyaç vardır, böylece tank içine tatlı su akışı yeterli taze oksijen içerir. Su haznesinde oluşan hava değişimi oksijen yeterli bir kaynaktır. Daha büyük tanklar kullanılması halinde, ilave bir oksijen kaynağı ilave edilebilir. Ayrıca tankın içine taze su akışı olmadan balık boğmak olacağını kaydetti, bu yüzden hayati gerektiğini su akışı byakından hiçbir şey sağlamak için izlenen e su hatları engelliyor. Suyun sıcaklığı 28.5 ° C 'de muhafaza edilmesi gereklidir. Sabit bir sıcaklık sistemi 28.5 ° C 'de muhafaza edildiği oda sıcaklığına sürdürerek gerçekleştirilebilir. Seçenek olarak ise, bir akvaryum ısıtma kaynağı sabit bir sıcaklığını muhafaza etmek için temin edilebilir. Su kalitesini korumak tutarlı deneysel sonuçlar için gereklidir. Deneysel koşullara göre tam su kalite parametrelerini belirlemek için birçok kaynak vardır.
10 gün ve daha sonra yeniden kullanmadan önce% 70 alkol ile püskürtülür - Balık tankları her 7 temizlenir. Ayrıca krom raf temizliği ve pas önlemek ve kurmak için bu noktada kurutulmuş olması önerilmektedir. Kontaminasyon belirtileri gözlenirse, bireysel tanklar% 2 çamaşır suyu çözeltisi ile dezenfekte edilir 8. Genel Sağlık enfeksiyon belirtileri özel dikkat izlenir (deri ülserleri, şişme, exolpthalmia, kapalı renk vb.), gaz kabarcık hastalığı (nedeniyle) süpersatüre gaz konsantrasyonları, su sıcaklıklarında hızlı değişimler, sıhhi tesisat sistemi problemleri), solungaç hiperplazi (suda amonyak, bakır, çinko veya aktif chorine yüksek seviyede (karın duvarı iter nedeniyle kadın yumurta tutma) veya yumurta ilişkili enflamasyon ve fibroplazi (nedeniyle C vitamini eksikliği) skolyoz.
Bu tesisin yapımı esnek ve daha küçük ya da genişletilmiş sistem için izin verir. Temel yapı fikirleri alarak, bu tesisin çeşitli boyutlarda temel araştırma ihtiyaçlarına uyacak şekilde düzenlenebilir. İnşaat kurum tarafından değişebilir Çünkü, protokolde en kritik adım 72 saat, ilk çalıştırma ve inşaatın ilk haftasında amonyum, nitrat, nitrit ve seviyeleri günlük izlenmesidir. Mükemmel su kalitesi balık sağlığını korumada yardımcı olacaktır. Uygun bir balık syste için geçerli protokollerin çoğum bir açık hava su akışı 3 gerektirir. Açık havadan korumalı suya sahip su kirliliği ve buharlaşma şansını en aza indirir. Kapalı bir sistemde Bakım ortak açık sistemlerle karşılaştırıldığında çok azdır.
Sorunlar tesisin yapımında ortaya çıkarsa (vb kaçakları, düşük su basıncı,.) Bir sadece tesiste endişe alanı kesilip ve aynı adım adım bir şekilde parçaları değiştirerek bir çimentolu boru yerine, yukarıda sıralanan . Bu sistem sayesinde fark bırakılırsa balık için tehlikeli olabilir küçük kaçaklar, büyük su kaybına karşı savunmasız olabilir. Minimum yatırım için bir şamandıra kapatma cihazı su seviyesi güvenli bir eşiğin altına düştüğünde algılar ve sistem kapanacaktır. Sistemin yakından takibi mevcut değilse, bu gerekli olabilir. Doğru değişiklikler ile, bu sistem hareketlilik eksikliği yanında yüzleri çok az sınırlamalar vardır. Bu sistemin kurulması sonrabazı parçaların kesilmesi ve yeni bir konuma bunları recementing olmadan hareket etmek çok zordur ed. Bu hareketlilik sınırlama sistemi ideal bir çalışma alanında muhafaza edilmesi gerekir anlamına gelir. Hareketlilik isteniyorsa esnekliğini artırmak için yapılabilir küçük modifikasyonlar bulunmaktadır. Yanal, her arz, basınç tahliye hattı, pompa taburcu başında bir birlik ekleyin ve boşaltma vanası üzerinde. Tahliye hatları kuru donatılmış yerine yerine çimentolu olabilir. Pompa bölümüne esnek kaplin ekleme de hareketlilik yardımcı olacaktır. Bu, ek bir
Bu sistemin basit yapım ve bakım literatürde bulunan mevcut protokoller küçük araştırma kurumları 1,2,10-12 mevcut olduğu anlamına gelir. Bakım bu lisans öğrencisi araştırma için ideal bir sistem yapmak basittir. Bu sistem aynı zamanda, bağımsız araştırma ve öğretim laboratuarları için mükemmel.
