尽管欧洲兔是群居物种，但将其进行群养仍具有挑战性。因此，必须充分了解成对饲养的实验兔的行为特征和社会结构。本文介绍了一种用于识别配对方法、典型物种等级建立行为以及需要及时干预的行为的实验方案。
需要JoVE订阅才能观看此内容。 请登录或开始免费试用
本文内容
摘要
摘要
新西兰白兔（NZW）实验兔（Oryctolagus cuniculus）及其祖先欧洲兔均为社会性物种，适宜的群养环境可为其带来多种益处。尽管这些兔子天生具有群居习性，但在圈养条件下仍可能出现某些行为问题，若不加以控制，可能干扰实验结果，甚至导致受伤，在极端情况下伤情可能较为严重。为避免这些问题，必须制定完善的配对饲养实验兔的监测与维护方案。本实验方案旨在介绍建立新配对新西兰白兔的有效操作流程，以及实现长期成功共养的管理方法。针对来自供应商的雌性实验兔，已测试多种配对方法，其中最有效的方法强调利用运输过程带来的应激性 bonding 效应、尿液标记行为、在中立笼具中进行配对（避免资源强制共享），并配合系统的监测与干预机制。为确定在标准笼具环境中饲养配对兔的最佳方式，研究人员收集数据以建立行为谱（ethogram）。各种行为被量化分类为积极、中性或消极行为，并在配对组合的整个共养周期中持续追踪，以识别预示配对成功或失败的关键行为指标。基于对群养新西兰白兔行为特征的新认识，研究人员实施了环境丰富化干预措施，以减轻攻击行为并防止受伤，从而显著提高了配对成功的比例。经过数年对不同配对方法的试验、行为谱的建立以及相应丰富化干预措施的优化，人们对支配配对饲养兔子行为的高度复杂社会结构有了显著深入的理解，进而能够提供更符合物种特性的照护方案，并提升动物福利标准。
引言
管理实验动物护理的法规对兔子的群养提供了明确的建议。国际实验动物评估和认可委员会（AAALAC International）用于评估动物护理与使用项目的三项主要标准中有两项描述了符合物种特性的饲养与 housing 的指导原则。这些指导资源中的第一项，即第8版th 版 实验动物护理和使用指南1 （指南）指出，兔子等社会性物种应仅在例外情况下单独饲养，单独饲养不应作为饲养标准。第二，欧洲实验和其他科学用途脊椎动物保护公约2指出兔子本质上是群居动物，应以符合其社会性需求的方式进行群养，除非存在符合资格的兽医或科研相关理由。美国实验室动物福利办公室（OLAW）还规定，单独饲养仅在具备经机构动物照护与使用委员会（IACUC）评估并批准的科学依据、动物之间存在不相容性，或兽医人员对动物健康与福利存在担忧时方可实施。3.
除了满足监管合规要求外，同行评审的文献中提供了许多关于成对饲养新西兰白兔（NZW）所带来的生理和心理益处的实例。为了提供尽可能高的动物福利标准，在满足研究人员特定研究目标的同时，必须提供符合物种天性的饲养环境。群居饲养的新西兰白兔表现出更多的主动行为4，由于活动量增加，其体质增强，并且胃肠道淤滞的发生率降低....
访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。
方案
本方案遵循密歇根大学（U of M）实验动物医学单位（Unit for Laboratory Animal Medicine, ULAM）制定并采用的护理标准，所有动物护理程序与方法均经机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准并接受其监督。IACUC 完全符合《实验动物管理和使用指南》第八版的要求。. 所有兔子均饲养在最小尺寸为0.46 m的笼子中2 每笼饲养数量超过《实验动物照护及使用指南》的最低要求。
1. 对于供应商未预先配对的新到家兔，建立雌性配对的方法。
- 配对前准备以下所有材料：
- 采集雄性兔的尿液。将笼子下方的垫料翻转，使塑料面朝上，尿液积聚在垫料表面。用注射器吸取尿液，并储存于无菌锥形管中。
- 准备一个干净、中立的笼子用于配对。移除中间隔板，使两只兔子可以完全进入并共享两个并排的笼子（也称为一个"doublewide"笼子）。确保该笼子包含以下物品：至少2件低价值的环境丰富化物品和2件高价值、可破坏的环境丰富化物品，至少两个可供躲藏的位置（如栖木、小屋或箱子），食物和水分别设有两个独立的取用点，以及两堆松散的干草。
- 填写《兔社交引入记录表》（图1）。
- 准备一个装有新鲜水的干净喷雾瓶。
- 从运输....
