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方法文章

稳定蝇及其他蝇样双翅目的实验室饲养

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DOI:

10.3791/57341

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2018年8月3日

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本文内容

摘要

本文介绍了一种饲养厩蝇(Stomoxys calcitrans)的稳定方法。该方法采用当地易得的材料作为饲料成分、设备和耗材。

摘要

厩蝇(Stomoxys calcitrans)是全球范围内对家畜、人类、伴侣动物和野生动物造成严重危害的害虫。在过去20多年中,由于农艺实践的改变,多个国家出现了厩蝇的大规模暴发。这些暴发事件严重影响了畜牧业生产和人类户外活动,导致公众要求加强对该害虫的研究和防控力度。本文介绍了一种简单且低成本的厩蝇实验室饲养方法。该方法使用本地易得的饲料成分、设备和耗材,也可根据需要调整用于饲养其他蝇科昆虫,包括眼蝇(Musca autumnalis)、角蝇(Haematobia irritans)和家蝇(Musca domestica)。采用该方法饲养的厩蝇蛹平均重量为12.5 mg,卵至成虫的存活率约为35%。每个饲养盘可获得约3000只成虫。

引言

厩蝇(Stomoxys calcitrans (L.))是一类吸血性蝇类,其叮咬具有疼痛感,会干扰家畜的放牧行为,导致伴侣动物疼痛与痛苦,并在全球范围内影响人类的户外休闲活动。厩蝇幼虫在发酵的植物性物质中发育,这些基质常被动物排泄物污染。农业耕作方式和作物种类的变化,已导致在澳大利亚的农作物残余物和蔬菜1、巴西的甘蔗2以及哥斯达黎加的菠萝种植区3中暴发严重的厩蝇疫情。尽管每只动物身上仅14只厩蝇即被视为造成经济损失的阈值4,但在近期暴发中,已观测到每只动物身上超过2000只蝇类的极端情况5。如此高水平的侵染可使宿主生产力降至接近零,并可能导致死亡6。由于与农业活动相关的暴发日益频繁,厩蝇正重新受到关注,对实验室种群的需求也急剧增加。

与其他完全变态昆虫一样,厩蝇在幼体或幼虫阶段获取生长所需的全部营养。因此,饲养系统的一个重要组成部分是幼虫的食物或基质。在野外已观察到厩蝇幼虫可在多种基质中发育7,且其发育依赖于基质中的微生物群落8,

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方案

1. 卵的收集(图1)

  1. 准备产卵杯,将一块布的一端放入盛有约500 mL温水(约40 °C)的烧杯中。将布的边缘重叠覆盖在杯口,并用橡皮筋固定。将布的松散端折回并覆盖在杯口上方。
  2. 将产卵杯放入装有8–10日龄成虫的笼中约2小时。饱卵的雌性厩蝇会在布上产卵。
  3. 从笼中取出产卵杯,用挤压洗瓶将卵从产卵布上冲洗至小盘中。

2. 准备幼虫饲养盘

  1. 准备培养基(每培养皿用量)
    1. 将麦麸(500 g)、木屑(200 g)和鱼粉(115 g)加入10 L塑料培养皿中,充分混合。
    2. 将碳酸氢铵(50 g)加入水(约25 °C,1600 mL)中,搅拌至完全溶解。
    3. 将水溶液倒入干性成分中,充分混合以确保无干结颗粒。将培养基在培养皿中铺平,但不要压实。
  2. 接种厩螫蝇卵
    1. 在培养基表面沿培养皿长度方向挖一条浅沟。
    2. 用卵转移移液管将1 mL厩螫蝇卵(约8,000枚卵)接种至沟中(图2)。
      注:卵转移移液管由塑料刻度移液管在所需位置截断后,插入100目筛....

