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方法文章

区域选择性O-糖基化核苷via硼酸酯对2',3'-二醇的临时保护合成双糖核苷

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DOI：

10.3791/57897

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2018年7月26日

 ,  ,  , 
1Faculty of Pharmaceutical Sciences, Tokyo University of Science, 2Imaging Frontier Center, Tokyo University of Science

本文内容

摘要

在此，我们介绍了通过区域选择性 O核糖核苷的糖基化 通过 利用环状硼酸酯对其2',3'-二醇基团进行临时保护。该方法适用于多种未保护的核苷，如腺苷、鸟苷、胞苷、尿苷、5-甲基尿苷和5-氟尿苷，以得到相应的二糖核苷。

摘要

二糖核苷由二糖和碱基部分组成，是一类具有多种生物活性的重要天然产物。尽管化学 O-糖基化是合成二糖核苷的一种常用有效策略，但其底物（如糖基供体和受体）的制备需要 繁琐的保护 基团操作，并且每一步合成步骤均需进行纯化。与此同时，已有多个研究团队报道，硼酸酯和硼酸内酯可作为碳水化合物衍生物的保护基或活化基团，实现区域和/或立体选择性的酰化、烷基化、硅基化及糖基化反应。本文展示了利用硼酸对未保护核糖核苷进行区域选择性 O-糖基化的操作步骤。核糖核苷的2',3'-二醇与硼酸发生酯化反应，可实现二醇的临时保护；随后在 p-甲苯亚磺酰氯和三氟甲磺酸银存在下，与糖基供体进行 O-糖基化反应，从而选择性地在5'-羟基位点发生反应，得到二糖核苷。该方法可适用于多种核苷，如鸟苷、腺苷、胞苷、尿苷、5-甲基尿苷和5-氟尿苷。本文及配套视频为未保护核苷及其类似物的 O-糖基化提供了 有用的（可视化）信息，不仅可用于合成二糖核苷，还可用于制备多种具有生物相关性的衍生物。

引言

二糖核苷是核苷与碳水化合物部分通过连接形成的缀合物 通过 一个 O糖苷键构成了一类有价值的天然存在的碳水化合物衍生物1,2,3,4,5,6,7例如，它们被整合到诸如tRNA（转运核糖核酸）和聚（ADP-核糖）（ADP = 腺苷二磷酸）等生物大分子中，也存在于一些抗菌剂及其他具有生物活性的物质中。例如， 腺苷福林、阿米西丁、伊佐霉素5,6,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19因此，二糖核苷及其衍生物有望成为药物发现研究中的先导化合物。二糖核苷的合成方法可分为三类：酶法 O-糖基化20,21化学 N-糖基化5,9,16,22,23,24以及化学 O-糖基化7,9,14,16,18,19,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37特别是化学 O-糖基化将是实现二糖核苷立体选择性合成及大规模合成的一种高效方法。先前的研究表明 O2'-脱氧核糖核苷的糖基化 2 使用硫代糖基供体 1，使用组合的 p在对甲苯亚磺酰氯和三氟甲磺酸银存在下，得到目标二糖核苷 3 (图1A；Ar = 芳基，PG = 保护基团）38.

