勘误:植入遥测发射器以获取自由活动实验小鼠心电图、心率、核心体温和活动数据

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2016年10月9日

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摘要

对方案和讨论部分的修正已作出如下调整: 植入遥测发射器以获取自由活动实验小鼠心电图、心率、核心体温和活动数据

摘要

已对以下文章的方案和讨论部分进行了更正:在自由活动的实验小鼠中植入遥测发射器以获取心电图、心率、核心体温和活动数据

方案中的步骤 1.2 已更新为:

1.2 手术前一天进行毛发剪除

植入手术前一天,为进行术前剃毛,将小鼠置于小型(8×8×8 cm)有机玻璃麻醉舱内,使用8%七氟烷或5%异氟烷与纯氧(流速600 mL/min)混合气体进行短暂麻醉。当小鼠失去翻正反射后,将其从麻醉舱中取出,使其仰卧,剪除颈部前侧和腹部的毛发;通过面罩持续给予3–4%七氟烷或1.5–3%异氟烷(纯氧流速600 mL/min)维持麻醉约5分钟。完成剃毛后,让小鼠苏醒,并放回其原有饲养笼中。

至:

在最后一次健康检查后或手术前,为了进行术前备皮,将小鼠置于一个小型(8×8×8 cm)有机玻璃麻醉舱中,使用8%七氟烷或5%异氟烷与纯氧(流速600 mL/min)混合气体进行短暂麻醉。手术前一日剃毛可避免手术区域残留毛茬。当小鼠失去翻正反射后,将其从麻醉舱中取出,并使其仰卧,用剃毛器剪除颈部前侧和腹部的毛发;随后通过鼻罩持续给予3–4%七氟烷或1.5–3%异氟烷与纯氧(流速600 mL/min)维持麻醉约5分钟。完成剃毛后,让小鼠苏醒并放回其原有饲养笼中。

方案中的第 2.3 步已从以下内容更新:

2.3 手术

使用70%乙醇对前颈部和腹部区域的皮肤进行消毒。从胸部下端沿中线向腹部做一长度为1至1.5 cm的皮肤切口。将负极(白色/无色)导线经皮下隧道从胸部引至颈部,并在颈部纵向做一小切口(≤0.5 cm)。分离皮肤及皮下组织,为电极金属环的固定预留空间。将金属环使用两根细丝线(PERMA-Handseide,6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)固定于气管右侧的肌肉之间。随后逐层使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)缝合颈部切口。接着在腹白线处切开腹壁,将遥测发射器本体置入小鼠腹腔内。正极(红色)电极的金属环用丝线缝合固定于剑突,使其位于左上腹部区域的肝脏与膈肌之间(图2)。随后使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)缝合腹壁肌层。在最终关闭腹壁前,为预防感染并维持体液稳态,向腹腔内注射复方磺胺多辛和甲氧苄啶溶液[剂量分别为30 mg/kg和6 mg/kg,溶于1 mL生理盐水(0.9%),并加热至接近体温(38–39°C)]。最后使用皮肤缝合钉(Precise,3 M Health Care,St. Paul,MN,美国)闭合腹部皮肤切口。

至:

2.3 手术

使用浸有70%乙醇、氯己定或碘溶液的棉签对前颈部和腹部区域的皮肤进行消毒,持续5分钟。从胸部下端沿中线向腹部方向做一条长1至1.5 cm的皮肤切口。将负极(白色/无色)导线经皮下从胸部隧道式穿至颈部,并在该处纵向做一个小切口(≤0.5 cm)。分离颈部皮肤及皮下组织,为电极金属环的固定预留空间。将金属环使用两根细丝线(PERMA-Handseide,6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)固定于气管右侧的肌肉之间。随后逐层使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)缝合颈部切口。接着在腹白线处切开腹壁,将遥测发射器本体置入小鼠腹腔内。将正极(红色)电极的金属环用丝线缝合固定于剑突处,使其位于左上腹部区域,介于肝脏与膈肌之间(图2)。然后使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)逐层缝合腹部肌肉层。在最终关闭腹壁前,为预防感染及维持体液稳态,向腹腔内注射磺胺多辛与甲氧苄啶混合溶液[剂量分别为30 mg/kg和6 mg/kg,溶于1 mL生理盐水(0.9%),温度约为体温(38–39°C)]。最后,使用皮肤钉合器(Precise,3 M Health Care,St. Paul,MN,美国)或皮内连续可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)闭合腹部皮肤。

方案中的第 3 步已从以下内容更新:

