更正：利用PNA-FISH快速分析小鼠B淋巴细胞中的染色体畸变

摘要

已对以下文章做出更正：利用PNA-FISH快速分析小鼠B淋巴细胞中的染色体畸变。

摘要

已对以下文章做出更正：利用PNA-FISH快速分析小鼠B淋巴细胞中的染色体畸变。 原协议部分遗漏了表1（需配制溶液列表）。表1内容如下：

溶液	试剂	评论	储存
B细胞洗涤缓冲液	500 ml 1×Hanks平衡盐溶液	使用 0.22 μm 无菌滤器过滤	4 °C
	5 ml 50 °C 加热灭活的 FCS
	5 ml 100倍青霉素-链霉素溶液
B细胞培养基	418.5 ml RPMI-1640	通过0.22 μm Stericup滤器过滤	4 °C
	50 ml 50 °C 热灭活 FCS
	5 ml 100倍青霉素-链霉素溶液
	5 ml 谷氨酰胺
	5 ml 非必需氨基酸
	5 ml 丙酮酸钠
	1.8 ml 14.2 M 2-巯基乙醇
	5 ml 1 M HEPES
固定剂	3:1 体积比甲醇/冰醋酸		现配
0.075 M KCl	1.395 g KCl		室温
	250 ml 蒸馏水2O
FISH 预混液	40 ml 50% 硫酸葡聚糖	涡旋混匀溶液，并在摇床中过夜孵育	分装并储存在 -20 °C
	20 ml 20x SSC
	40 ml 无菌蒸馏水2O
70% 甲酰胺/2x SSC	10 ml 20x SSC	用1 M HCl调节至pH 7	分装并储存在 -20 °C
	20 ml 蒸馏水 H2O
	70 ml 去离子甲酰胺
0.01 M HCl	1 ml 1 M HCl	调节至 pH 2.0	室温
	99 ml 蒸馏水 H2O
1x PBS/MgCl₂	50 ml 1 M MgCl₂		室温
	950 ml 1×PBS
50% 甲酰胺/2x SSC	20 ml 20x SSC	调节至 pH 7.25 此步骤中使用的甲酰胺无需去离子。	现配
	80 ml 蒸馏水 H2O
	100 ml 甲酰胺
4x SSC/0.1% Tween20	50 ml 20x SSC		室温
	200 ml 蒸馏水 H2O
	250 μl Tween20
DAPI 染色液（80 ng/ml）	40 μl 0.2 mg/ml DAPI 储存液		4 °C 避光染色瓶中
	100 ml 2×SSC
Mowiol 封片剂	6 g 甘油	50 °C 下搅拌孵育 2 小时	分装并保存于 4 °C
	2.4 g 莫维奥尔 4-88
	6 ml 蒸馏水 H2O
	12 ml 0.2 M TrisCl pH 8.5
	230 μl 1% 硫柳汞（w/v，溶于水）

表1. 溶液列表。 

方案

已对以下文章做出更正：利用PNA-FISH快速分析小鼠B淋巴细胞中的染色体畸变。 原协议部分遗漏了表1（需配制溶液列表）。表1内容如下：

溶液	试剂	评论	储存
B细胞洗涤缓冲液	500 ml 1×Hanks平衡盐溶液	通过 0.22 μm 无菌滤器过滤	4 °C
	5 ml 50 °C 加热灭活的 FCS
	5 ml 100倍青霉素-链霉素溶液
B细胞培养基	418.5 ml RPMI-1640	通过 0.22 μm 无菌过滤装置过滤	4 °C
	50 ml 50 °C 热灭活 FCS
	5 ml 100倍青霉素-链霉素溶液
	5 ml 谷氨酰胺
	5 ml 非必需氨基酸
	5 ml 丙酮酸钠
	1.8 ml 14.2 M 2-巯基乙醇
	5 ml 1 M HEPES
固定剂	3:1 体积比甲醇/冰醋酸		现配
0.075 M KCl	1.395 g KCl		室温
	250 ml 蒸馏水 H2O
FISH 预混液	40 ml 50% 硫酸葡聚糖	涡旋混匀溶液，并在摇床中过夜孵育	分装并储存在 -20 °C
	20 ml 20x SSC
	40 ml 无菌蒸馏水 H2O
70% 甲酰胺/2x SSC	10 ml 20x SSC	用1 M HCl调节pH至7	分装并储存在 -20 °C
	20 ml 蒸馏水2O
	70 ml 去离子甲酰胺
0.01 M HCl	1 ml 1 M HCl	调节至 pH 2.0	室温
	99 ml 蒸馏水 H2O
1× PBS/MgCl₂	50 ml 1 M MgCl₂		室温
	950 ml 1× PBS
50% 甲酰胺/2x SSC	20 ml 20x SSC	调节至 pH 7.25 此步骤中使用的甲酰胺无需去离子。	现配
	80 ml 蒸馏水2O
	100 ml 甲酰胺
4x SSC/0.1% Tween20	50 ml 20x SSC		室温
	200 ml 蒸馏水2O
	250 μl Tween20
DAPI 染色液（80 ng/ml）	40 μl 0.2 mg/ml DAPI 储存液		4 °C 避光染色瓶中
	100 ml 2×SSC
Mowiol 封片剂	6 g 甘油	50 °C 下搅拌孵育 2 小时	分装并保存于 4 °C
	2.4 g 莫维醇 4-88
	6 ml 蒸馏水 H2O
	12 ml 0.2 M TrisCl pH 8.5
	230 μl 1% 硫柳汞（w/v，溶于水）

表1. 溶液列表。