基于上述结果，我们决定开展以下研究 O核糖核苷的糖基化反应应用 p对甲苯亚磺酰氯/三氟甲磺酸银促进体系。尽管已有多个关于该体系的示例 O部分保护的核糖核苷的糖基化反应已有报道7,9,14,16,18,19,24,32,33,34,35,36,37使用未保护或临时保护的核糖核苷作为糖基受体 O糖基化反应鲜有报道。因此，区域选择性 O对未保护或临时保护的核糖核苷进行糖基化将提供一种更有利的合成方法，从而无需对核糖核苷进行繁琐的保护基操作。为实现区域选择性 O核糖核苷的糖基化反应中，我们关注了硼化合物，因为已有若干报道显示，硼酸或硼酸酯可辅助碳水化合物衍生物实现区域和/或立体选择性的酰化、烷基化、硅基化及糖基化反应39,40,41,42,43,44,45,46,47,48,49,50本文展示了利用区域选择性方法合成二糖核苷的步骤 O核糖核苷5'-羟基的糖基化反应 通过 硼酸酯中间体。在本文所述策略中，硼酸酯中间体 6 将通过核糖核苷的酯化反应获得 4 与硼酸 5，从而实现区域选择性 O使用硫代糖基供体对5'-羟基进行糖基化 7 以得到二糖核苷 8 (图1B)51我们还通过核磁共振（NMR）波谱法研究了核糖核苷与硼酸之间的相互作用，以观察硼酸酯的形成。硼酸酯的酯化反应及糖基化反应均需在无水条件下进行，以防止硼酸酯和糖基供体发生水解。本文展示了为成功实现糖基化反应而建立无水条件的典型操作步骤，可供化学及相关研究领域的研究人员与学生参考。