3. 术后护理

手术和麻醉结束后,皮下注射0.1 mg/kg的丁丙诺啡(Temgesic, Essex Chemie AG, Lucerne, Switzerland)和5 mg/kg的美洛昔康(Metacam, Boehringer Ingelheim, Basel, Switzerland)以进行镇痛处理,并将动物置于温暖(39°C ±1)的操作台表面恢复约2小时。在术后4天内,每天两次给予镇痛药物(丁丙诺啡0.1 mg/kg和美洛昔康5 mg/kg),同时辅以支持性治疗,即每天两次皮下注射300 μL葡萄糖溶液(5%)和300 μL生理盐水(0.9%),均预热至体温。为进一步促进恢复,建议为动物额外提供一瓶含15%葡萄糖溶液的饮用水。在4–10天的恢复期间,建议保持动物体温温暖。因此,在本实验中,小鼠被饲养于恒温箱(30°C ±1)中。术后10天内,每日根据一般状况与健康监测记录表(表1)对动物的一般状态、体重、食物和饮水消耗情况进行一次监测。若恢复进展不理想,为避免不必要的痛苦和折磨,应实施人道终点,即对动物实施安乐死,具体条件如下:

i. 若动物总体状况较差,即动物明显表现出冷漠(触碰或推动后无活动),且尽管已采取保温措施,其体表仍感觉冰冷,则应立即实施安乐死

ii. 如果在植入发射器后的第4天,动物表现出明显的冷漠迹象、极度攻击性或完全不进食,则应立即实施安乐死。

iii. 在植入发射器后的第8天,动物的体重必须相较于术后前几天表现出明显增加。此外,其每日摄食量必须至少达到术前每日摄食量的80%。若上述任一条件未满足,应立即实施安乐死。

植入后第10天,将动物转移回标准饲养条件的动物房。小鼠应按相容的群体进行合笼饲养,以保证其社会互动,并避免长期单只饲养可能对后续实验结果产生的不利影响8, 9。在植入发射器后,小鼠应至少经过4周的恢复期,方可开始首次实验并进行数据采集。

至:

手术和麻醉结束后,皮下注射0.1 mg/kg的丁丙诺啡(Temgesic, Essex Chemie AG, Lucerne, Switzerland)和5 mg/kg的美洛昔康(Metacam, Boehringer Ingelheim, Basel, Switzerland)以进行镇痛处理,并将动物置于温暖(39°C ±1)的操作台表面恢复约2小时。在术后4天内,每天两次给予镇痛药物(丁丙诺啡0.1 mg/kg和美洛昔康5 mg/kg),同时辅以支持性治疗,即每天两次皮下注射300 μL葡萄糖溶液(5%)和300 μL生理盐水(0.9%),均预热至体温。为进一步促进恢复,建议为动物额外提供一瓶含15%葡萄糖溶液的饮用水。在4–10天的恢复期间,建议保持动物体温温暖。因此,在本实验中,小鼠被饲养于恒温箱(30°C ±1)中。术后10天内,每日根据一般状况与健康监测记录表(表1)对动物的一般状态、体重、食物和饮水消耗情况进行一次监测。若恢复进展不理想,为避免不必要的痛苦和疼痛,应实施人道终点,即对动物实施安乐死,具体条件如下:

i. 若动物总体状况较差,即动物明显表现出冷漠(触碰或推动后无活动),且尽管已采取保温措施,其体表仍感觉冰冷,则应立即实施安乐死

ii. 如果在植入发射器后的第4天,动物表现出明显的冷漠迹象、极度攻击性或完全不进食,则应立即实施安乐死。

iii. 在植入发射器后的第8天,动物的体重必须相较于术后前几天表现出明显增加,且每日摄食量必须至少达到术前的80%。若上述任一条件未满足,应立即实施安乐死。

植入后10天,将动物转移回标准饲养条件的动物房。如果使用了皮肤钉合钉,应在手术后7-10天将其拆除;可吸收缝线则无需拆除。小鼠应按相容的群体进行合笼饲养,以允许社会互动,并避免长期单独饲养可能对后续实验结果产生的不利影响8, 9。在进行首次实验并开始数据采集之前,小鼠应在发射器植入术后至少经历4周的恢复期。

4th 讨论部分的一段文字已更新,原文为:

手术过程中应保持无菌条件,以降低微生物负荷和感染风险。然而,由于小鼠存在一些与无菌要求相冲突的特定情况(例如大面积剪毛和消毒带来的降温效应,以及包扎伤口在实际操作中的不可行性),无法实现完全无菌。因此,在植入手术期间需给予抗感染预防措施。个体化设计的镇痛治疗、明确的监测计划以及充分的术后护理,对实验的顺利结局起着至关重要的作用。

至:

手术过程中应保持无菌条件,以降低微生物负荷和感染风险。然而,如果因小鼠某些特定的、影响无菌状态的情况而怀疑无菌操作已被破坏(例如大面积脱毛和消毒带来的冷却效应,以及包扎伤口在实际操作中的困难),则应在植入过程中给予抗感染预防治疗。个体化设计的镇痛方案、明确的监测计划以及充分的术后护理,对实验取得满意结果具有关键作用。