Sonuç olarak, bu tür birTesis, uygun fiyatlı inşa etmek kolay, ve in vivo deneyler için işlevseldir. Bu tesis, sınırlı kaynaklar ve sınırlı hayvancılık alanı kurumlar için idealdir. Zebra balığı araştırma farmakoloji, fizyoloji, geliştirme, hatta genetik çalışmalar da dahil olmak üzere çalışmaların birden türleri için kullanılan bir alandır. Aslında, mevcut mutant veya transgenik zebrafish sayıda biyomedikal hemen hemen tüm alanlarında araştırma yenilikçi çizgiler destekler. Ayrıca, bu sistem küçük ağırlıklı lisans kurumlarında araştırma olanakları ve bilim dalları için sınıf deneyimlerini geliştirmek ve biyomedikal bilim adamlarının yeni nesil ilham için kullanılabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar bu kağıt için herhangi bir çıkar çatışmalarını beyan ederim.
Acknowledgments
Yazarlar Araştırma ve İşbirliği (SPARC) Ödülü Küçük Eczane Ödülleri aracılığıyla bu projenin mali destek Eczacılık Presbyterian Koleji Okulu Araştırma Ofisi teşekkür etmek istiyorum. Yazarlar Bay John Smink, Su Hayvancılık Araştırma Laboratuvarı Müdürü, Clemson Üniversitesi, Clemson, onun teknik yardım yazması revizyonu için SC teşekkür ederiz.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Item | Brand | Quantity | |
| 74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit | Style Selections | 1 | |
| 18-Gallon General Bucket/Tote | Centrex Plastics: LLC Rugged Tote | 1 | |
| 6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord | Master Electrician | 1 | |
| 9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp | Smartpond | 1 | |
| Whole House Water Replacement Filter | Whirlpool | 6 | |
| Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing | Whirlpool | 2 | |
| Thread Seal Tape | William H Harvey | 1 | |
| 8-fl oz LO-VOC PVC Cement | Oatey | 1 | |
| 8-fl oz LO-VOC Primer | Oatey | 1 | |
| 1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing | Mister Landscaper | 1 | |
| 1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve | Mister Landscaper | 33 | |
| 9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter | Mister Landscaper | 6 | |
| Drop-In Filter with House | Whirlpool | 6 | |
| 2-in Dia 90-Degree PVC Elbow | LASCO | 3 | |
| 2-in Dia 90-Degree Tee | LASCO | 3 | |
| 3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow | LASCO | 15 | |
| 3/4-in Dia PVC Adapter | LASCO | 7 | |
| 3/4-in Dia PVC Tee | LASCO | 12 | |
| 2-in Dia PVC Cap | LASCO | 3 | |
| 1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter | LASCO | 2 | |
| 3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve | American Valve | 5 | |
| 1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter | Lasco | 8 | |
| 3/4-in Dia PVC Cap | Lasco | 1 | |
| 2-In x 5-Ft Pvc Pipe | Charlotte Pipe | 4 | |
| ¾-In x 10-Ft Pvc pipe | Charlotte Pipe | 3 | |
| 11/16x1-7/80 PVC ring | SXT | 10 | |
| ½” PVC male adapter | SXT | 1 | |
| ¾” PVC coupling | SXT | 1 | |
| ½” PVC female adapter | SXT | 1 | |
| link | |||
| 1.8 L Dual Beta Keeper | Top Fin | 27 | |
| ¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) | SXT | 28 | |
| 90-degree ¾” threaded PVC elbow | SXT | 27 | |
| Fine Mesh | N/A | 1 yard | |
| Bulkhead Connector | N/A | 1 | |
| Hacksaw | N/A | 1 | |
| Drill | N/A | 1 | |
| Hole saw | N/A | 1 | |
| Adjustable Wrench | N/A | 1 | |
| Pliers | N/A | 1 | |
| Tape Measure | N/A | 1 | |
| Safety Glasses | N/A | 1 | |
| Work Gloves | N/A | 1 |
References
- Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , 3rd ed, Academic Press. New York, New York. (2010).
- Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. Strategic Conference of Zebrafish Investigators Poster Presentation, 2013, Asilimar, CA, , (2013).
- Kim, S., Carlson, R., Zafreen, L., Rajpurohit, S. K., Jagadeeswaran, P.
- Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
- Avdesh, A., et al. Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction. J Vis Exp. 69, 4196 (2012).
- McNabb, A., Scott, K., Ochsenstein, E., Seufert, K., Carl, M. Don't be afraid to set up your fish facility. Zebrafish. 9 (3), 120-125 (2012).
- Garcia, R. L., Sanders, G. E. Efficacy of cleaning and disinfection procedures in a zebrafish rerio) facility. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (6), 895-900 (2011).
- Rivas-Boyero, A. A., et al. Pharmacological characterization of a nociceptin receptor from zebrafish (Danio rerio). J Mol Endocrinol. 46 (2), 111-123 (2011).
- Sanchez-Simon, F. M., Zhang, X. X., Loh, H. H., Law, P. Y., Rodriguez, R. E. Morphine regulates dopaminergic neuron differentiation via miR-133b. Mol Pharmacol. 78 (5), 935-942 (2010).
- Velasco, E. M., Law, P. Y., Rodríguez, R. E. Mu opioid from the zebrafish exhibits functional characteristics as those of mammalian mu opioid receptor. Zebrafish. 6 (3), 259-268 (2009).