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方案

注意：所合成化合物的所有实验数据（核磁共振、红外光谱、质谱、旋光度及元素分析数据）已在先前发表的论文中报道51。

1. O-糖基化反应的操作步骤

  1. 化合物的合成 α/β-12（表1中第12项）
    注：第1至13项 表1 采用类似的方法进行。
    1. 核糖核苷2',3'-二醇的临时保护40
      1. 在10 mL梨形烧瓶（烧瓶1）中，溶解甘露糖基供体 α-9 (28.4 mg, 0.0486 mmol)52，尿苷 10 （7.9 毫克，0.0324 毫摩尔）和 4-(三氟甲基)苯硼酸 11c （9.3 mg，0.0490 mmol）溶于无水吡啶（0.40 mL）。
        注意：建议使用10 mL梨形烧瓶，因为在步骤1.1.3.1中，反应混合物将被转移至含有分子筛粉末的烧瓶2（一个带有隔垫的10 mL双颈圆底烧瓶）。
      2. 将反应混合物（步骤1.1.1.1中所得）与无水吡啶（0.40 mL，3次）和无水1,4-二氧六环（0.40 mL，3次）在室温下共蒸发 约 40 °C 以除去水分。
      3. 将步骤1.1.1.2中得到的残余物溶于无水1,4-二氧六环（0.32 mL）中，搅拌反应混合物并回流1小时，以形成硼酸酯（临时保护）。
      4. 使用旋转蒸发仪除去溶剂，随后用真空泵抽干。
    2. 分子筛的活化
      1. 在10 mL双颈圆底烧瓶（烧瓶2）上安装橡胶隔膜，加入4 Å 分子筛粉末（64 mg）
        注意：应根据糖基化反应中使用的溶剂选择合适的分子筛（3 Å 用于乙腈和4 Å 1,4-二噁烷、二氯甲烷和丙腈。
      2. 在常压下用微波加热分子筛，随后在真空泵减压条件下冷却（重复3次），然后在减压下用热风枪干燥，同时多次用氩气置换空气。
    3. 糖基化
      1. 将步骤1.1.1.4所得残余物溶解于1号烧瓶中的丙腈（0.64 mL）或其他溶剂中，并将该溶液转移至2号烧瓶。
        注意：条目1-7和9、条目10、条目11以及条目8、12和13分别使用乙腈、1,4-二氧六环、二氯甲烷和丙腈。
      2. 在室温下搅拌 2 号烧瓶中的反应混合物 0.5 小时，随后将其冷却至 -40 °C.
        注意：温度根据糖基化反应所用溶剂的不同而调整（-40 ℃） °二氯甲烷和丙腈为 C，1,4-二氧六环为室温，-20 °C 表示乙腈。
      3. 加入三氟甲磺酸银（49.9 mg，0.194 mmol）和 对-对甲苯磺酰氯（12.8 µL，0.0968 mmol）加入反应混合物中，温度与步骤 1.1.3.2 所用温度相同。
      4. 搅拌反应混合物 在相同温度下 1.5 小时。
      5. 使用正己烷/乙酸乙酯 [3/1 (v/v)] 作为展开剂，通过薄层色谱法（TLC）检测反应，以监测糖基供体的反应情况 [保留因子（Rf）（供体 α-9) = 0.63] 及氯仿/甲醇 [10/1 (v/v)] 展开，以检测糖基受体和产物 [Rf （受体 10) = 0.03, Rf （目标产物）= 0.50
      6. 用饱和的碳酸氢钠水溶液（1.0 mL）淬灭反应混合物，加入氯仿（2.0 mL）稀释，通过过滤除去不溶性物质 硅藻土，并用氯仿（20 mL）仔细洗涤硅藻土。
      7. 用100 mL分液漏斗将滤液（有机相）依次用饱和碳酸氢钠水溶液（20 mL，3次）和饱和食盐水（20 mL）洗涤。
      8. 用硫酸钠干燥所得有机层，过滤不溶物，并使用旋转蒸发仪浓缩滤液。
      9. 通过柱层析法[硅胶，氯仿/甲醇 = 1/0 - 50/1 (v/v)]对剩余残余物进行粗纯化，得到粗品5'-O-(6"-O-乙酰基-2",3",4"-三-O-苄基-α/β-ᴅ-甘露吡喃糖基)尿苷，含有少量副产物（15.2 mg，无色糖浆）。
    4. 乙酰化
      1. 在5 mL小瓶中，将步骤1.1.3.9中制备的粗产物溶解于无水吡啶（0.20 mL）中。
      2. 加入 N,N-二甲基-4-氨基吡啶（催化量）和乙酸酐（20.4 µL，0.0216 mmol：基于粗品化合物的10当量）加入溶液中，温度保持在0 °C.
      3. 在相同温度下搅拌反应混合物0.5小时，然后升至室温。
      4. 过夜搅拌后，用氯仿/甲醇 [30/1 (v/v)] 进行薄层色谱（TLC）检测反应进程 [Rf (α/β-12) = 0.45].
      5. 用氯仿（20 mL）稀释反应混合物。
      6. 用100 mL分液漏斗，依次以1 M盐酸（20 mL，3次）、饱和碳酸氢钠水溶液（20 mL，3次）和饱和食盐水（20 mL）洗涤有机相。
      7. 用硫酸钠干燥所得有机层，过滤不溶物，然后使用旋转蒸发仪浓缩滤液。
      8. 通过柱层析纯化剩余残余物[硅胶，氯仿/甲醇 = 1/0 - 90/1 (v/v)]，得到 α/β-12 （15.8 毫克，61%） α/β = 1.6/1，无色无定形固体。
  2. 化合物的合成 β-22 至 β-30（表2）和 β-33（表3）
    注意：该合成过程的 β-22 - β-30 和 β-33 采用类似的方法进行。
    1. 化合物的合成 β-22（表2中第1项）
