头发皮质醇浓度分析为皮质醇的传统检测方法提供了一种替代方案；然而，科学家在采集非裔美国人头发样本时，需要具备文化敏感性和专业能力。本方案的目的是展示一种基于文化认知的技术，用于从非裔美国人中采集头发样本以进行皮质醇分析。
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摘要
摘要
激素皮质醇通常通过唾液、血清或尿液样本进行检测。近年来，已成功从包括人类在内的毛发中提取出皮质醇。毛发中皮质醇浓度的优势在于，它能够反映下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能的回顾性变化，类似于糖化血红蛋白A1C反映血糖控制情况。然而，获取毛发样本可能面临挑战，原因在于少数族裔参与者的文化信仰和护发习惯。例如，非裔美国人可能不愿意提供样本。此外，能够熟练采集非裔美国人毛发样本的研究人员也较少。本文旨在提出一种基于文化背景考量的标准化操作流程，以帮助研究人员更有效地从非裔美国人中获取毛发样本。为展示该流程实施后的代表性结果，本文提供了来自一项社区性慢性应激研究中非裔美国人的去标识化数据。研究中评估了参与者的护发习惯偏好，并在剪发前通过展示毛发样本图片使其感到安心舒适。采用单股扭转并轻柔牵拉的方法，从头皮枕顶区域采集约30至50根毛发。该操作流程将显著提高非裔美国人毛发样本的采集成功率。
引言
采集唾液、血液或尿液样本进行皮质醇分析具有独特的操作挑战性，且对受试者的负担较大，因为该过程需要多次采集唾液样本、静脉穿刺样本或收集24小时尿液。从毛发样本中获取皮质醇是一种简单且可接受的替代方法，可用于替代唾液、血清或尿液样本1,2。毛发中的皮质醇能够提供下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能的回顾性评估。从头皮采集约3 cm长的毛发，可反映过去3个月的平均皮质醇释放水平1。然而，研究人员在对不同人群进行毛发样本采集时会遇到独特的挑战。这些挑战包括与暴露头发相关的宗教或信仰观念（例如，穆斯林女性）、认为头发具有神圣性（如美国原住民群体），或文化规范中将头发与美的标准及自我形象相联系的情况。
在非裔美国人文化中，尤其是女性群体，头皮毛发是其身体形象中极为私密且重要的组成部分3,4。此外，历史上的经历（例如，塔斯基吉实验）持续导致人们对科研过程产生不信任感5。一些非裔美国人的民间传说和文化信仰还认为，毛发样本可能被用于可能造成伤害的仪式中6,
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方案
本研究已获得克利夫兰医学中心大学医院机构审查委员会的批准，且研究方案遵循审查委员会所规定的受试者保护与数据安全指南。
1. 准备参与者进行毛发样本采集及相关问题询问
- 向参与者说明，所采集的头发样本量少于每天梳头时从头部后侧（枕部）正常脱落的头发数量。告知参与者，采样部位会被周围的头发遮盖，因此采集后不会明显可见。同时告知参与者，该样本将用于检测头发中一种名为皮质醇的激素含量10,11。
- 取出样本照片，向参与者展示将要采集的头发数量（30–50根）。
注：头发样本的照片参见图1。 - 询问参与者表1中所列的头发护理习惯12相关问题。
2. 收集毛发样本
- 告知参与者样本将在便携式隔断、窗帘后或关闭的门后等私密区域采集。向参与者保证，如果其佩戴假发或发片，采发区域不会在他人可视范围内暴露。轻轻拉直头发并保持紧绷，从头皮至发梢测量头发长度。
- 若头发较短（小于3 cm），请按照第3步的短发采集流程操作（但如果头发长度不足1 cm，则无法采集样本，....