方案

对方案和讨论部分的更正已作出如下修改: 植入遥测发射器以获取自由活动实验小鼠心电图、心率、核心体温和活动数据

方案中的步骤 1.2 已更新,原内容为:

1.2 手术前一天进行毛发剪除

植入前一日,为进行手术备皮,将小鼠置于小型(8×8×8 cm)有机玻璃麻醉舱内,使用8%七氟烷或5%异氟烷与纯氧(流速600 mL/min)混合气体短暂麻醉。待小鼠失去翻正反射后,将其从麻醉舱中取出,仰卧位固定,剪除颈部前侧及腹部的毛发;通过鼻罩持续给予3–4%七氟烷或1.5–3%异氟烷(纯氧流速600 mL/min)维持麻醉约5分钟。完成脱毛后,让小鼠苏醒并放回原饲养笼中。

至:

在最后一次健康检查后或手术前,为了进行术前备皮,将小鼠置于一个小型(8×8×8 cm)有机玻璃麻醉舱内,使用8%七氟烷或5%异氟烷与纯氧(流速600 mL/min)进行短暂麻醉。手术前一日剃毛可避免手术区域残留毛茬。当小鼠失去翻正反射后,将其从麻醉舱中取出,并使其仰卧,用剃毛器去除颈部前侧和腹部的毛发;随后通过面罩持续给予3–4%七氟烷或1.5–3%异氟烷(纯氧流速600 mL/min)维持麻醉约5分钟。完成剃毛后,让小鼠苏醒并放回其原有饲养笼中。

方案中的第 2.3 步已从以下内容更新:

2.3 手术

用70%乙醇对前颈部和腹部区域的皮肤进行消毒。沿中线从下胸部至腹部做一长度为1至1.5厘米的皮肤切口。将阴性(白色/无色)导线经皮下隧道从胸部引至颈部,并在该处纵向做一小切口(≤0.5厘米)。分离颈部皮肤及皮下组织,为电极金属环的固定预留空间。使用两根细丝线(PERMA-Handseide,6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)将金属环固定于气管右侧的肌肉之间。随后分层使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)缝合颈部切口。接着在腹白线处切开腹壁,将遥测发射器本体置入小鼠腹腔内。将阳性(红色)电极的金属环用丝线缝合固定于剑突处,使其位于左上腹部区域的肝脏与膈肌之间(图2)。随后使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)缝合腹壁肌层。在最终关闭腹壁前,为预防感染及维持体液稳态,向腹腔内注射磺胺多辛与甲氧苄啶混合物[剂量分别为30 mg/kg和6 mg/kg,溶于1 mL生理盐水(0.9%)中,并加热至接近体温(38–39°C)]。最后使用皮肤缝合钉(Precise,3 M Health Care,美国明尼苏达州圣保罗)闭合腹部皮肤。

至:

2.3 手术

使用浸有70%乙醇、氯己定或碘溶液的棉签对前颈部和腹部区域的皮肤进行消毒,持续5分钟。沿中线从下胸部至腹部做一长度为1至1.5厘米的皮肤切口。将负极(白色/无色)导线经皮下隧道从胸部引至颈部,并在该处沿纵轴方向做一个小切口(≤0.5厘米)。分离皮肤及皮下组织,为电极金属环的固定预留空间。将金属环固定于气管右侧的肌肉之间,使用两根细丝线缝合(PERMA-Handseide,6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)。随后逐层使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)关闭颈部切口。接着在腹白线处切开腹壁,将遥测发射器主体置入小鼠腹腔内。将正极(红色)电极的金属环用丝线缝合固定于剑突处,使其位于左上腹部区域,并置于肝脏与膈肌之间(图2)。随后使用可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)关闭腹部肌肉层。
在最终关闭腹壁之前,向腹腔内注射复方磺胺多辛和甲氧苄啶溶液[剂量分别为30 mg/kg和6 mg/kg;溶于1 mL生理盐水(0.9%),并加热至接近体温(38–39°C)],以达到抗感染预防和维持体液稳态的目的。最后,使用皮肤钉合器(Precise,3 M Health Care,St. Paul,MN,美国)或皮内连续可吸收缝线(VICRYL 6-0,Ethicon,Norderstedt,德国)关闭腹部皮肤。

方案中的第3步已更新为:

3. 术后护理

手术和麻醉结束后,皮下注射0.1 mg/kg的丁丙诺啡(Temgesic, Essex Chemie AG, Lucerne, Switzerland)和5 mg/kg的美洛昔康(Metacam, Boehringer Ingelheim, Basel, Switzerland)以进行镇痛处理,并将动物置于温暖(39°C ±1)的操作台表面恢复约2小时。在术后4天内,每天两次给予镇痛药物(丁丙诺啡0.1 mg/kg和美洛昔康5 mg/kg),同时辅以支持性治疗,即每天两次皮下注射300 μL葡萄糖溶液(5%)和300 μL生理盐水(0.9%),均预热至体温。为进一步促进恢复,建议为动物额外提供一瓶含15%葡萄糖的饮用水。在4至10天的恢复期间,建议保持动物体温温暖,因此本实验中将小鼠饲养于恒温箱(30°C ±1)内。术后10天内,每日根据一般状况与健康监测记录表(表1)对动物的一般状态、体重、食物和饮水消耗情况进行一次监测。若恢复进展不理想,为避免动物遭受不必要的痛苦,应实施人道终点,即在以下情况下对动物实施安乐死:

i. 若动物总体状况较差,即动物明显表现出冷漠(触碰或推动后无活动),且尽管已采取保温措施,其体表仍感觉冰冷,则应立即实施安乐死

ii. 如果在植入发射器后的第4天,动物表现出明显的冷漠迹象、极度攻击性或完全不进食,则应立即实施安乐死。

iii. 在植入发射器后的第8天,动物的体重必须相较于术后前几天表现出明显增加,且每日摄食量必须至少达到术前的80%。若上述任一条件未满足,应立即实施安乐死。

植入后第10天,将动物转移回标准饲养条件的动物房。小鼠应按相容的群体进行合笼饲养,以允许社会互动,并防止长期单独饲养可能对后续实验结果产生的不利影响8, 9。在进行首次实验并开始数据采集之前,小鼠应在发射器植入术后至少经过4周的恢复期。

至:

手术和麻醉结束后,皮下注射0.1 mg/kg的丁丙诺啡(Temgesic, Essex Chemie AG, Lucerne, Switzerland)和5 mg/kg的美洛昔康(Metacam, Boehringer Ingelheim, Basel, Switzerland)以进行镇痛处理,并将动物置于温暖(39°C ±1)的操作台表面恢复约2小时。在术后4天内,每天两次给予镇痛药物(丁丙诺啡0.1 mg/kg和美洛昔康5 mg/kg),同时辅以支持性治疗,即每天两次皮下注射300 μL葡萄糖溶液(5%)和300 μL生理盐水(0.9%),均预热至体温。为进一步促进恢复,建议为动物额外提供一瓶含15%葡萄糖溶液的饮用水。在4–10天的恢复期间,建议保持动物体温温暖。因此,在本实验中,小鼠被饲养于恒温箱(30°C ±1)中。术后10天内,每日根据一般状况与健康监测数据表(表1)记录动物的一般状态、体重变化以及食物和水的消耗情况。若恢复进展不理想,为避免不必要的痛苦和折磨,应实施人道终点,即在以下情况下对动物实施安乐死:

i. 若动物总体状况较差,即动物明显表现出冷漠(触碰或推动后仍无活动),且尽管已采取保温措施,其体表仍感觉冰冷,则应立即实施安乐死

ii. 如果在植入发射器后的第4天,动物表现出明显的冷漠迹象、极度攻击性或完全不进食,则应立即实施安乐死。

iii. 在植入发射器后的第8天,动物的体重必须相较于术后前几天表现出明显增加,且每日摄食量必须至少达到术前的80%。若上述任一条件未满足,应立即实施安乐死。

植入后第10天,将动物转移回标准饲养条件的动物房。如果使用了皮肤钉合钉,应在手术后7-10天将其拆除;可吸收缝线则无需拆除。小鼠应按相容性分组饲养,以允许社会互动,并防止长期单独饲养可能对后续实验结果产生的不利影响8, 9。在进行首次实验并开始数据采集之前,小鼠应在发射器植入术后至少经过4周的恢复期。

4th 讨论部分的一段已更新为:

手术过程中应保持无菌条件,以降低微生物负荷和感染风险。然而,由于小鼠存在一些与无菌要求相冲突的特定情况(例如大面积剪毛和消毒带来的降温效应,以及包扎伤口在实际操作中的不可行性),无法实现完全无菌。因此,在植入手术期间需给予抗感染预防措施。个体化设计的镇痛治疗、明确的监测计划以及充分的术后护理,对实验的顺利结局具有关键作用。

至:

手术过程中应保持无菌条件,以降低微生物负荷和感染风险。然而,如果因小鼠某些特定的、影响无菌状态的情况而怀疑无菌操作已被破坏(例如大面积脱毛和消毒带来的冷却效应,以及包扎伤口在实际操作中的困难),则应在植入过程中给予抗感染预防治疗。个体化设计的镇痛方案、明确的监测计划以及充分的术后护理,对实验的顺利结局起着至关重要的作用。

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