      1. 核糖核苷2',3'-二醇的临时保护
        1. 在10 mL梨形烧瓶（烧瓶3）中，溶解腺苷 13 （20.4 毫克，0.0763 毫摩尔），半乳糖基供体 β-21 (80.4 毫克，0.114 毫摩尔)53和4-(三氟甲基)苯硼酸 11c (21.7 mg, 0.114 mmol) 溶于无水吡啶 (0.76 mL) 中。
          注意：建议使用 10 mL 梨形烧瓶，因为在步骤 1.2.1.3.1 中，反应混合物将转移至含有分子筛粉末的 4 号烧瓶（一个带有隔垫的 10 mL 双颈圆底烧瓶）中。
        2. 将反应混合物（步骤 1.2.1.1.1. 所得）与无水吡啶（0.76 mL，3 次）和无水 1,4-二氧六环（0.76 mL，3 次）在室温下共蒸发 约 40 °C以除去水分。
        3. 将步骤1.2.1.1.2中获得的残余物溶于无水1,4-二氧六环（0.76 mL）中，将反应混合物在回流温度下搅拌1小时，以形成硼酸酯（临时保护）。
        4. 使用旋转蒸发仪除去溶剂，随后用真空泵抽干。
      2. 分子筛的活化
        1. 在一只10 mL带隔垫的双颈圆底烧瓶（烧瓶4）中，加入4 Å 分子筛粉末（150 mg）
        2. 在常压下用微波加热分子筛，随后在真空泵减压条件下冷却（重复3次），然后在减压下用热风枪干燥，并多次用氩气置换空气。
      3. 糖基化
        1. 将步骤1.2.1.1.4中所得残留物溶于3号烧瓶中的丙腈（1.50 mL），并将该溶液转移至4号烧瓶中。
        2. 室温下搅拌反应混合物0.5小时，随后冷却至-40 °C.
        3. 加入三氟甲磺酸银（117.6 mg，0.458 mmol）并 p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）加入反应混合物中，温度与步骤 1.2.1.3.2 中所述相同。
        4. 搅拌反应混合物， 在相同温度下反应1.5小时。
        5. 使用正己烷/乙酸乙酯 [2/1 (v/v)] 通过薄层色谱（TLC）检测反应，以监测糖基供体 [Rf （供体 β-21) = 0.62] 以及氯仿/甲醇 [10/1 (v/v)] 展开，以检测糖基受体和产物 [Rf （受体 13) = 0.05, Rf （目标产物）= 0.30
        6. 用饱和水溶液碳酸氢钠（2.0 mL）淬灭反应混合物，加入氯仿（3.0 mL）稀释，通过过滤除去不溶性物质 硅藻土，并仔细清洗 硅藻土 用氯仿（30 mL）洗涤。
        7. 使用100 mL分液漏斗，用饱和碳酸氢钠水溶液（30 mL，3次）和饱和食盐水（30 mL）洗涤滤液（有机相）。
        8. 用硫酸钠干燥所得有机层，过滤不溶物，并使用旋转蒸发仪浓缩滤液。
        9. 通过柱层析纯化剩余残余物［硅胶，氯仿/甲醇＝1/0 - 30/1（v/v）］，得到 β-22 （27.4 mg，42%，无色固体）。
    2. 化合物的合成 β-23（表2中第2项）
      1. 使用以下条件进行反应 14 (28.4 mg, 0.0765 mmol)54, β-21 (80.5 毫克，0.115 毫摩尔)， 11c (21.8 毫克，0.115 毫摩尔)， p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.8 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。通过柱层析纯化所得残留物［硅胶，氯仿/甲醇＝1/0－50/1（v/v）］，得到 β-23 （21.9 毫克，30%，无色固体）。薄层色谱：Rf (β-23) = 0.37 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    3. 化合物的合成 β-24（表2中第3条）
      1. 使用以下条件进行反应 15 （21.6 毫克，0.0763 毫摩尔） β-21 （80.5 毫克，0.115 毫摩尔）， 11c （21.8 毫克，0.115 毫摩尔） p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.6 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。通过柱层析纯化所得残留物［硅胶，氯仿/甲醇 = 1/0 - 8/1（v/v）］，得到 β-24 （8.1 mg，12%，无色固体）。TLC：Rf (β-24) = 0.20 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    4. 化合物的合成 β-25（表2中第4项）
      1. 使用以下条件进行反应 16 (27.0 毫克，0.0764 毫摩尔)55, β-21 （80.5 毫克，0.115 毫摩尔）， 11c （21.8 毫克，0.115 毫摩尔） p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.8 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。通过柱色谱纯化所得残留物［硅胶，氯仿/甲醇 = 1/0 - 20/1（v/v）］，得到 β-25 （31.4 mg，44%，无色固体）。TLC：Rf (β-25) = 0.27 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    5. 化合物的合成 β-26（表2中第5项）