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结果
在本研究中，共有21名非裔美国人（平均年龄 = 75岁；标准差 = 6.9；女性占85%）同意参与。其中4名参与者（19%）拒绝提供头发样本，2名（9.5%）因头发过短而无法提供样本。共获得并处理了15份头发样本（表2）。所处理的头发样本长度范围为1 cm至4.8 cm。技术问题包括样本在头皮端排列不齐、打结或卷曲，以及美纹纸胶带覆盖在头皮端。
采用单股扭转并轻柔拉拔法处理后，对毛发样本进行排列并测定皮质醇含量。截取靠近头皮端的近端3 cm毛发，经清洗、研磨后，用乙醇提取皮质醇。毛发皮质醇浓度（HCC）采用商用高灵敏度酶免疫分析（EIA）试剂盒，按照制造商说明书进行测定。每个EIA检测板均以先前研磨好的混合毛发作为质控样本，设复孔用于计算板间变异系数。所有样本均设复孔检测。质控毛发池的板间变异系数（CV）低于10%，板内复孔的变异系数（CV）低于4%。毛发皮质醇浓度以pg/mg表示。皮质醇平均含量为20.4 pg/m.......
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讨论
采集毛发样本的关键步骤包括：展示将要采集的毛发量作为示例，指明采样部位（枕部旋涡），采用单股扭转并轻柔牵拉的方法，以及使用 painter's tape 将样本固定在远离头皮端的位置。通过轻柔扭转和牵拉样本，可使卷曲的毛发伸长，并保持头皮端对齐。这有助于减少实验室中用于对齐头皮端、测量和切割样本所需的时间。尽管在以往的研究中曾使用过疏齿剪，但由于其导致头皮端对齐不均且增加样本制备时间，因此并非剪切毛发的首选工具。
从非裔美国人中采集毛发样本以测量皮质醇是可行的。了解毛发在非裔美国人文化中的重要意义，对于获得毛发样本采集的支持至关重要。研究人员不应对毛发卫生状况（例如洗发频率）做出评判，因为与非西班牙裔白人相比，一些非裔美国人的头发往往较为干燥13。非裔美国人的头发生长速度较慢，平均为256 µm/day-1，而非西班牙裔白人的平均生长速率为396 µm/day-1，标准差为55 µm/day-114。.......
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披露
该行为免疫学与内分泌学实验室被Salimetrics, LLC指定为卓越实验室。
致谢
本出版物的完成得益于克利夫兰临床与转化科学协作项目；美国国立卫生研究院转化科学国家中心（NCATS）的 KL2TR000440 项目；以及美国国立卫生研究院医学研究路线图计划。Jodi Ford 博士在此领域的研究工作得到了美国国立卫生研究院国家药物滥用研究所（1R21DA034960）以及美国俄亥俄州立大学人口研究所的种子基金资助，该种子基金来自美国国立儿童健康与人类发展研究所（2P2CHD058484）。本内容仅由作者负责，不一定代表美国国立卫生研究院的官方观点。Laudenslager 博士在此领域的研究工作得到了患者中心化成果研究研究所合同（CE-1304-6208）、儿童与家庭管理局资助（90YR0058）以及科罗拉多大学丹佛分校安舒茨医学校区精神病学系发育心理生物学研究组捐赠基金的资助。
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 专业级剪刀 | Cricket | S-3 550 | 5.5英寸卡装专业理发剪 |
| 大齿梳 | Goody | 无目录编号__Goody Stylista 梳齿梳 | 公司网站链接 http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 |
| 小齿梳 | Goody | 无目录编号_ Goody Start.Style.Finish. 公司网站链接 http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| 酒精棉片 | Kendall Webcol 酒精棉片 | 无目录编号。Kendall Webcol 酒精棉片 | https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps |
| 美纹纸胶带 | 3M Scotch | ScotchBlue ORIGINAL Painter’s Tape | https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/ |
| 永久性记号笔 | Sharpie | 黑色 Sharpie 细头笔 | http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html |
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| 皮质醇ELISA试剂盒 | Salimetrics LLC, State College, PA, USA | 1-3002 (5PK 1-3002-5) | https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit |
| 微量离心管用离心机 | Beckman Coulter | Microfuge 20系列 | http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge |
参考文献
- Sauve, B. K. G., Walsh, G., Tokmakejian, S., Van Uum, S. H. Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure. Clin Invest Med. 30 (5), 183-191 (2007).
- Wright, K. D., Hickman, R., Laudenslager, M. L. Hair cortisol analysis: a promising....
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