已对视频《通过腺病毒-Cre靶向导管上皮启动转移性乳腺癌:一种新型乳腺癌转基因小鼠模型》(Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer)作出更正。更新了实验方案的第3.1、3.3.2、3.4和4.7节,并更新了材料表。
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2014年10月20日
已对视频《通过腺病毒-Cre靶向导管上皮启动转移性乳腺癌:一种新型乳腺癌转基因小鼠模型》(Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer)作出更正。更新了实验方案的第3.1、3.3.2、3.4和4.7节,并更新了材料表。
已对视频《通过腺病毒-Cre靶向导管上皮启动转移性乳腺癌:一种新型乳腺癌转基因小鼠模型》(Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer)作出更正。更新了实验方案的第3.1、3.3.2、3.4和4.7节,并更新了材料表。
第3.1节实验方案已更新,原内容为:
3.1) 将腺病毒浓缩病毒液分装,每份含 4 × 108 pfu,于 -80°C 冻存,每份可为 16 只动物注射,每只注射 3 ml,含腺病毒颗粒 2.5 × 107 pfu。
至:
3.1) 将浓缩的腺病毒原液分装保存于 -80°C,每份含 4 × 108 pfu,足以向 16 只动物各注射 3 µl,每只注射量为 2.5 × 107 pfu 的腺病毒颗粒。
第 3.3.2 节实验方案已更新,原内容为:
取含有 4 × 108 pfu 腺病毒-Cre 的等分试样,加入足量无菌水中的 3% 蔗糖溶液,定容至终体积 10 ml。向病毒液中加入 34 ml MEM,轻轻混匀。然后加入 4 ml CaCl2 溶液,轻轻混匀,并在室温下孵育 15–20 分钟。
至:
取含有 4 × 108 pfu 腺病毒-Cre 的等分试样,加入足量无菌水中的 3% 蔗糖溶液,调整终体积至 10 µl。向病毒液中加入 34 µl MEM 培养基,轻轻混匀。然后加入 4 µl CaCl2 溶液,再次轻轻混匀,并在室温下孵育 15–20 分钟。
第3.4节实验方案已更新,原内容为:
每次注射前,轻轻弹击离心管,确保病毒颗粒充分混匀。抽取3 ml(2.5 × 107 将病毒颗粒(pfu)注入10 ml注射器中,并准备小鼠进行导管内注射。
至:
每次注射前,轻轻弹击离心管,确保病毒颗粒充分混匀。吸取 3 µl(2.5 x 107 将病毒颗粒(pfu)注入10 µl注射器中,并准备小鼠进行管内注射。
第4.7节实验方案已更新,原内容为:
当针头正确插入乳腺导管后,用持注射器的手的拇指轻轻推动注射器活塞,注入3 ml病毒沉淀物(含2.5 × 107 pfu的腺病毒-Cre)。随着液体注入,乳头应出现轻微膨胀。
至:
当针头准确插入乳腺导管后,用持注射器的手的拇指轻轻推动注射器活塞,注入3 µl病毒沉淀物(含2.5 × 107 pfu的腺病毒-Cre)。随着液体注入,乳头应出现轻微膨胀。
材料表中“备注”部分的第15项已更新为:
10 ml 注射器,RN 系列,每次使用前后均需进行高压灭菌。用 PBS 和 75% 乙醇清洁。
至:
10µl 注射器,RN 系列,每次使用前后均需高压灭菌。用 PBS 和 75% 乙醇清洗。
已对视频《通过腺病毒-Cre靶向导管上皮启动转移性乳腺癌:一种新型乳腺癌转基因小鼠模型》(Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer)作出更正。更新了实验方案的第3.1、3.3.2、3.4和4.7节,并更新了材料表。
第3.1节实验方案已更新,原内容为:
3.1) 将浓缩的腺病毒原液分装保存于 -80°C,每份含 4 × 108 pfu,足以向 16 只动物每只注射 3 ml,剂量为 2.5 × 107 pfu 的腺病毒颗粒。
至:
3.1) 将浓缩的腺病毒原液分装,每份含 4 × 108 pfu,于 -80°C 冻存,每份可为 16 只动物注射使用,每只注射 3 µl,含腺病毒颗粒 2.5 × 107 pfu。
第 3.3.2 节实验方案已更新,原内容为:
取含有 4 × 108 pfu 腺病毒-Cre 的等分试样,加入足量无菌水中的 3% 蔗糖溶液,定容至终体积 10 ml。向病毒液中加入 34 ml MEM,轻轻混匀。然后加入 4 ml CaCl2 溶液,轻轻混匀,并在室温下孵育 15–20 分钟。
至:
取含有 4 × 108 pfu 腺病毒-Cre 的等份样品,加入足量无菌水中的 3% 蔗糖溶液,调整终体积至 10 µl。向病毒液中加入 34 µl MEM,轻轻混匀。然后加入 4 µl CaCl2 溶液,再次轻轻混匀,并在室温下孵育 15–20 分钟。
第3.4节实验方案已更新,原内容为:
每次注射前,轻轻弹击离心管,确保病毒颗粒充分混匀。用10 ml 注射器吸取3 ml(2.5 × 107 pfu)病毒颗粒,并准备小鼠进行导管内注射。
至:
每次注射前,轻轻弹击离心管,确保病毒颗粒充分混匀。吸取 3 µl(2.5 x 107 将病毒颗粒(pfu)注入10 µl注射器中,并准备小鼠进行导管内注射。
第4.7节实验方案已更新,原内容为:
当针头准确插入乳腺导管后,用持注射器的手的拇指轻轻推动注射器活塞,注入3 ml病毒沉淀物(含2.5 × 107 pfu的腺病毒-Cre)。随着液体注入,乳头应出现轻微膨胀。
至:
当针头准确插入乳腺导管后,用持注射器的手的拇指轻轻推动注射器活塞,注入3 µl病毒沉淀物(含2.5 × 107 pfu的腺病毒-Cre)。随着液体注入,乳头应出现轻微膨胀。
材料表中“备注”部分的第15项已更新为:
10 ml 注射器,RN 系列,每次使用前后均需进行高压灭菌。用 PBS 和 75% 乙醇清洁。
至:
10µl 注射器,RN 系列,每次使用前后均需高压灭菌。用 PBS 和 75% 乙醇清洗。