      1. 使用以下条件进行反应 10 （18.6 毫克，0.0762 毫摩尔） β-21 （80.4 毫克，0.114 毫摩尔） 11c （21.7 毫克，0.114 毫摩尔） p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.6 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。将所得残余物通过柱层析纯化［硅胶，氯仿/甲醇＝1/0 - 40/1（v/v）］，得到 β-26 （26.1 mg，42%，无色固体）。TLC：Rf (β-26) = 0.45 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    6. 化合物的合成 β-27（表2中第6项）
      1. 使用以下条件进行反应： 17 （19.7 毫克，0.0763 毫摩尔）， β-21 (80.5 毫克，0.115 毫摩尔)， 11c （21.8 毫克，0.115 毫摩尔）， p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.6 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。将所得残余物通过柱层析纯化［硅胶，氯仿/甲醇＝1/0 - 40/1（v/v）］，得到 β-27 （33.8 毫克，53%，无色固体）。薄层色谱：Rf (β-27) = 0.50 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    7. 化合物的合成 β-28（表2中第7项）
      1. 使用以下方法进行反应 18 （20.0 mg，0.0763 mmol） β-21 （80.4 毫克，0.114 毫摩尔） 11c (21.7 毫克，0.114 毫摩尔)， p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.6 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。将所得残余物通过柱层析纯化［硅胶，氯仿，然后乙酸乙酯/氯仿 = 1/1（v/v）］，得到 β-28 （38.8 mg，61%，无色固体）。TLC：Rf (β-28) = 0.33 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    8. 化合物的合成 β-29（表2中第8项）
      1. 使用以下条件进行反应 19 (18.5 毫克，0.0761 毫摩尔)， β-21 （80.4 毫克，0.114 毫摩尔） 11c （21.7 毫克，0.114 毫摩尔） p-氯苯磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、硝酸银（117.6 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。将所得残余物通过柱层析纯化［硅胶，氯仿/甲醇 ＝ 1/0 - 10/1（v/v）］，得到 β-29 （34.1 毫克，55%，无色固体）。薄层色谱：Rf (β-29) = 0.25 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    9. 化合物的合成 β-30（表2中第9项）
      1. 使用以下条件进行反应 20 （26.6 mg，0.0766 mmol）56, β-21 （80.6 毫克，0.115 毫摩尔）， 11c (21.8 毫克，0.115 毫摩尔)， p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.8 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。通过柱层析纯化所得残余物［硅胶，氯仿/甲醇＝1/0－50/1（v/v）］，得到 β-30 （28.0 mg，40%，无色固体）。TLC：Rf (β-30) = 0.48 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。
    10. 化合物的合成 β-33（表3中条目1）
      1. 使用以下方法进行反应 18 (20.0 mg，0.0762 mmol) β-31 (80.4 毫克，0.114 毫摩尔)57, 11c (21.7 毫克，0.114 毫摩尔)， p-甲苯亚磺酰氯（30.3 µL，0.229 mmol）、三氟甲磺酸银（117.6 mg，0.458 mmol）、无水1,4-二氧六环（0.76 mL）、无水丙腈（1.50 mL）和4 Å 分子筛（150 mg）。通过柱层析纯化所得残余物［硅胶，氯仿/甲醇＝1/0－30/1（v/v）］，得到 β-33 （34.5 mg，54%，无色固体）。薄层色谱：Rf (β-33) = 0.33 [氯仿/甲醇 = 10/1 (v/v)]。