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结果

幼虫在产卵后10–14天化蛹,成虫在产卵后14–16天羽化。世代周期(卵至卵)约为24天。2013年5月至2017年1月期间,使用三种不同填充材料及两个果蝇群体的饲养数据见图5。以杨木屑作为填充材料时产量最高,获得蛹的数量为3867 ±1442(平均值计算公式,x̄ = Σx/n,统计学数据分析,示意图。 ± 标准差),蛹重12.5 ±1.6 mg,羽化率为74 ±19%,每个培养皿可获得2872 ±1294只成虫(来自已建立的实验室群体)。性别比例略偏向雌性,为0.97:1(雄:雌,共记录1,184个培养皿中的77,141只果蝇性别)。卵至成虫的存活率约为36%。遗憾的是,杨木屑近年来越来越难以获取,迫使我们频繁使用松木屑。尽管使用松木屑时产量较低,每皿约1,700只成虫,但个体体型略大,达13 .......

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讨论

稳定蝇在自然界中可在多种基质中发育,并可在实验室中用多种培养基进行饲养。我们曾使用木屑和蛭石作为填充剂。蛭石效果良好,但使蛹壳与培养基的分离变得困难,且成本较高(约0.60美元/盘)。可能由于从培养基中分离蛹壳的操作更为繁琐,使用蛭石时的羽化率也较低,为57%,而木屑为75%。棉白杨木屑的效果与蛭石相近,但有时难以获取。最重要的组分似乎是可发酵并维持环境的植物性或纤维素类物质 "开放" 或通气良好的培养基和氨态氮21,22厩蝇幼虫不会在纯粪便中被发现,而是偏好与植物残渣混合的老化粪便。考虑到这一点,此处所述的饲养方法可根据当地可获取的材料进行调整,以建立经济有效的厩蝇饲养流程。

采用这些方法饲养的家蝇在体型上与野外采集的家蝇相当。翅长与家蝇体重具有相关性23。由于野生家蝇的翅缘常有磨损,我们采用中室(discal-medial cell)的长度作为翅长的指标。采用本方法饲养的249只家蝇中,中室平均长度.......

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披露

作者无任何利益冲突需要披露。

致谢

我们感谢Anthony Weinhold以及多年来与我们合作的众多学生在技术支持方面所做的贡献,以及在改进昆虫饲养流程方面提出的建议。

....

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
DiamaltPremier Malt Products, Inc.,新泽西州萨德尔布鲁克2540
CSMA 果蝇培养基普瑞纳动物营养,明尼苏达州阿登山5S6Z
薄型超长卫生巾美国俄亥俄州克利夫兰市,Tranzonic 公司5001M
Calf MannaMannaPro,美国密苏里州切斯特菲尔德Manna Pro
碳酸氢铵Spectrum Chemical Manufacturing Corp,加利福尼亚州加登纳A1125
小麦麸,粗粒Siemer Milling Company,伊利诺伊州特乌托波利斯
木屑Tractor Supply Company,布伦特伍德,田纳西州502770699
鱼粉Consumer Supply Distributing,南达科他州北苏城F1550
成虫饲养笼林肯铝窗公司,内布拉斯加州自定义45 × 45 × 45 厘米,18 × 16 目铝筛,针织套管开口
9 × 28 cm 黑色棉布Robert Kaufman Fabrics,洛杉矶,加利福尼亚州K040-114蛋布
10 L 塑料托盘Rubbermaid,纽约州萨拉托加斯普林斯FG2951ARWHT幼虫培养皿
棉质纱布,12 英寸 × 25 码卷装Tex-Care 医疗公司,北卡罗来纳州伯灵顿91311-225

参考文献

  1. Cook, D. F., Dadour, I. R., Keals, N. J. Stable fly, house fly (Diptera: Muscidae), and other nuisance fly development in poultry litter associated with horticultural crop production. J. Econ. Entomol. 92 (6), 1352-1357 (1999).
  2. Dominghetti, T. F., de Barros, A. T., Soares, C. O., Cançado, P. H.

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