访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。
结果
在为期12个月的时间内，按照上述方案饲养了172对新西兰白兔（NZW）实验兔（雌性占62%，雄性占38%）。在这些配对中，仅有20%的雄性配对和1%的雌性配对因发生争斗而需要分笼饲养，如图所示。 图5分离出用于攻击行为研究的配对个体平均年龄为18.5周。大多数雌雄配对（63%）因与配对无关的研究目的而被分开，29%的配对仍保持在一起，仅有8%的配对因攻击行为而被迫分离。
在这172对中，稳定的配对关系可维持至成年后期，其中年龄最大的雄性配对在分离时为75周龄，年龄最大的雌性配对为92周龄。这两对动物均因研究需要而被分开，在共同生活的期间未出现任何伤口，并表现出充分的亲和行为。 arrival时即配对的无关雌性占雌性配对的21%，其余雌性配对及所有雄性配对均来自本单位转基因繁育群体，自断奶起即共同饲养。
访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。
讨论
在兔子群养项目中，最困难的挑战之一是区分物种典型的攻击性或交流行为与具有问题性的打斗行为。所有参与配对过程监测的饲养和兽医人员都必须深入了解兔子正常的社交行为，因为许多看似打斗的行为实际上是为了建立等级关系所必需的行为，通常不会导致受伤。例如，在稳定的等级结构中，追逐与逃跑是常见的日常行为，用于巩固地位6,29，但未经训练的观察者可能将其误认为危险的打斗行为而要求将动物分笼。实验兔会花费相当比例的时间进行攻击性行为，以维持配对间的等级关系38，而野生环境中的优势个体每天都会频繁要求从属个体表现出顺从行为（如逃跑）15。如果观察者不了解这一事实，就可能导致将实际上行为正常、并无分笼必要的配对错误地分开。由于这些物种典型行为可能表现得较为激烈，因此很难判断何时应进行干预，何时应让配对自行解决问题。这一点在建立新的配对关系、首次确立支配等级时尤为重要。过多的人为干预可能导致配对无法清晰建立支配等级，进而引发配对关系破裂。因此，必须安.......
访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。
披露
作者无任何利益冲突需要披露。
致谢
作者谨向密歇根大学内多个使用兔模型的实验室致以诚挚谢意，感谢其慷慨提供种群资源，特别感谢陈 Eugene 博士的实验室以及转化科学与治疗学先进模型中心（CAMTraST）团队。同时感谢密歇根大学ULAM饲养团队，Jenny Jones 在环境丰富化协调方面的帮助，以及 Katie Wearsch 在配对工作中的协助。
....访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。
材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 欧洲兔饲养 | Allentown, Inc. | RBEURO-06 | 中间隔板已移除 http://www.allentowninc.com/large-animal-housing/rabbit-ferret/ |
| R-Suite 兔类丰富化饲养环境 | Techniplast | 2 个相连的单笼，中间隔板已移除 http://www.tecniplast.it/en/product/r-suite-rabbit-housing-rack.html | |
| 实验动物标记笔 - 标准笔尖 | Ketchum Manufacturing | 蓝色 http://www.ketchum.ca/products/lab-animal/animal-markers/1313/animal-markers-standard-tip | |
| 西部提摩西草 | Oxbow 动物健康 | http://www.oxbowanimalhealth.com/products/type/detail?object=1530 | |
| 喷雾瓶 | Uline | S-18404BLU | https://www.uline.com/Product/Detail/S-18404BLU/Spray-Bottles/24-oz-Blue-Spray-Bottles |
| 兔笼衬垫 | 蓝岭组织 | 定制 Versa-Pak T.1503 30'' X 30'' http://www.blueridgetissue.com/products/#versa_pak | |
| 优质全皮手套 | Wells Lamont | 0-53300-07006-8 | https://www.wellsllamont.com/catalog/product/premium-full-leather-glove/ |
| 各种丰富化玩具 | Bio-Serv | 多种 | https://www.bio-serv.com/category/Rabbit_Enrichment_Devices.html |
| 水果和蔬菜什锦干制零食 | Bio-Serv | F7227 | https://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Treats/FVM.html |
| 白噪声发生器 | HoMedics | https://www.amazon.com/HoMedics-SS-2000G-Relaxation-Machine-Nature/dp/B00A2JBMRE/ref=redir_mobile_desktop/134- 0048439-0235364?_encoding=UTF8&白噪声机&qid=1503569413 &ref_=mp_s_a_1_6_a_it&sr=8-6 | |
| Safari 柔软鬃毛猫用梳 | Safari | https://www.amazon.com/Safari-Soft-Bristle-Brush-Cats/dp/B0002RJMB4 | |
| Crink-l'Nest | 安德森实验室垫料 | CNK | http://www.andersonslabbedding.com/irradiated/crink-lnest/ |
| 曼萨尼塔木啃咬棒 | Bio-Serv | W0016 | http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/W0016.html |
| 经认证的木制啃咬块 | Bio-Serv | K3511 | Small http://www.bio-serv.com/Rabbit_Enrichment_Devices/Wood_Blocks.html |
| 纸袋 | 杜罗 | 自封袋 https://www.amazon.com/Duro-Paper-Lunch-Brown-Count/dp/B01N0AS7QO/ref=sr_1_9?ie=UTF8&qid=1511194982&sr=8-9 &纸袋 | |
| 各种纸板来源 | 动物房回收的供应箱 | 所有纸板在使用前均需进行高压灭菌 |
参考文献
- Council, N. R. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , 8th ed, The National Academies Press. (2011).
- Council of Europe, Publication Section. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental a....
访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。
重印与许可