2. β-28的去保护（图2）

  1. 在5 mL小瓶中，加入β-28（25.2 mg，0.0300 mmol）和10 M甲胺甲醇溶液（2.0 mL）58。
  2. 在0 °C下搅拌反应混合物2小时，随后升温至室温。
  3. 继续搅拌13小时后，使用氯仿/甲醇[10/1 (v/v)]体系通过薄层色谱（TLC）监测反应进度[Rf (β-35) = 0.20]。
  4. 使用旋转蒸发仪浓缩反应混合物。
  5. 将所得残余物溶于水（15 mL）中，用二氯甲烷（15 mL，3次）在50 mL分液漏斗中萃取水相。
  6. 使用旋转蒸发仪浓缩水相。
  7. 通过制备型高效液相色谱（HPLC）纯化剩余残余物[色谱柱：ODS（十八烷基硅烷）色谱柱（20Φ × 250 mm），流动相：含0.1% (v/v) 三氟乙酸的水溶液，流速：8.0 mL/min，检测波长：266 nm，温度：25 °C，保留时间：20 min]，得到β-35（7.9 mg，62%，无色无定形固体）59。

3. 环状硼酸酯的核磁共振研究（图3 和 4）

  1. 36的制备与测定
    1. 在10 mL梨形烧瓶中，溶解尿苷 10 （34.3 毫克，0.140 毫摩尔）和 4-(三氟甲基)苯硼酸 11c （40.0 毫克，0.211 毫摩尔）溶于无水吡啶（1.00 毫升）中。
    2. 在室温下将反应混合物与无水吡啶（1.00 mL，3次）和无水1,4-二氧六环（1.00 mL，3次）共蒸发 约 40 °C以除去水分。
    3. 将残留物溶于无水1,4-二氧六环（1.40 mL）中，将反应混合物在回流温度下搅拌1小时，形成硼酸酯（临时保护）。
    4. 将反应混合物（0.14 mL）分装至5 mL小瓶中。
    5. 使用旋转蒸发仪和真空泵从5 mL小瓶中除去溶剂。
    6. 溶解所得残余物 36 在乙腈中d3 (0.64 mL)
    7. 测量 1H, 11B 和 19F NMR波谱，使用石英NMR管在25 °C.
  2. 38的制备与测定
    1. 准备反应混合物 38 自 11c (40.0 mg，0.211 mmol)，采用与步骤3.1类似的方法。

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结果

O-甘油基化反应中，尿苷10与硫代甘露糖苷α-9反应的结果总结于Table 160,61。在条目1中，10与α-9在无硼酸衍生物存在下进行O-糖基化反应，生成了复杂的混合物。在条目2中，将10与苯基硼酸11a混合，并与吡啶和1,4-二氧六环共蒸发，随后在1,4-二氧六环中于回流温度下搅拌，以实现2',3'-cis-二醇的临时保护，然后加入α-9进行糖基化反应。

在条目 3 - 13 中，O-糖基化反...

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讨论

本文旨在展示一种便捷的合成方法，用于无需繁琐的保护基操作即可制备以未保护核糖核苷为原料的双糖核苷。本文报道了利用未保护核糖核苷进行区域选择性 O核苷的糖基化反应 通过 通过环状硼酸酯对2',3'-二醇的临时保护（图1B)51.

制备环状硼酸酯中间体是其中一个重要步骤。由于核苷与硼酸生成的硼酸酯可能易于水解，因此在反应混合物共蒸发步骤（方案中的步骤 1.1.1.2 和 1.2.1.1.2）以及酯化步骤（步骤 1.1.1.3 和 1.2.1.1.3）中应使用无水溶剂。O-糖基化反应也需要无水条件，以避免糖基供体发生水解。因此，分子筛（步骤 1.1.2 和 1.2.1.2）、双颈圆底烧瓶以及无水溶剂（步骤 1.1.3.1 和 1.2.1.3.1）在用于O-糖基化反应前应充分干燥。

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披露

作者无任何利益冲突需要披露。

致谢

本研究由日本文部科学省（MEXT）科研费资助（编号：15K00408、24659011、24640156、245900425 和 22390005，负责人：Shin Aoki），东京生物化学研究基金会（日本东京）资助项目，以及东京理科大学（TUS）战略研究领域基金资助。我们感谢东京理科大学药学部的泽部典子（Noriko Sawabe）协助完成核磁共振谱（NMR）测定，长谷川芙纪子（Fukiko Hasegawa）协助完成质谱（mass spectra）测定，以及东京理科大学科学技术研究所的松尾知子（Tomoko Matsuo）协助完成元素分析测定。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
三氟甲磺酸银Nacalai Tesque34945-61
苯基硼酸（含有不同量的酸酐）东京化成工业B0857
p甲氧基苯基硼酸和光纯药工业株式会社321-69201
4-(三氟甲基)苯硼酸（含不同量的酸酐）东京化成工业T1788
2,4-二氟苯基硼酸（含不同量的酸酐）东京化成工业D3391
环戊基硼酸（含不同量的酸酐）东京化学工业C2442
4-硝基苯硼酸（含有不同量的酸酐）东京化学工业N0812
4-己基苯硼酸（含不同量的酸酐）东京化成工业H1489
腺苷默克股份公司862.
鸟苷Acros Organics411130050
胞苷东京化学工业C0522
尿苷东京化学工业U0020
5-氟尿苷东京化成工业F0636
5-甲基尿苷SigmaM-9885
甲胺（甲醇中40%） 约 9.8 mol/L东京化成工业M1016
N,N二甲基-4-氨基吡啶和光纯药工业044-19211
乙酸酐Nacalai Tesque00226-15
吡啶，脱水和光纯药工业161-18453
乙腈关东化学01031-96
1,4-二噁烷Nacalai Tesque13622-73
二氯甲烷和光纯药工业130-02457
丙腈和光纯药工业164-04756
4A分子筛粉末Nacalai Tesque04168-65
3A分子筛粉末Nacalai Tesque04176-55
Celite 545RVSNacalai Tesque08034-85
乙腈-D3（D，99.8%）剑桥同位素实验室DLM-21-10
三氟乙酸Nacalai Tesque34831-25
TLC 硅胶 60 F254默克股份公司1.05715.0001
Chromatorex富士Silysia化学公司FL100D
碳酸氢钠和光纯药工业191-01305
盐酸和光纯药工业080-01061
硫酸钠Nacalai Tesque31915-96
氯仿关东化学07278-81
氯化钠和光纯药工业株式会社194-01677
甲醇Nacalai Tesque21914-74
JEOL Always 300JEOL核磁共振（NMR）的测量
Lamda 400JEOL核磁共振测量
PerkinElmer Spectrum 100 傅里叶变换红外光谱仪Perkin Elmer红外光谱测定
JEOL JMS-700JEOLMS 的测定
PerkinElmer CHN 2400 分析仪Perkin Elmer元素分析的测定
JASCO P-1030 数字旋光仪JASCO比旋光度的测定
JASCO PU-2089 Plus 智能HPLC泵JASCO用于高效液相色谱
Jasco UV-2075 Plus 智能紫外/可见光检测器JASCO用于高效液相色谱
Rheodyne 7125 型进样器Sigma-Aldrich58826用于高效液相色谱
Chromatopac C-R8AShimadzu用于高效液相色谱
Senshu Pak Pegasil ODSSenshu Scientific用于高效液相色谱
p对甲苯磺酰基 氯化物已准备  参考文献 38
苯基 6-O-乙酰基-2,3,4-三-O-苄基-1-硫代-α-D-吡喃甘露糖苷（α-9)已准备  参考文献 52
4-甲基苯基 2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷O苯甲酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷（β-21)已准备  参考文献 53
4-甲基苯基 2,3,4,6-四O-苯甲酰基-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷（β-31)已准备  参考文献 57
4-甲基苯基 2,3,4,6-四O苯甲酰基-1-硫代-α-D-甘露吡喃糖苷（α-32)已准备  参考文献 67
6-N苯甲酰腺苷14)已准备  参考文献 54
2-N-异丁酰基鸟苷16)已准备  参考文献 55
4-N-苯甲酰基胞苷20)已准备  参考文献 56

参考文献

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